植物中果膠含量的連續(xù)流動(dòng)測定方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開一種植物中果膠含量的連續(xù)流動(dòng)測定方法，包括如下步驟：1)將植物樣品加入前處理液中，在水浴中加熱回流；2)然后進(jìn)行初次過濾，將初次過濾的濾渣用酸醇溶液沖洗；3)再將沖洗后的濾渣加入到氫離子濃度為1.5mol/L～2.5mol/L的提取液中，在水浴中加熱回流；4)然后進(jìn)行二次過濾，將二次過濾后的濾渣用酸溶液沖洗多次，隨后將二次過濾后的濾液與沖洗液合并、定溶，得到待檢測液；5)將待檢測液吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中，所述待檢測液與吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中的強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應(yīng)顯色，在490nm～540nm波長下進(jìn)行檢測。本發(fā)明專利技術(shù)具有檢測結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及植物組分的提取，尤其涉及一種植物中果膠含量的連續(xù)流動(dòng)測定方 法。
技術(shù)介紹
在植物中果膠含量的測定中，常需用到顯色法檢測，但在顯色法檢測時(shí)，由于色素 會(huì)有一定吸光度，從而對(duì)顯色法造成干擾，同時(shí)糖會(huì)與顯色劑反應(yīng)形成有色物質(zhì)，這也會(huì)對(duì) 顯色法造成干擾，所以在測定過程中，通常都需要先進(jìn)行除糖、除色素的前處理。在植物中 果膠含量的測定中，常用的樣品前處理方法是將植物粉末樣品用濃度為80%的乙醇溶液 加熱回流1小時(shí)，去除濾液，余下濾渣再做進(jìn)一步的提取處理，用于其它檢測，此種方法一 般稱為乙醇處理法，但這種乙醇處理法存在的問題是只能除去小分子水溶性糖，同時(shí)對(duì)色 素的提取也有一定局限性。而在濾渣處理時(shí)，有時(shí)候需要用酸液提取，這就造成之前來被提 取出來的多糖水解而被提取出來，而由于酸的作用破壞了細(xì)胞壁，使之前來能溶解出來的 色素也被提取出來，從而影響最終檢測結(jié)果。在進(jìn)行完前處理后，要對(duì)經(jīng)過前處理的樣品進(jìn) 行檢測?，F(xiàn)有的檢測方法有重量法，由于果膠不是單純半乳糖醛酸的聚合，在采用重量法檢 測時(shí)，支鏈上的中性糖和a-L-(l —2)鼠李糖，以及甲酯化基團(tuán)、乙酰化基團(tuán)同時(shí)被沉淀下 來，所以其重量必然高于對(duì)半乳糖醛酸累計(jì)量。因此，重量法檢測結(jié)果無法反映出樣品中半 乳糖醛酸的含量情況，即無法反映出樣品中表征果膠特性的半乳糖醛酸支鏈骨架的含量情 況。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一種植物中果膠含量 的連續(xù)流動(dòng)測定方法，檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確。本專利技術(shù)提供的一種，包括如下步驟1)將植物樣品加入前處理液中，在水浴中加熱回流；2)然后進(jìn)行初次過濾，將初次過濾的濾渣用酸醇溶液沖洗；3)再將沖洗后的濾渣加入到氫離子濃度為1. 5mol/L 2. 5mol/L的提取液中，在 水浴中加熱回流；4)然后進(jìn)行二次過濾，將二次過濾后的濾渣用酸溶液沖洗多次，隨后將二次過濾 后的濾液與沖洗液合并、定容，得到待檢測液；5)將待檢測液吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中，所述待檢測液與吸入到連續(xù)流動(dòng)分析 儀中的強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應(yīng)顯色，在 490nm 540nm波長下進(jìn)行檢測；其中，所述前處理液為酸醇溶液，所述酸醇溶液的氫離子濃度為0. 