一種溶葡萄球菌酶復配制劑及其制備方法技術

本發明專利技術公開了一種溶葡萄球菌酶復配制劑。該制劑包括殺菌有效量的溶葡萄球菌酶和溶菌酶。本發明專利技術的制劑不僅殺菌效果較溶葡萄球菌酶高得多，且１０—４０倍于三者殺菌效果的簡單疊加；對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均可達到很強的殺滅作用，而且對白色念珠菌和紅色毛癬菌等真菌也有很好的殺滅效果。本發明專利技術的基本特點為：１．殺菌譜較溶葡萄球菌酶廣；２．殺菌活性和穩定性大大高于溶葡萄球菌酶。３．不易產生耐藥性。４．對機體無毒副作用。（*該技術在2023年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種生物殺菌制劑，尤其涉及一種溶葡萄球菌酶的復配制劑及其制備方法。面對愈來愈嚴重的病菌感染，目前臨床上大量應用的是化學類治療劑，主要是抗生素，但隨著抗生素的廣泛使用，不斷出現許多不利因素，一方面隨之出現的耐藥性細菌越來越多，要消滅它們變得越來越困難；另一方面抗生素帶來的副作用相當嚴重，給病人的身心都造成了一定傷害。因此，醫學界一直在尋找一種可替代抗生素，可起到殺菌效果，但不易產生耐藥性菌株的殺菌制劑。據國內外的專利和文獻，溶葡萄球菌酶可用來治療各類葡萄球菌感染，特別是針對耐藥性金黃色葡萄球菌。單純的溶葡萄球菌酶僅對葡萄球菌等部分革蘭氏陽性菌有殺滅效果，而創面感染往往是多種病原菌的混合感染，況且有很多是革蘭氏陰性菌，如燒傷創面常見的綠膿桿菌、大腸桿菌等，口腔中常見的溶血性鏈球菌等厭氧菌，有的還是真菌感染，如白色念珠菌、紅色毛癬菌。專利(1)CN1353602A治療葡萄球菌感染的組合物和方法2000年3月3日該項技術是通過葡萄球菌細胞壁肽聚糖交聯鍵的溶葡萄球菌酶或其它抗葡萄球菌劑，如溶葡萄球菌酶與一種能有效抑制葡萄球菌的抗生素聯合給藥，能抑制對一種或多種溶葡萄球菌酶或細胞壁活性抗生素耐受的葡萄球菌所致的感染。(2)CN1269727A供治療葡萄球菌感染的只含溶葡萄球菌素或含溶葡萄球菌素和抗生素的藥物組合物1998年7月21日以上專利技術雖然有一定的殺菌效果，但僅是用來對抗葡萄球菌感染，殺菌譜有限。且穩定性差，而且如果將溶葡萄球菌酶與抗生素合用，抗生素對機體的刺激性等副作用仍在，且不能很好的解決耐藥性細菌感染，因而不能達到最佳效果。本專利技術提供了一種溶葡萄球菌酶的復配制劑，該制劑包括殺菌有效量的溶葡萄球菌酶和溶菌酶，其優選的重量比為溶葡萄球菌酶∶溶菌酶＝1∶200～400。其中的溶葡萄球菌酶為野生類型、重組產生、突變異種或保留抗葡萄球菌細胞壁肽聚糖的含甘氨酸交聯鍵的任何重組或有關的酶中的一種或一種以上；溶菌酶為細菌胞壁溶解酶、酵母菌胞壁溶解酶、霉菌胞壁溶解酶中的一種或一種以上。所用的溶葡萄球菌酶是由基因重組產生，枯草桿菌分泌的。所用的溶菌酶是由蛋清中提取的或者基因重組產生。該復配制劑中還包括以制劑總重量計0.2-60％的蛋白質穩定劑和0.5-20％的離子化合物。所述及的蛋白質穩定劑包括聚乙二醇類物質或殼聚糖、甲殼素、N-乙酰-D-氨基等藥用高分子化合物，可以包裹蛋白質或多肽，免受其他物質的破壞，從而增強蛋白質或多肽的穩定性；所述及的離子化合物是K+、Na+、Mg2+、PO43-、Cl-中任意兩種陰離子與陽離子的組合，如NaCl，KCl等，可以輔助增強該復配制劑的穩定性，并可以調節其酸堿度，使之適用于不同部位的創面或黏膜。所述及的聚乙二醇類物質包括是聚乙二醇400、聚乙二醇1000、聚乙二醇1 500、聚乙二醇4000或聚乙二醇6000中的一種或一種以上。為了增強該復配制劑殺菌力，擴大殺菌譜，還包括以制劑總重量計0-20％的殺菌劑。其中殺菌劑是指醋酸氯己定、抑菌肽或者有殺菌作用的中藥提取物，如蒜頭素、麝香草酚、兒茶酚、番茄堿、大黃素等。該復配制劑還包括以制劑總重量計0.1-20％的保鮮劑，保鮮劑是對羥基苯甲酸酯類或苯甲酸鈉中的一種或一種以上。該復配制劑還包括以制劑總重量計0-20％的麻黃素，麻黃素是平滑肌收縮劑，用于創面，可促進創面愈合；還可用于鼻腔，促進黏膜吸收。按照本專利技術，優選的組份和重量百分比含量為溶葡萄球菌酶 0.00001-20％溶菌酶 0.0001-85％蛋白質穩定劑 0.2-60％離子化合物 0.5-20％殺菌劑 0-20％保鮮劑 0.1-20％麻黃素 0-20％。優選的組份和重量百分比含量為溶葡萄球菌酶 0.1-20％溶菌酶 50-85％蛋白質穩定劑 0.2-30％離子化合物 0.5-20％殺菌劑 1-20％保鮮劑 0.1-20％麻黃素 0-20％。