【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及改良檢棒(dipstick)核酸檢測的靈敏度，本專利技術的檢棒用以測試樣品溶液中目標核酸的存在，例如鑒定病患是否感染致病微生物，如砂眼衣原體(Chlamydia?trachomatis，CT)。用于檢測樣品溶液中目標核酸存在的一些常規(guī)測試依賴利用聚合酶鏈式連鎖反應(PCR)擴增目標核酸。此反應可檢測小量的目標核酸，然而得到結果前需耗時數(shù)小時，但因通常希望可盡快得到結果，例如使病人等待的時間減至最少，故此為其顯著缺點。這種方法的進一步缺點是需要昂貴的專家設備進行反應以及相當高成本的試劑。相反，檢棒可檢測未擴增的目標核酸，不需任何專家設備且能比基于PCR的方法更快速地得到結果。病人就可于同時接受治療，故特別有益于不喜歡或不能日后復診的病人。檢棒分析的成本也顯著低于PCR基礎的測試。US?5,310,650所述的典型常規(guī)檢棒中，單鏈DNA捕獲探針固定于硝化纖維素濾器上遠離過濾器末端(接觸端)的捕獲區(qū)。捕獲探針序列互補于欲測目標核酸第一區(qū)域的序列。標記的單鏈DNA檢測探針固定于硝化纖維素濾器上捕獲區(qū)及濾器接觸端間的探針區(qū)。檢測探針含有互補于目標核酸第二區(qū)域序列(不同于第一區(qū)域)的序列。在認為含有目標DNA的樣品溶液中檢測目標DNA時，將硝化纖維素濾器的接觸端接觸樣品溶液。樣品溶液通過毛細作用進入濾紙并經過探針區(qū)及捕獲區(qū)。當樣品溶液經過探針區(qū)時，可使檢測探針移動并使其與樣品溶液一起朝向捕獲區(qū)上升。然后移動的檢測探針能雜交到樣品溶液中存在的任何目標DNA的第二區(qū)域。當雜交的檢測探針及目標DNA到達捕獲區(qū)時，目標DNA的第一區(qū)域能雜交到固定的捕獲探針。由此在...
【技術保護點】
１．測試樣品溶液中目標核酸存在的試劑盒，其包含：ｉ）檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分；ｉｉ）多種捕獲探針，各捕獲探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，且當捕獲探針已雜交了目標核酸時，各捕獲探針能夠被捕獲部分結合；及可選地ｉｉｉ）檢測探針，能夠雜交目標核酸，并由此允許使用檢測探針檢測目標核酸，該檢測探針可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶，或者，該檢測探針與檢棒相分離。
【技術特征摘要】
2000.07.07 GB 0016813.81.測試樣品溶液中目標核酸存在的試劑盒，其包含：i)檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分；ii)多種捕獲探針，各捕獲探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，且當捕獲探針已雜交了目標核酸時，各捕獲探針能夠被捕獲部分結合；及可選地iii)檢測探針，能夠雜交目標核酸，并由此允許使用檢測探針檢測目標核酸，該檢測探針可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶，或者，該檢測探針與檢棒相分離。2.測試樣品溶液中目標核酸存在的檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品溶液；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分；及多種捕獲探針，可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶上，每種捕獲針能夠雜交目標核酸不同區(qū)域，且當捕獲探針已雜交了目標核酸時，各捕獲探針能夠被捕獲部分結合。3.根據權利要求第1項的試劑盒或根據權利要求第2項的檢棒，其中各捕獲探針包含能被捕獲部分結合的捕獲配體，以結合捕獲探針至捕獲部分。4.根據權利要求第3項的試劑盒或檢棒，其中各捕獲探針包含多種各自能被捕獲部分結合的捕獲配體。5.根據權利要求第1至4項中任一項的試劑盒或檢棒，其中檢測探針包含標記，允許利用檢測探針直接檢測目標核酸，或其中檢測探針包含檢測配體，允許利用檢測探針間接檢測目標核酸。6.根據權利要求第5項的試劑盒或檢棒，其中檢測探針包含多種標記或多種檢測配體。7.根據權利要求第1至4項中任一項的試劑盒或檢棒，其中檢測探針為多種檢測探針，各檢測探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，由此允許利用檢測探針檢測目標核酸。8.根據權利要求第7項的試劑盒或檢棒，其中各檢測探針包含多種標記或多種檢測配體。9.測試樣品溶液中目標核酸存在的試劑盒，其包含：i)檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；及固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分；ii)捕獲探針，其能夠雜交目標核酸，其中捕獲探針包含多種捕獲配體，當捕獲探針已雜交了目標核酸時，各捕獲配體能夠被捕獲部分結合；及可選地iii)檢測探針，其能夠雜交目標核酸，并由此允許利用檢測探針檢測目標核酸，該檢測探針可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶，或者該檢測探針與檢棒相分離。