一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種防治植物病害的微生物和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配農(nóng)藥，同時還涉及該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域。其技術(shù)方案為：將Ｂｓ－９１６菌株移植于培養(yǎng)基上活化；配制含咪鮮安濃度遞增的培養(yǎng)基，將活化后的Ｂｓ－９１６菌株移入含低濃度咪鮮安的培養(yǎng)基中，再逐漸移入含咪鮮安濃度遞增的培養(yǎng)基中，直到獲得Ｂｓ－９１６抗性菌株；將抗咪鮮安的Ｂｓ－９１６菌株移入ＹＰＧ培養(yǎng)液培養(yǎng)獲得培養(yǎng)液菌劑；將獲得的菌劑與咪鮮安配制成增效型微生物復(fù)配劑。實踐證明，使用本發(fā)明專利技術(shù)的復(fù)配農(nóng)藥噴霧、灌根等，幾乎對各種常見作物病害都具有良好的防治效果，對減少農(nóng)藥殘留、保護(hù)農(nóng)田生態(tài)環(huán)境具有積極意義，有利于保持農(nóng)產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。（*該技術(shù)在2024年保護(hù)過期，可自由使用*）

Synergistic microorganism compound pesticide for preventing and controlling plant diseases and preparation method thereof

The invention relates to a compound pesticide for preventing and treating plant diseases, and also relates to a preparation method of the compound pesticide, which belongs to the technical field of agriculture. The technical scheme is as follows: the Bs - 916 was transplanted to medium activation; preparation of culture medium containing increasing concentrations of Prochloraz, will be activated after Bs 916 strains in culture medium containing low concentration of Prochloraz, and then gradually with increasing concentration of Prochloraz in medium, until the obtained Bs 916 resistant strains; anti prochloraz strain named Bs 916 into YPG medium culture liquid agent; will get prepared agents and prochloraz synergistic microbial compound. Practice has proved that the use of the invention of mixed pesticide spray and root irrigating, has good control effect on almost all common crop diseases, it is of positive significance to reduce pesticide residues, protect the farmland ecological environment, conducive to good quality keeping of agricultural products, agricultural products safety protection.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種防治植物病害的復(fù)配農(nóng)藥，尤其是一種微生物和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配農(nóng)藥，同時本專利技術(shù)還涉及該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，屬于農(nóng)業(yè)

技術(shù)介紹
眾所周知，水稻、果樹和蔬菜上的病害繁多，危害嚴(yán)重。其中，有些病害的發(fā)生、發(fā)展嚴(yán)重影響了水稻、果樹和蔬菜的優(yōu)良品質(zhì)。據(jù)申請人所知，目前作物病害的防治主要依賴化學(xué)農(nóng)藥。雖然化學(xué)農(nóng)藥的大量使用在確保農(nóng)作物高產(chǎn)、控制病害流行方面起到了切實有效的作用，但同時也給人類的生存帶來了日益嚴(yán)重的負(fù)面影響。一方面，化學(xué)農(nóng)藥在防治病害的同時，不可避免地殺滅了這些病害的天敵，從而使得田間生物群落的自然控害作用嚴(yán)重受到抑制，病原菌對農(nóng)藥的抗藥性水平越來越高，農(nóng)藥的控害效果下降，最終導(dǎo)致產(chǎn)生用藥量和施藥次數(shù)不斷增加，污染了農(nóng)田生態(tài)環(huán)境的嚴(yán)重后果。另一方面，農(nóng)藥的大量使用嚴(yán)重影響了農(nóng)產(chǎn)品的天然品質(zhì)，尤其在我國加入WTO后，農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留形成嚴(yán)重阻礙我國農(nóng)產(chǎn)品出口的綠色壁壘。