具有調血脂、降血糖作用的女貞葉分離物、分離方法及用途技術

一種具有調血脂、降血糖作用的女貞葉分離物，主要是以女貞葉為原料，經醇提、浸膏水洗、醇溶、脫色、除醇等步驟所制得的一種淡黃白色粉末，以此為主要成分可制成調血脂、降血糖的藥物，經藥理、毒理等實驗表明：該提取物及其制劑能調整血異常及防治動脈粥樣硬化，治療Ⅱ型糖尿病。（*該技術在2016年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種女貞葉分離物，其分離方法及以他們作為有效成分制備的調血脂、降血糖藥物。女貞系木樨科女貞屬植物，其干燥果實即女貞子，為傳統中藥，功效為補肝腎、強腰，烏須、明目。女貞葉，《本草綱目》中所記載的功效為“除風散血、消腫定痛，治頭目昏痛，諸惡瘡腫”等；《貴州民間方藥集》中有女貞葉“外敷止因傷出血，消炎消腫，治燙火傷；內服可止咳嗽，止吐血”的記載。七十年代國內有人對女貞葉的化學成分進行過研究，如1976.1《中草藥通訊》刊出的侯遇成文“女貞葉化學成分的研究”，文中公開了從女貞葉的醇浸出物中，分離得兩種針狀結晶，經鑒定，其一為右旋甘露醇，為止咳的有效成分；其二為熊果酸(Ursolie acid)，作者未能指出其藥理作用。至本專利技術之前，國內一些醫療單位如四川自貢市防治慢性氣管炎協作組等主要利用女貞枝葉的水煎劑，治療慢性氣管炎。本專利技術的目的有二一是提供具有調血脂、降血糖作用的女貞葉分離物；二是提供以女貞葉分離物為主要成分制備的調血脂、降血糖藥物。本專利技術以干燥的女貞葉為原料，經乙醇回流、提取，得乙醇浸膏，經沸水洗滌后，其水不溶物經醇溶、脫色、除醇等步驟，所得的一種淡黃白色粉末即為女貞葉分離物。下面詳述從女貞葉中制備女貞葉分離物的實施例實施例稱取干燥女貞葉50KG，裝入多能提取罐中，加乙醇回流提取2次，第一次加乙醇6倍量，回流提取2小時，第二次加乙醇4倍量，回流提取1小時，合并2次濾液，回收乙醇至浸膏稱重7.8KG。取浸膏于搪瓷罐中，加熱蒸去剩余的乙醇，加水約為浸膏的25倍，煮沸洗滌15-20分鐘，冷卻后，置離心機甩干，得水不溶物，甩干，80℃烘干，稱重2.2KG。取上述水不溶物2.2KG于多能提取罐中，加乙醇為水不溶物的50倍，加熱回流使溶解，加0.5-1.0％活性炭，回流脫色30分鐘，趁熱過濾，將濾液除醇蒸于得淡黃白色粉末亦即女貞葉分離物。上述工藝摒棄了目前在植物藥研究中對此類化合物提取分離過程中大量使用乙醚、苯、氯仿等對環境污染嚴重、生產不安全的一類有機溶劑，僅僅只采用乙醇和水，使操作方便安全，便于工業生產，對設備無特殊要求，無污染，質量穩定，平均得率高，女貞葉分離物中熊果酸的含量不低于70％。下面是用本專利技術的工藝制備的三批女貞葉分離物的收率與含量。 </tables>經對上述女貞葉分離物，根據衛生部新藥(中藥)二類研制申報的有關要求，開展藥理、毒理等方面的研究如下一、藥效學研究1.調血脂試驗研究(1)對實驗性高脂血癥大白鼠和家兔均有明顯的降低TG，TC，LDL-C和VLDL-C(P＜0.01)和提高HDL-C(P＜0.01)的作用，并能降低實驗性動物的動脈粥樣硬化AI指數。(2)與安妥明對照組比較，原料藥高劑量(1000MG/KG)藥效優于安妥明，中劑量(500MG/KG)與安妥明藥效相當。(3)對正常大白鼠和家兔的血脂水平無明顯影響(P＞0.05)。2.降血糖試驗研究(1)對鏈脲霉素(STZ)誘發的糖尿病大白鼠模型，三個不同劑量(250MG/KG，500MG/KG，1000MG/KG)均有明顯的降血糖和減少飲水量，排尿量和尿糖的作用，三劑量呈現一定量效關系。低劑量組與降糖靈對照組比較藥效相當，停藥一星期后，仍維持一定的降血糖作用。(2)對四氧嘧啶誘發的糖尿病小白鼠模型三個不同劑量(30MG/KG，60MG/KG，100MG/KG)均有明顯的降血糖，亦呈現一定量效關系。(3)對正常大小白鼠血糖水平無影響。二、一般藥理學研究1.對神經系統作用以250，500，1000MG/KG的劑量對NIH種小白鼠灌胃給藥，連續7天用Irw in分級法和光電計數法試驗均證明對自主活動無明顯影響。