氨苯砜作為神經保護劑在制備腦中風藥物中的應用制造技術

本發(fā)明專利技術涉及氨苯砜作為針對患者腦中風相關的致殘后果的首選有效治療的應用。在大鼠大腦中動脈閉塞引起的腦中風模型和患有由血栓栓塞引起的急性腦中風患者中評價了作為神經保護劑的氨苯砜。在這兩項研究中，氨苯砜均顯示出使作為所述中風的后果發(fā)生的有害影響減輕７０％至９０％。（*該技術在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術】
技術介紹
對于腦中風的藥物治療，過去曾經應用過一些臨床療效甚微的藥物；其中我們可提及的有胞磷膽堿。在2002年出版的近期研究(Davalos A，Castillo J.，Alvarez-Sabin J.，Secades JJ.，Mercadal J.，Lopez S.，Cobo E.，Warach S.，Sherman D.，Clark WM.，Lozano R.，Oralciticoline in acute ischemic strokean individual patient data poolinganalysis of clinical trials.Stroke 33(12)2850-2857，2002)中，表明該藥給予腦中風患者三個月后，產生平均25％的改善，而接受安慰劑的患者平均改善20％。從這些結果可以推斷，該藥物治療不能使腦中風相關的腦損傷降低平均多于20-30％。另一方面，防止腦中風后果的新藥的研究和開發(fā)取得了令人失望的結果。例如美國食品藥品管理局2001年批準了5種針對心臟病的藥物，但是沒有針對腦中風的藥物。這得出這樣的事實對于該嚴重疾病沒有選擇性的藥物治療。本專利技術的目的是證明氨苯砜作為針對患者腦中風相關的致殘后果的首選有效治療的應用。氨苯砜是目前已經使用的藥物，其用于麻風病的化學治療以及卡氏肺囊蟲(pneumocystis carinii)引起的肺炎的預防。考慮到麻風病是一種不常見的疾病，氨苯砜的治療應用近來受到局限。急性腦中風是世界人群中排名第三的死因，并且是造成殘疾的主要原因。考慮到腦中風意味著社會擔負患者康復和醫(yī)療保健費用的嚴重后果，因此研究了比現(xiàn)有治療藥更有效的新的治療藥，合成氨苯砜作為新的神經保護化合物。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術的目的是開發(fā)一種用于在急性腦中風治療中治療使用的產品。該疾病在世界人群中廣泛分布，僅在美國每年就有500000-750000人發(fā)病，因此決定尋求比目前使用的產品更有效的其他治療產品。在研究比目前用于腦中風藥物治療更有效的新型治療藥的過程中，合成了作為下式的化合物的氨苯砜 自從八十年代以來藥物氨苯砜在墨西哥已經不生產，并且它的原料也已不生產。由于上述原因，通過實驗模型以及通過急性腦中風患者臨床對照試驗，本文的工作表明，當缺血事件發(fā)生后的最初十二個小時之內給藥時，氨苯砜有效地防止該疾病的有害后果。采用將縫合線通過動物的頸內動脈引起大鼠大腦中動脈永久性梗塞的急性腦中風實驗模型(實施例1)來進行藥理學測試。該藥物還給予急性腦中風患者，所述患者參加the Emergency Services of theNational Institute of Neurology and Neurosurgery“Manuel VelascoSuarez”，in Mexico City(實施例2)。大鼠實驗結果表明，9.325毫克/千克劑量的氨苯砜(I)具有93％的療效，而12.5毫克/千克劑量的療效為91％，所述療效指降低大鼠實驗性中風模型中激發(fā)的中風引起的腦損傷的體積。患者中的療效結果表明，劑量達200毫克的氨苯砜能使平均67％的患者的神經癥狀改善。氨苯砜的有效劑量為0.013毫摩爾/千克。所使用的劑量沒有副作用出現(xiàn)。特別地，使用下述技術氨苯砜的合成氨苯砜可以通過不同的路線合成，下面的合成僅作為實例提供。所述合成分兩步進行1.-將60克N-乙酰苯胺置于錐形瓶中，緩慢加熱直至所有固體物質熔化。將所得粘稠液體使用冰浴冷卻，在該錐形瓶瓶底留下固體物質。不移去冰浴，加入165毫升氯磺酸。