005mol/L 0. 05mol/L,以體積百分比計(jì)，所述酸醇溶液的醇濃度為60% 80%。優(yōu)選地，所述酸醇溶液選用鹽酸或醋酸制成。優(yōu)選地，所述酸醇溶液選用乙醇、異丙醇、甲醇中的任一種制成。優(yōu)選地，所述提取液為氫離子濃度為1. 5mol/L 2. 5mol/L的鹽酸溶液。優(yōu)選地，步驟1)中，在80°C 100°C的水浴中加熱回流IOmin 60min。優(yōu)選地，步驟3)中，在80°C 100°C的水浴中加熱回流Ih 汕。優(yōu)選地，所述初次過濾、二次過濾均采用玻璃纖維濾片、活性炭纖維濾片、聚乙烯 濾片、不銹鋼燒結(jié)濾片、陶瓷燒結(jié)坩堝、玻璃燒結(jié)坩堝中的任一種進(jìn)行過濾。優(yōu)選地，步驟幻中將待檢測液與強(qiáng)酸性分解試劑通過螺旋管混合，在待檢測液與 強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)過程中加熱，而后冷卻。優(yōu)選地，所述植物樣品為粉末狀。優(yōu)選地，步驟1)中，所述植物樣品體積較大時(shí)，加入前處理液后先攪拌成漿，再進(jìn) 行水浴加熱回流。優(yōu)選地，所述顯色劑為對(duì)羥基聯(lián)苯溶液，所述對(duì)羥基聯(lián)苯溶液中的各組分配比為 IOOOmL蒸餾水中溶解300mg 500mg對(duì)羥基聯(lián)苯及3g 5g氫氫化鈉。優(yōu)選地，所述強(qiáng)酸性分解試劑為含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液，其中，四硼酸鈉與濃 硫酸的配比為1000mL濃度為92% 99%的濃硫酸中溶解3g 6g的四硼酸鈉。優(yōu)選地，在待檢測液與強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)過程中加熱的溫度為90°C 99°C。優(yōu)選地，冷卻采用匝數(shù)為20匝 50匝的冷卻管冷卻。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)一、由于采用酸醇溶液作為前處理液對(duì)植物樣品進(jìn)行處理，再用氫離子濃度為 1. 5 2. 5mol/L的提取液進(jìn)行提取，從而得到待檢測液，因此，具有如下優(yōu)點(diǎn)1、由于前處理液含有醇，醇可以有效提取植物樣品中的糖和色素，并可以沉淀果 膠；2、由于前處理液含有酸，在酸性條件下，使植物樣品中部分多糖水解成低分子糖， 一并被提取出來，避免多糖在其后酸解時(shí)水解釋放出來而干擾樣品的顯色檢測；通過酸化作用可以破壞植物樣品的細(xì)胞壁，使包裹在里面的色素和糖類組分更容 易被提取出來，從而大幅縮短除糖、除色素的時(shí)間，也有利于其后果膠的提取，可減少其后 的樣品果膠萃取時(shí)間；此外，適當(dāng)濃度氫離子的存在，可以破壞植物組分表面的水化層和電荷，從而有利 于果膠、蛋白質(zhì)等大分子植物組分的沉淀，減小植物組分的溶解和水解造成的損失，提高后 續(xù)測定的準(zhǔn)確性。但酸性過強(qiáng)會(huì)使植物組分水解成為水溶性組分，本專利技術(shù)中的酸醇溶液，氫 離子濃度在0. 005mol/L 0. 05mol/L之間，能夠有利于植物組分的沉淀，而又不會(huì)使植物 組分水解成為水溶性組分；3、較之現(xiàn)有技術(shù)-乙醇處理法只能除去小分子水溶性糖的局限，本專利技術(shù)采用酸醇 溶液處理可以使植物中的多分子糖類水解并被提取出來，避免了在其后酸解浸提果膠時(shí)， 多分子糖類水解被提取出來，避免糖類組分與顯色劑發(fā)生反應(yīng)顯色而對(duì)檢測造成干擾；二、由于采用連續(xù)流動(dòng)法對(duì)經(jīng)過處理得到的待檢測液進(jìn)行檢測，將待檢測液吸入 連續(xù)流動(dòng)分析儀中，與強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，對(duì)待檢測液中果膠進(jìn)行腐化、分解，因而使得 檢測過程更加容易。