2.對心血管系統作用以250，500，1000MG/KG的劑量對SD種大白鼠灌胃給藥，連續7天。麻醉后，記錄其心率、心電圖和血壓與空白對照組比較沒有明顯差異。3.對呼吸系統作用大白鼠在麻醉情況下，先測定呼吸頻率，一小時后灌胃，分別以原料藥250，500，1000MG/KG劑量灌胃給藥，繼續測定在呼吸過程中呼吸頻率，結果與給藥前后基本一致。三、毒理研究1.大、小白鼠急性毒性試驗大白鼠10只和小白鼠20只，雌雄各半，每只灌胃給予供試品0.5ML(即320MG/20G，相當16000MG/KG)，經觀察給藥14天內動物進食正常，體重增加，全部健全，14天后解剖全部動物，未發現主要器官心、肝、脾、肺、腎、腸等有肉眼可見的病變，因此認為本品基本無毒。2.大白鼠長期毒性試驗取體重130-160G大鼠隨機分成原料藥的高、中1、中2、低四種劑量，降糖靈和空白對照組等六組。原料藥的劑量——高劑量為7500MG/KG(相當于成人日用量250倍)，中1劑量為1500MG/KG(相當于成人日用量的50倍)，中2劑量為750MG/KG(相當于成人日用量的25倍)，低劑量為300MG/KG(相當于成人日用量的10倍)，降糖靈為75MG/KG(相當于成人日用量的25倍)，每組20只雌雄各半，進行了為期三個月的大鼠長期毒性試驗研究，結果表明(1)本品高、中1、中2、低四組連續給藥三個月內動物進食正常，體重增加。(2)對體內血象、肝、腎功能血糖、尿糖及尿常規皆無明顯影響，恢復期亦未見延續性損害。(3)解剖大鼠未見主要器官心、肝、脾、肺、胃、腸有明顯肉眼可見的病變，停藥24小時及恢復期，各組重要器官心、肝、脾、肺、暖的臟器系數基本一致，無腫大或縮小的病變。(4)降糖靈組部分大鼠出現稀便的副作用。3.狗長期毒性試驗本試驗為期六個月選用雜種狗8條，均分給藥組和空白對照組，每組四條雌雄各半，給藥組以原料藥900MG/KG的劑量(相當于臨床成人日用量1500MG的30倍)以喂飼方法給藥，每周給藥6天，給藥量隨每月體重變化按規定劑量進行調整，試驗表明(1)動物一般癥狀及體重觀察，給藥組動物精神、活動、毛發、糞便、飲食正常。至第4個月后，體重顯著增長，空白組體重每月直線增長。(2)外周血象給藥各期(1-6)對血紅蛋白值無明顯影響，白細胞計數及分類比值在正常范圍內波動。(3)對暖功能影響原料藥組的血清谷丙轉氨酶值，尿素氮與空白對照組一致。恢復期亦無明顯變化，血清堿性磷酸酶值，乳酸脫氫酶值，肌酐值均在正常范圍。(4)大體觀察與病理鏡檢試驗后大體觀察主要器官心、肝、脾、肺、腎、胃、腸解剖位置正常，無異位，反位，畸形，脾大或縮小和其它肉眼可見病變，病理鏡檢結果表明，無明顯病理改變。綜上試驗結果，本品以900MG/KG長期服用無明顯毒性反應和損害。以下是女貞葉分離物的質量標準1.性狀淡黃白色粉末，氣無味淡；2.鑒別(1)按三萜類化合物進行鑒別反應。(2)按中國藥典規定的薄層色譜法，取原料藥與熊果酸對照品溶液點于同一薄層板上進行層析對照，在相應位置顯相同的玫瑰紅色斑點，Rf值為0.75-0.85。3.檢查按中國藥典規定在105℃干燥恒重，減失重量不超過5％。4.含量測定采用香草醛—高氯酸比色法與熊果酸標準品曲線進行對照，測定原料藥中熊果酸的含量。5.功能與主治本品可用于調整血脂異常及防治動脈粥樣硬化，治療II型糖尿病。6.用法與用量一天三次，一次300MG，8周為一療程。7.貯藏置陰涼干燥處保存。8.有效期暫定二年。以上述女貞葉分離物為主要成分可按一般本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種藥用女貞葉分離物，其特征是： Ａ．該女貞葉分離物中，熊果酸的含量不低于７０％。 Ｂ．與熊果酸對照品溶液點于同一薄層板上對照，在相應位置顯相同的玫瑰紅色斑點，Ｒ↓［ｒ］值為０．７５－０．８５；。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：林美玉，
申請(專利權)人：三九黃石制藥廠，
類型：發明
國別省市：42[中國|湖北]