槐屬苷的醫藥新用途制造技術

本發明專利技術公開了從槐角等植物中獲得的槐屬苷（Ｓｏｐｈｏｒｉｃｏｓｉｄｅ）在抗腫瘤方面的醫藥新用途，同時也公開了以槐屬苷為制藥原料制備成片劑、膠囊劑、滴丸、注射劑等臨床上可接受的藥物制劑。（*該技術在2023年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術是關于槐屬苷(Sophoricoside，染料木素-4’-葡萄糖苷)在抗腫瘤藥物方面的應用及其藥物制劑，屬于中藥領域。槐屬苷(Sophoricoside)的化學結構式染料木素-4′-葡萄糖苷(genistein-4′-glucoside) R＝β-D-Glu 本專利技術的目的之一是提供了槐屬苷的藥物制劑；本專利技術的目的之二是提供了槐屬苷的抗腫瘤新用途。本專利技術的目的是通過以下技術方案實現的本專利技術的藥物制劑含有1％-99％的槐屬苷和99％-1％的賦形劑(包括其它配用的藥物)，優選含有30％-80％的槐屬苷和70％-20％的賦形劑(包括其它配用的藥物)，最好含有60％-70％的槐屬苷和40％-30％的賦形劑(包括其它配用的藥物)。按藥劑學方法，可以將本專利技術的槐屬苷制備成多種臨床藥物劑型作為抗腫瘤藥物，包括口服制或非腸道給藥的劑型。所說的口服制劑選于片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑中的任何一種；所說的非腸道給藥劑型選自于注射劑、氣霧劑、栓劑或皮下給劑型當中的一種。本專利技術的抗腫瘤藥物中的輔料是指常規的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑等。本專利技術的抗腫瘤藥物中的其它配伍用的藥物，指的是以有效劑量的槐屬苷為一定的藥物原料，再配伍其它已允許合用的中藥或化學藥品。本專利技術的槐屬苷藥物制劑具有抗腫瘤作用，是通過以下的藥效學試驗得到證實的。實驗例1槐屬苷對體外腫瘤細胞的抑制作用細胞 人胃低分化粘液腺癌細胞(MGC-803)、人宮頸癌細胞(Hela)、人黑色素瘤細胞(A375-S2)、人小細胞肺癌(NCI-H446)、人乳腺癌細胞(MCF-7)、人結腸癌細胞(SWILLC)、人星形膠質瘤細胞(U251)、人胃癌細胞(SGC-7901)、人紅白血病細胞(K562)、人肝癌細胞(BEL-7402)、早幼粒白血病細胞(HL-60)等十一種細胞系均購自長春腫瘤醫院。藥品及試劑槐屬苷(Sophoricoside)由吉林天藥科技股份有限公司天然藥物所中藥化學室提供，淡黃色粉末狀結晶；四甲基偶氮唑鹽(MTT)為Sigma公司產品；青霉素G鉀鹽為Sigma公司產品；硫酸鏈霉素Sigma公司產品；HEPES為Sigma公司產品；DMSO為Sigma公司產品；胰酶為Difco公司；新生牛血清(FBS)為北京元亨圣馬生物技術研究所產品；RPMI-1640培養基為Hyclone公司產品。儀器CK2TRC-3熒光倒置顯微鏡，日本OLYMPUS產品；D-63450-CO2培養箱，德國Hera公司產品；FCANF129004酶標儀，澳大利亞TECAN公司產品。實驗方法MTT法 十一種人的腫瘤細胞株按常規方法培養傳代，取對數生長期細胞用于實驗。將細胞以1×105個/mL濃度接種于96孔板(100μL/孔)，培養12h后，實驗組加入各濃度槐屬苷(或5-FU作為陽性對照組)100μL/孔，陰性對照組加入培養液100μL/孔，每組各設4個平行孔，并分別設空白孔(即只加入藥液和培養液，不加細胞)以調零。槐屬苷組分別培養20、44(由于5-FU是抗代謝抗腫瘤藥物，故培養44h)、68h后，加入5mg/mLMTT 20μL，繼續培養4h，棄上清，每孔加入DMSO150μL，混勻，酶標儀(λ＝492nm)測定吸光度(A492)，利用SPSS統計軟件，計算細胞死亡率，求取IC50。