10.測試樣品溶液中目標核酸存在的檢棒，其包含：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分；及捕獲探針，其可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶，該捕獲探針能夠雜交目標核酸，其中捕獲探針包含多種配體，當捕獲探針已雜交了目標核酸時，各捕獲配體能夠被捕獲部分結合。11.根據權利要求第9項的試劑盒或根據權利要求第10項的檢棒，其中檢測探針包含標記，允許利用檢測探針直接檢測目標核酸，或其中檢測探針包含檢測配體，允許利用檢測探針間接檢測目標核酸。12.根據權利要求第11項的試劑盒或檢棒，其中檢測探針包含多種標記或檢測配體。13.根據權利要求第9項的試劑盒或根據權利要求第10項的檢棒，其中檢測探針為多種檢測探針，各檢測探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，并由此允許利用檢測探針檢測目標核酸。14.根據權利要求第13項的試劑盒或檢棒，其中各檢測探針包含多種標記或檢測配體。15.測試樣品溶液中目標核酸存在的試劑盒，其包含：i)檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；及固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分，該捕獲部分能夠直接或間接結合目標核酸，及ii)多種捕獲探針，各捕獲探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，由此允許利用檢測探針檢測目標核酸。16.測試樣品溶液中目標核酸存在的檢棒，其包含：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分，該捕獲部分能夠直接或間接結合目標核酸；及可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶的多種檢測探針，各檢測探針能夠雜交目標核酸的不同區(qū)域，由此允許利用檢測探針檢測目標核酸。17.根據權利要求第15項的試劑盒或根據權利要求第16項的檢棒，其中各檢測探針包含標記，允許利用檢測探針直接檢測目標核酸，或其中各檢測探針包含檢測配體，允許利用檢測探針間接檢測目標核酸。18.根據權利要求第17項的試劑盒或檢棒，其中各檢測探針包含多種標記或多種檢測配體。19.測試樣品溶液中目標核酸存在的試劑盒，其包含：i)檢棒，其包括：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；及固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分，該捕獲部分能夠直接或間接結合目標核酸，及ii)能夠雜交目標核酸的檢測探針，其中檢測探針包含多種標記，允許利用檢測探針直接檢測目標核酸，或其中檢測探針包含多種檢測配體，允許利用檢測探針間接檢測目標核酸。20.測試樣品溶液中目標核酸存在的檢棒，其包含：層析片，其具有接觸端以接觸樣品試劑；固定于遠離接觸端的捕獲帶的捕獲部分，該捕獲部分能夠直接或間接結合目標核酸；及可釋放地固定于層析片接觸端與捕獲帶之間的探針帶的檢測探針，該檢測探針能夠雜交目標核酸，其中檢測探針包含多種標記，允許利用檢測探針直接檢測目標核酸，或其中檢測探針包含多種檢測配體，允許利用檢測探針間接檢測目標核酸。21.根據前述權利要求中任一項的試劑盒或檢棒，其中捕獲部分包含捕獲探針，其能夠雜交目標核酸，或雜交結合目標核酸的吊鉤捕獲探針。22.根據權利要求第15至20項中任一項的試劑盒或檢棒，其中捕獲部分包含捕獲配體結合部分，其能夠結合捕獲探針的捕獲配體，該捕獲探針能夠雜交目標核酸，而使捕獲部分由此能間接結合目標核酸。23.根據權利要求第22項的試劑盒或檢棒，其進一步包含捕獲探針。24.根據權利要求第5、6、8、11、12、14或17至20項中任一項的試劑盒或檢棒，其中各標記為非放射性。25.根據權利要求第3、4、9、10或22項中任一項的試劑盒或檢棒，其中捕獲部分包含抗體或抗體片段，其能夠結合各捕獲配體。26.根據前述權利要求中任一項的檢棒的用途，為測試樣品溶液中目標核酸的存在。27.根據權利要求第26項的用途，其中目標核酸為砂眼衣原體核酸。28.檢測或捕獲目標核酸的探針，其包含能夠雜交目標核酸的核酸或核酸類似物，其中核酸或核酸類似物偶聯(lián)多種標記，當探針已雜交了目標核酸時，允許直接檢測目標核酸，或者其中核酸偶聯(lián)多種配體，當探針已雜交了目標核酸時，其能被配體結合部分結合而檢測或捕獲目標核酸。29.根據權利要求第28項的探針，其中對于多種標記或配體中的每一個標記或配體，連接子(如在此定義)共價地偶聯(lián)該標記或配體至核酸或核酸類似物。30.根據權利要求第28項的探針，其中多種標記或配體被分支連接子(如在此定義)共價地偶聯(lián)于核酸或核酸類似物...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：海倫·李，瑪格塔·阿納斯達索瓦·狄尼瓦，
申請(專利權)人：真實世界診療有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：US
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