之后，從冰上移去該錐形瓶，小心攪拌，進行反應10分鐘，10分鐘結束時將反應混合物再次加熱直至剩余的N-乙酰苯胺完全溶解，再繼續(xù)反應10分鐘。將產物冷卻，并小心倒入盛有冰和水的容器中，過濾沉淀并用冷水洗滌。收集該沉淀，溶于氯仿中，并用水萃取3次，收集氯仿相，將其置于冰浴上，沉淀純化的亞硫酰氯(cloruro de tionilo)(報告的中間產物熔點為149℃)。2.-將123.6毫升無水硝基苯置于反應容器中，加入89.2克氯化鋁并緩慢加熱；向該熱混合物中加入41.3克亞硫酰氯，將該反應混合物加熱至140-145℃的溫度，并緩慢加入13克N-乙酰苯胺，保持該反應溫度兩小時。在該期結束時，將粗反應物倒入104毫升鹽酸酸化的水中，沉淀出深色產物，將其用稀乙酸重結晶。重結晶和過濾之后，將該固體物質與5N鹽酸一起回流30分鐘，之后中和反應混合物，沉淀白色晶體(粗DDS)，將其用乙醇重結晶。氨苯砜的合成 合成化合物的化學性質為確定所合成的化合物的真實性，測量它們的熔點，結果反應中間產物亞硫酰氯的熔點為151-153℃，DDS的熔點為172-175℃。這些化合物已報道的熔點中間產物和DDS分別是149℃和175-176℃。本專利技術的優(yōu)選實施方式實施例1-氨苯砜在大鼠大腦中動脈閉塞引起的急性腦中風中的神經保護作用的評價在大腦中動脈閉塞產生的急性腦中風模型中評價作為神經保護劑的氨苯砜。將該藥物懸浮于適當?shù)妮d體中。3組動物每組5只，在如下所述的大腦中動脈閉塞后30分鐘，通過腹膜內途徑注射等滲鹽水(SSI，對照組)、氨苯砜(12.5毫克/千克)和氨苯砜(9.375毫克/千克)來治療。通過將縫合線穿過頸動脈管腔在動物體內產生永久性選擇性腦缺血。在外科手術過程中，所有動物都通過面罩接受1.5％氟烷(halotane)的持續(xù)麻醉。將動物仰臥位放置，固定，頸前區(qū)備皮，以沿胸骨向胸骨舌骨肌(sternohiodeous muscle)區(qū)至其側緣的中線做切口，分辨該側胸鎖乳突肌中緣以及其深面頸淺筋膜，切除該部分以暴露頸總動脈弓(common carotid blow)以及深層二腹肌后腹。切開頸總動脈至舌下環(huán)(hypoglose loop)。分辨頸動脈分支，頸外動脈及其枕動脈和甲狀腺動脈分支，后兩者用8-0單絲尼龍線連接，并電凝其后的切開。將頸內動脈切開約5毫米的長度，同時分辨翼腭動脈。置入微芯片或將其用6-0單絲尼龍線連接。一旦將通過這些動脈流出的血流停止，將3-0單絲尼龍線通過頸外動脈根部向頸內動脈引入至距分支處17毫米的長度。縫合傷口，允許動物恢復，自由飲食水。所有病例，通過肉眼觀察及線的位置證實缺血。大鼠中氨苯砜神經保護作用的評價缺血操作后的96小時中，用功能量度每24小時對動物進行神經學評價。所述量度根據(jù)動物表現(xiàn)的癥狀嚴重程度建立，等級從0至50＝沒有神經學改變；1＝難以完全伸展前肢；2＝向右轉圈運動；3＝向右倒；4＝動物不能自然行走并且意識水平降低；5＝死亡。組織損傷體積的測定96小時的觀察之后，用過量的巴比妥鈉通過腹膜內途徑處死動物，并通過顱骨切除術取出它們的腦。一經取出，用無水乙醇將腦固定兩周。進行常規(guī)組織學方法，10微米切片，每200微米保存一切片。后者用蘇木精-伊紅技術染色。所有切片均由一名不知道治療組的病理專家觀察，用肉眼和顯微鏡確定缺血區(qū)域。用數(shù)字分析系統(tǒng)和照相放大器確定每張組織切片的面積。所有病例放大比為1∶10。根據(jù)該病理專家的檢查，對每張切片評估3個測量結果A)總面積，包括室面積；B)室面積；C)缺血面積。用下式確定損傷體積V=P(0.2mm)10]]>其中P指面積的總和(以平方毫本文檔來自技高網...

【技術保護點】
氨苯砜用于制備藥物的應用，所述藥物在治療中用作神經保護劑，用于治療急性腦中風，其特征在于施用０．００４－０．０５１毫摩爾／千克劑量的氨苯砜。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：路易斯卡米洛里奧斯卡斯塔涅達，瑪麗娜阿爾塔格拉夏馬丁內斯，胡安納德爾卡瓦齊，賈伊梅卡拉夫佐夫吉尼齊，
申請(專利權)人：大都會自治大學，墨西哥神經學和神經外科學院，
類型：發(fā)明
國別省市：MX[墨西哥]