實驗結果結果表明，經SPSS軟件統計，槐屬苷對A375-S2、SGC-7901、BEL-7402、MCF-7、K562、Hela、MGC-803、NCI-H446、SWILLC、U251、HL-60等十一種腫瘤細胞均有不同程度的抑制作用，不同濃度槐屬苷對十一種腫瘤細胞的抑瘤率、IC50和5-FU對各細胞的IC50值詳見表1和2。從表1和表2中可以看出，槐屬苷對A375-S2、SGC-7901、MCF-7、Hela和MGC-803細胞的生長抑制作用較強，而對U251、SWILLC細胞的敏感性較差，表明槐屬苷對腫瘤細胞有一定的選擇性抑制作用。此外，比較槐屬苷和5-FU對各細胞的生長抑制曲線，從曲線斜率可見5-FU對細胞的作用較緩和(即曲線的坡度較小)，而槐屬苷對細胞的作用較急劇(即曲線的坡度較大)，槐屬苷和5-FU可能具有不同抗腫瘤的作用機制。表1不同濃度的槐屬苷對十一種腫瘤細胞的抑瘤率 表2 MTT法測定槐屬苷和5-FU對十種腫瘤細胞的IC50 實驗例2槐屬苷對實體腫瘤細胞的抑制作用動物 昆明種小白鼠，動物合格證編號10-1023；C57BL/6純系小鼠，動物合格證編號10-1025。均由白求恩醫科大學實驗動物室提供，體重18-22g，雌雄兼用。瘤株 S180、Hep·A22、ESC、Lewis均由中國醫學科學院藥物所引進，中藥所傳代保存瘤株。藥品 環磷酰胺，南通第二制藥廠生產，批號980301-1。替加氟片(呋喃氟尿嘧啶片)濟南制藥廠生產，批號990412。槐屬苷由吉林天藥科技股份公司天然藥物研究所提供。實驗方法 取荷瘤傳代鼠脫頸椎處死，固定于板上。用碘酊及酒精消毒動物皮膚切開皮膚，選擇腫瘤生長良好，無壞死或液化的瘤組織，按一定比例加入無菌生理鹽水，用組織勻漿器制成含2500萬以上/ml的細胞懸液，于小鼠腋窩皮下接種0.2ml/只，接種部位皮膚先用碘酊及酒精消毒。每個瘤株，每次試驗接種60只雄性鼠，重復試驗時改用雌性，接種后次日隨機分組，每組12只，試驗設高、中、低三個劑量及試驗對照組和陽性藥組，其中高、中、低劑量組分別給予槐屬苷0.8、0.4、0.2g/kg體重，陽性藥組按20mg/kg體重給予環磷酰胺，試驗對照組給相應體積的常水。灌胃給藥，每天一次，給藥10天后處死，稱體重，摘瘤稱重，計算抑瘤率，實驗結果見表3-6。結果上述實驗結果表明槐屬苷對小鼠S180、Hep·A22、ESC及Lewis等實體瘤均有明顯的抑制作用，荷瘤小鼠給藥后，對體重增長無影響，表明該藥無明顯毒副作用。表3槐屬苷對小鼠S180的抑制作用三次重復實驗結果(X±SD)給藥劑量及天數 動物數 荷瘤鼠體重 平均瘤重實驗次數 組別 瘤重抑制率(％)(g/kg×天) (只) (g)(g)第 對照組1226.0±3.4 1.90±0.65一 環磷酰胺 20mg/kg×10 1122.7±3.6 0.75±0.3360.53***次 槐屬苷 0.8×10 1225.6±3.7 1.02±0.5146.32**試 槐屬苷 0.4×10 1225.8±3.6 1.10±0.4542.11**驗 槐屬苷 0.2×10 1225.9±3.2 1.28±0.6232.63*第 對照組 1226.1±3.9 1.90±0.62二 環磷酰胺 20mg/kg×10 1223.0±3.7 0.73±0.3061.58***次 槐屬苷 0.8×10 1225.9±3.8 0.96±0.4049.47***試 槐屬苷 0.4×10 1225.6±3.8 1.24±0.4934.74**驗 槐屬苷 0.2×10 1226.0±3.4 1.38±0.5427.37*第 對照組 12本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種藥物制劑，其特征在于含有治療有效劑量的槐屬苷和一種或多種藥學上可接受的藥用賦形劑，或可與槐屬苷組方的其它藥物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：趙全成，劉威，曲文，赫玉芳，
申請(專利權)人：吉林天藥科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：82[中國|長春]