面對農(nóng)產(chǎn)品新的需求形勢和要求，有必要研究新的病害防治思路，建立以保障農(nóng)產(chǎn)品的天然優(yōu)良品質(zhì)為核心，開發(fā)環(huán)境相容性好、低殘留、對人畜無毒害的綠色農(nóng)藥，為我國農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展的提供技術(shù)支撐。例如，水稻稻曲病(病原菌為子囊菌Ustilaginoidea virens)、梨黑斑病(病原菌為半知菌Alternaria kikuchiana Tanaka)、茄科蔬菜枯萎病(病原菌為半知菌Fusarium)和葉霉病(病原菌為半知菌Fulvia fulva)是病害，在世界各地普遍發(fā)生，是糧食、水果和蔬菜上的重要病害。其中，水稻稻曲病發(fā)病率可高達(dá)44.1％，產(chǎn)量損失達(dá)26.9％，已成為水稻生產(chǎn)的重要病害之一。尤其是稻曲病菌可產(chǎn)生對人畜有害的毒素，混雜于病稻谷中的稻曲病菌，對人們的健康構(gòu)成直接的危害，成為水稻無公害生產(chǎn)的突出問題，嚴(yán)重影響了稻米的優(yōu)質(zhì)安全。梨黑斑病是梨的生育期內(nèi)的主要病害，遍布全國各梨產(chǎn)區(qū)，該病原菌在梨掛果期均可為害，影響產(chǎn)量。其次，梨的掛果期長，在生育期內(nèi)該病害的防治必須頻繁用藥，且用藥量大，因此農(nóng)藥殘留嚴(yán)重地影響梨子的品質(zhì)，對人的健康形成了潛在的危害。枯萎病和番茄葉霉病是茄科蔬菜的主要病害，目前蔬菜上農(nóng)藥的使用頻率和使用量是所有作物中最多的。枯萎病菌致使植株萎蔫，最后死亡，是毀滅性病害；葉霉病在我國各地均有發(fā)生，尤其以保護(hù)地番茄受害最重，嚴(yán)重時減產(chǎn)20％-30％。目前茄科蔬菜的枯萎病和番茄葉霉病的防治主要采用土壤處理、煙劑等防治，由于高頻率的使用農(nóng)藥，污染了農(nóng)田環(huán)境，同時農(nóng)藥的殘留影響了蔬菜的品質(zhì)。隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的提高，人們對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量的要求越來越高。在盡量減少由病蟲害導(dǎo)致的產(chǎn)量損失的同時，減少化學(xué)農(nóng)藥的用量和殘留，保持農(nóng)產(chǎn)品的天然品質(zhì)，已成為人們的共識。因此，研制開發(fā)新的防治藥劑，尤其是生物農(nóng)藥極為重要和緊迫。令人可喜的是，人類發(fā)現(xiàn)有一種枯草芽孢桿菌微生物的細(xì)菌菌群中存有對多種真菌病害的病原菌具有拮抗作用的菌株。目前國內(nèi)外均已開展用具有拮抗作用的枯草芽孢桿菌來防治作物病害的研究。國外報導(dǎo)主要對棉花、番茄的枯萎病(Mahaffee，W.Rosales A.M.Effects of seedfactors on Spermoshpere and rhizoshpere colonization of cotton byBacillus subtilis GB03，Phtopathology83，1120-1125)，國內(nèi)研究者發(fā)表了枯草芽孢桿菌抗菌物質(zhì)及對其抗菌蛋白分離的研究報告(孔建等，1992“枯草芽孢桿菌Bs-903菌株抗菌物質(zhì)研究”《微生物學(xué)報》32(6))。但據(jù)申請人了解，至今未見有將枯草芽孢桿菌和某種農(nóng)藥復(fù)配后對包括上述四種病害在內(nèi)的多種作物病害均具有良好防治效果的微生物復(fù)配農(nóng)藥。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于面對目前生產(chǎn)上大量使用化學(xué)農(nóng)藥防治農(nóng)作物病害、嚴(yán)重污染農(nóng)田生態(tài)環(huán)境、導(dǎo)致農(nóng)藥殘留超標(biāo)、影響農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的狀況，通過研究枯草芽孢桿菌和化學(xué)農(nóng)藥的復(fù)配，引進(jìn)微生物菌劑，提出一種對各種常見作物病害均具有良好防治效果的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，同時給出該復(fù)配農(nóng)藥的制備方法，從而實現(xiàn)操縱管理生態(tài)環(huán)境中微生物群的合理分布，惡化病原菌的生存環(huán)境，結(jié)合栽培管理和化學(xué)防治措施形成穩(wěn)定、平衡、生物多樣化的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，有效、較持久地控制作物病害的流行，同時有效降低化學(xué)農(nóng)藥的使用量，改善農(nóng)田生態(tài)環(huán)境，減少農(nóng)藥殘留，以利于保持農(nóng)產(chǎn)品的優(yōu)良品質(zhì)，保障農(nóng)產(chǎn)品安全。