附圖說明圖1是本專利技術(shù)的流程圖2是本專利技術(shù)中利用連續(xù)流動(dòng)分析儀的檢測流程圖3是半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液顯色后的吸光度掃描譜圖4是樣品提取液顯色后的吸光度掃描譜圖5是分析儀吸光度掃描圖之一；圖6是標(biāo)準(zhǔn)曲線描圖之一；圖7是分析儀吸光度掃描圖之二 ；圖8是標(biāo)準(zhǔn)曲線掃描圖之二。具體實(shí)施方式為使本專利技術(shù)的專利技術(shù)目的、技術(shù)方案更加清楚，以下通過實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說明。參見圖1，本專利技術(shù)的，包括如下步驟Si、將植物樣品加入前處理液中，在水浴中加熱回流；設(shè)置此步驟，可以使植物樣品中的糖和色素被前處理液提取，除去植物樣品中影 響檢測結(jié)果的糖和色素；S2、然后進(jìn)行初次過濾，將初次過濾的濾渣用酸醇溶液沖洗多次；經(jīng)過過濾得到的濾渣，再用酸醇溶液沖洗多次，可以將濾渣上附著的濾液極大程 度地去除；S3、再將沖洗后的濾渣加入到氫離子濃度為1. 5 2. 5mol/L的提取液中，在水浴 中加熱回流；通過此步驟，使得濾渣中的果膠被提取液提取出來；S4、然后進(jìn)行二次過濾，將二次過濾后的濾渣用酸溶液沖洗多次，隨后將二次過濾 后的濾液與沖洗液合并、定容，得到待檢測液；通過此步驟，使得提取液中提取得到的果膠能夠充分收集，得到待檢測液，以使最 終檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確；S5、將待檢測液吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中，所述待檢測液與吸入到連續(xù)流動(dòng)分析 儀中的強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應(yīng)顯色，在 490nm 540nm波長下進(jìn)行檢測；待檢測液通過與強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，使得果膠腐化，轉(zhuǎn)化為可以顯色的衍生物， 從而更便于光度檢測；其中，前處理液為酸醇溶液，該酸醇溶液的氫離子濃度為0. 005mol/L 0. 05mol/ L,以體積百分比計(jì)，該酸醇溶液的醇濃度為60% 80%。其中，顯色劑為對(duì)羥基聯(lián)苯溶液，該對(duì)羥基聯(lián)苯溶液中的各組分配比為1000mL 蒸餾水中溶本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種植物中果膠含量的連續(xù)流動(dòng)測定方法，其特征在于，包括如下步驟：１）將植物樣品加入前處理液中，在水浴中加熱回流；２）然后進(jìn)行初次過濾，將初次過濾的濾渣用酸醇溶液沖洗；３）再將沖洗后的濾渣加入到氫離子濃度為１．５ｍｏｌ／Ｌ～２．５ｍｏｌ／Ｌ的提取液中，在水浴中加熱回流；４）然后進(jìn)行二次過濾，將二次過濾后的濾渣用酸溶液沖洗多次，隨后將二次過濾后的濾液與沖洗液合并、定容，得到待檢測液；５）將待檢測液吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中，所述待檢測液與吸入到連續(xù)流動(dòng)分析儀中的強(qiáng)酸性分解試劑反應(yīng)，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應(yīng)顯色，在４９０ｎｍ～５４０ｎｍ波長下進(jìn)行檢測；其中，所述前處理液為酸醇溶液，所述酸醇溶液的氫離子濃度為０．００５ｍｏｌ／Ｌ～０．０５ｍｏｌ／Ｌ，以體積百分比計(jì)，所述酸醇溶液的醇濃度為６０％～８０％。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：孔浩輝，程志穎，周瑢，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：廣東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：81