本專利技術的制劑的制備方法可采用常規的物理混合，將各組分按比例混合，然后灌裝于塑料或玻璃瓶中，入庫，室溫保存即可。所產生的各個復配物不僅殺菌效果較溶葡萄球菌酶高得多，且10-40倍于三者殺菌效果的簡單疊加；各個復合物的殺菌譜也明顯擴大，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均可達到很強的殺滅作用，而且對白色念珠菌和紅色毛癬菌等真菌也有很好的殺滅效果。1％濃度溶葡萄球菌復合酶制劑溶液經上海市預防醫學研究院檢測，經檢測作用皮膚表面2-10分鐘可迅速殺滅淋球菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌等，殺滅率達99.9％。具有殺菌效果好，無刺激等特點。對臨床各科收集到的400多株細菌進行了該制劑的抑殺菌實驗。實驗結果表明1％濃度溶葡萄球菌復合酶制劑溶液對臨床上常見的金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌、肺炎雙球菌、D群腸球菌、四聯球菌、產單核李斯特菌、鏈球菌以及胃幽門螺旋桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌等均有明顯的抑殺作用。純溶葡萄球菌酶在常溫下很不穩定，復配的溶葡萄球菌復合酶中含有多種我們篩選的穩定劑和增效劑，穩定性大為增強，使之可適用于工業化規模生產。溶葡萄球菌酶和溶葡萄球菌復合酶酶活穩定性實驗比較，經37℃保存3個月(相當于常溫保存2年)，見表1、表2。表1溶葡萄球菌酶37℃3個月放置前后酶活性比較 表2溶葡萄球菌復合酶37℃3個月放置前后溶葡萄球菌酶活性比較 由上表可見溶葡萄球菌復合酶中的溶葡萄球菌酶酶活穩定性較純溶葡萄球菌酶高。實驗還證明溶葡萄球菌復合酶制劑對耐藥性菌株，如目前醫學臨床上最感棘手的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌，耐藥性肺炎雙球菌、嗜麥芽窄食單孢菌的殺滅效果更優于常用抗生素。其基本特點為1.殺菌譜較溶葡萄球菌酶廣。不僅能有效殺滅葡萄球菌、葡萄球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、肺炎雙球菌、D群腸球菌、四聯球菌、產單核李斯特菌、鏈球菌、厭氧菌、嗜麥芽窄食單孢菌等常見致病細菌，對淋球菌、胃幽門螺旋桿菌也有很強的殺滅作用。此外對一些耐藥性細菌，如耐藥性金黃色葡萄球菌、耐藥性肺炎雙球菌等也顯示出極強的殺菌效果。2.殺菌活性和穩定性大大高于溶葡萄球菌酶。由于溶葡萄球菌復合酶是以溶葡萄球菌酶為主要成分，配以溶菌酶、上述小分子化合物及穩定劑、增效劑等成分復合而成，比純的溶葡萄球菌酶具有更大的穩定性，經測試證明，該產品在常溫下可保存2年。3.不易產生耐藥性。作為主要活性成分的溶葡萄球菌酶和溶菌酶，具有獨特的殺菌機理，溶葡萄球菌酶是通過專一性的切斷胞壁肽聚糖中的甘氨酸鍵，達到快速殺死致病菌的效果；而溶菌酶則能作用于胞壁中的β-1，4糖苷鍵或β-1，3葡聚糖，使之斷裂。兩種酶以一定的比例進行復配，協同作用，雙重裂解細菌細胞壁，因而細菌不易對其產生耐藥性。4.對機體無毒副作用。溶葡萄球菌酶和溶菌酶均為蛋白質產品，對皮膚和粘膜產生刺激，不對機體產生任何形式的毒副作用，并可通過代謝徹底降解，沒有殘留，不會富集。添加了本專利技術復合酶制劑可用于治療膿腫、皮癬、潰瘍、褥瘡、燒傷、燙傷、灼傷、癤、割傷、口腔潰瘍、陰道炎、各類由細菌感染引起的口腔疾病、呼吸道疾病和急慢性胃炎，各類外耳道炎癥、中耳炎、角膜炎、眼眶蜂窩織炎、結膜炎、麥粒腫、急慢性鼻炎、鼻竇炎、預防性病、水產的細菌性疾病、防治粉刺、各類由細菌、真菌本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種溶葡萄球菌酶復配制劑，其特征在于該制劑包括本專利技術提供了一種溶葡萄球菌酶的復配制劑，該制劑包括殺菌有效量的溶葡萄球菌酶和溶菌酶。

【技術特征摘要】
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【專利技術屬性】
技術研發人員：陸婉英，黃青山，
申請(專利權)人：上海高科生物工程有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]