申請人經(jīng)過不斷的探索摸索和反復(fù)對比實驗，形成了本專利技術(shù)復(fù)配農(nóng)藥的技術(shù)方案，其要點(diǎn)是將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株(以下簡稱Bs-916菌株)移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化；配制含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基，將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安的細(xì)菌培養(yǎng)基中，待生長良好后，再移入含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基中，依次類推，直到獲得具有抗藥性的Bs-916抗性菌株；將抗咪鮮安的Bs-916菌株移入細(xì)菌培養(yǎng)液培養(yǎng)獲得培養(yǎng)液菌劑；將獲得的菌劑與咪鮮安配制，即可獲得本專利技術(shù)由抗咪鮮安的Bs-916菌劑與咪鮮安配制而成的增效型微生物復(fù)配劑。需要說明的是，上述枯草芽孢桿菌Bs-916菌種于二○○二年九月三十日在北京的中國典型微生物保藏中心(CGMCC)保藏，保藏編號為CGMCCNo.0808，拉丁學(xué)名為bacillus subtilis Bs-916(本文簡稱Bs-916)。其生物學(xué)性狀記載為菌落形態(tài)單細(xì)胞形成菌落圓形，四周光滑，YPGA(酵母膏5.0g，胰蛋白胨5.0g；葡萄糖5.0g，瓊脂17.0g；水1000ml)培養(yǎng)基平板上生長24h的菌落3-5mm，米色，表面有皺褶。鑒別性狀格蘭氏反應(yīng)陰性，嚴(yán)格好氣，2％NaCl不能生長，乳果糖、L-阿拉伯糖、L-乳酸、松三糖和D-蘋果酸利用反應(yīng)均為陰性，甘油、蔗糖、麥芽糖和纖維二糖利用反應(yīng)均為陽性。較具體些說，本專利技術(shù)的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥采用以下步驟制備1、活化將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化。2、抗藥性誘導(dǎo)將細(xì)菌培養(yǎng)基配制成帶咪鮮安平板，其中咪鮮安的濃度遞增，例如為5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml.......直至1000ug/ml。將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安，例如5ug/ml的平板中，待生長良好后，再移入濃度遞增的10ug/ml的平板中，依次類推，直到獲得能在1000ug/ml上生長的Bs-916抗性菌株。3、獲取培養(yǎng)液將抗咪鮮安的Bs-916菌株活化后，移入細(xì)菌培養(yǎng)液，15-38℃內(nèi)振蕩培養(yǎng)22-55小時獲得培養(yǎng)液菌劑，菌含量為2-5×1010cfu/ml。4、復(fù)配成藥將制獲得的菌劑與按比例配制，獲得本專利技術(shù)的增效型微生物復(fù)配劑。容易理解，以上咪鮮安為廣義概念，即包括各種咪鮮安鹽類(例如常用的咪鮮安錳鹽等)。本專利技術(shù)微生物復(fù)配農(nóng)藥的有益效果如下1、依據(jù)微生態(tài)學(xué)原理，通過引進(jìn)微生物菌劑，操縱管理生態(tài)環(huán)境中微生物群落的合理分布，惡化病原菌的生存環(huán)境，結(jié)合栽培管理、農(nóng)業(yè)和化學(xué)防治措施，形成一個穩(wěn)定的、平衡的、生物多樣化的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)，從而有效地、較持久地控制多種作物病害的流行。2、微生物農(nóng)藥具有化學(xué)藥劑所不具備的優(yōu)點(diǎn)，其控病作用機(jī)制主要為①優(yōu)勢種群的競爭作用——枯草芽孢桿菌本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于：由抗咪鮮安的枯草芽孢桿菌Ｂｓ－９１６（拉丁學(xué)名ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＢｓ－９１６）菌劑與咪鮮安或咪鮮安鹽配制而成。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于由抗咪鮮安的枯草芽孢桿菌Bs-916(拉丁學(xué)名bacillus subtilis Bs-916)菌劑與咪鮮安或咪鮮安鹽配制而成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑的菌含量大于2×1010cfu/ml。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑與咪鮮安配制的重量百分比為菌劑10％-90％，咪鮮安10％-90％。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥，其特征在于所述抗咪鮮安Bs-916菌劑與咪鮮安配制的重量百分比為菌劑20％-80％，咪鮮安20％-80％。5.一種用于防治植物病害的增效型微生物復(fù)配農(nóng)藥制備方法，其步驟為1)、活化——將枯草芽孢桿菌Bs-916菌株移植于細(xì)菌培養(yǎng)基上活化；2)、抗藥性誘導(dǎo)——配制含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基，將活化后的Bs-916菌株移入含低濃度咪鮮安的細(xì)菌培養(yǎng)基中，待生長良好后，再移入含咪鮮安濃度遞增的細(xì)菌培養(yǎng)基中，依次類推，直到獲得具有抗藥性的Bs-916抗性菌株；3)、獲取培養(yǎng)液——將抗...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳志誼，劉永鋒，劉郵洲，
申請(專利權(quán))人：江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，
類型：發(fā)明
國別省市：84[中國|南京]