一種槐角異黃酮苷元提取物的制備及分析方法技術

本發明專利技術涉及一種槐角異黃酮苷元提取物，其制備方法主要通過將將潔凈干燥槐角粉碎后用水浸提，向其中的濾液加入糖苷酶或果膠酶，離心過濾后向沉淀物加入乙醇溶液以去除雜質，再對靜置后的溶液進行離心，對所得上清液進行濃縮、噴霧干燥，得到槐角異黃酮苷元提取物。本發明專利技術還涉及根據所述方法制備的槐角異黃酮苷元提取物，以及所述槐角異黃酮苷元提取物的分析方法。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及化合物提取領域。更具體地，本專利技術涉及一種槐角異黃酮苷元提取物的其制備及分析方法。
技術介紹
異黃酮(isoflavone)是植物苯丙氨酸代謝過程中，由肉桂酰輔酶A側鏈延長后環化形成以苯色酮環為基礎的酚類化合物，其3-苯基衍生物即為異黃酮，屬植物次生代謝產物。類黃酮屬，是一種芳香族含氧雜環化合物，黃酮的異構體。又由于與女性荷爾蒙及雌激素作用類似，故也被稱為植物雌激素，其母核結構為3-苯并呋喃酮，是存在于大豆等豆科植物中一類重要的生物活性物質。有些異黃酮是植保素，有些在醫學上具有積極效果。異黃酮在醫學上被發現具有預防骨質疏松、乳腺癌、前列腺癌，降低膽固醇以及抗氧化等多種的生理活性，同時具有調節血脂、降低膽固醇和預防心血管疾病等功能。近年來，關于對富含異黃酮苷元提取物研究最多的是大豆植物，其提取物中異黃酮類化合物中主要的有效成分是大豆苷元和染料木素。工業上通常采用脂肪族醇醚或者采用一定濃度的脂肪族醇醚的水溶液作為溶劑進行多次浸提得到。此外，還可采用正己烷溶劑對大豆進行破碎，去除脂質類物質并濃縮得到殘留物，向殘留物中加入一定濃度甲醇溶液進一步浸提、過濾、減壓濃縮，最后酸水解得到。槐角，為我國常用中藥材，豆科植物槐(Sophora japonica L.)的干燥花及花蕾、 成熟果實。槐角剝皮后，呈棕色或者黃褐色，其種子呈棕黑色，性微苦、寒，歸肝、大腸經，有清熱瀉火、涼血止血的功能。槐角含多種黃酮及異黃酮化合物，其中有效成分異黃酮苷元在槐角中主要和糖鏈以糖苷鍵方式存在。槐米的主要成分如蕓香甙-蘆丁和鞣質。花蕾中還含有與蕓香甙不同的黃酮類物質-槐花米甲素，留醇類物質-槐花米乙素和丙素，以及三萜皂甙和葡萄糖等。槐角主要成分多種黃酮、異黃酮化合物和多種氨基酸。目前，從果皮中又分離出槐角甙、槐屬雙甙、染料木甙及其甙元染料木素、蘆丁、槐角黃酮甙及其甙元山柰酚以及5，4’ - 二羥基黃酮-3，7- 二糖甙。種子含有金雀花堿苦參堿及槐根堿等生物堿。據報道，大豆中糖苷型異黃酮含量只有0. 5-2. Og/kg，而槐角中糖苷型異黃酮含量達20. 0-30. Og/kg。糖苷型異黃酮及其衍生物的生物活性比較低，很難被人體吸收，工業上通常將糖苷型異黃酮水解成具有較高的生理功能作用的苷元。考慮到糖苷型異黃酮降解的反應條件、安全性、生產成本等問題，本申請人首次嘗試采用酶法水解異黃酮糖苷，從槐角中獲得異黃酮苷元提取物。
技術實現思路
[專利技術要解決的問題]本專利技術的目的是提供一種槐角異黃酮苷元提取物的制備方法。本專利技術的另一個目的是提供槐角異黃酮苷元提取物。本專利技術的另一個目的是提供槐角異黃酮苷元提取物的分析方法。[技術方案]本專利技術涉及一種槐角異黃酮苷元提取物的制備方法，其特征在于它包括以下步驟(1)將槐角清潔并干燥后進行粉碎，然后以槐角粉末重量計加入5-20倍水或30% 乙醇溶液，置于90-100°C水浴中攪拌提取2- ，獲得浸提液；(2)步驟(1)得到的浸提液冷卻至50-60°C，過濾后得到濾液；(3)往步驟( 得到的濾液中加入酶，然后離心過濾，得到沉淀物；(4)往步驟(3)得到的沉淀物中添加乙醇溶液，得到的混合物充分振蕩20-60min 后再靜置120-240min，得到異黃酮苷元的醇溶液；(5)步驟(4)得到的溶液進行離心，得到的上清液經過濃縮、噴霧干燥，得到槐角異黃酮苷元提取物。根據本專利技術的一種優選實施方式，步驟(1)中槐角粉碎后過10-100目篩。根據本專利技術的另一種優選實施方式，步驟( 中，步驟(1)得到的浸提液在冷卻后先用100目濾篩去除沉淀，再用200目濾篩進行過濾，得到濾液。根據本專利技術的另一種優選實施方式，步驟(3)中，加入的酶是糖苷酶或果膠酶，酶的加入量是以濾液體積計0.1-1%。根據本專利技術的另一種優選實施方式，步驟(3)中，酶與濾液的混合物在50-60°C溫度條件下保持10-24h，再進行離心過濾。根據本專利技術的另一種優選實施方式，步驟中，往沉淀物中添加的乙醇溶液是以步驟C3)得到的沉淀物的重量計，5-15倍90-95%濃度的乙醇溶液。本專利技術還涉及一種根據以上方法制備得到的槐角異黃酮苷元提取物。本專利技術還涉及所述提取物的分析方法，它包括以下步驟(1)精確稱取按照以上方法制備得到的產品，100%甲醇溶液定容，經稀釋、過濾得到樣品溶液；(2)精確稱取大豆苷元、染料木素對照品，用100%甲醇溶液配成含大豆苷元、染料木素的混合標準溶液，測定前稀釋10倍，即為對照品溶液；(3)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，按色譜條件進行分析，以峰面積外標法計算步驟(1)中樣品溶液中的異黃酮苷元的含量。根據本專利技術的另一種優選實施方式，所述分析方法的色譜條件為=Diamonsil ODS C18 (4. 6匪X 150mm, 5 μ m)色譜柱；柱溫30°C ；流動相0_30min，乙酸-乙腈-水 (1 20 79)，30-70min，乙酸-乙腈-水(1 40 59)；流速 0. 70-0. 95mL/min ；檢測波長 265nm。下面詳細地說明本專利技術。本專利技術涉及一種槐角異黃酮苷元提取物的制備方法。所述方法的步驟包括(1)將槐角清潔并干燥后進行粉碎，然后以槐角粉末重量計加入5-20倍水或30% 乙醇溶液，置于90-100°C水浴中攪拌提取2- ，獲得浸提液。槐角可以是市場上銷售的槐角，例如是安國市濟世中藥材有限公司銷售的產品。 槐角在購回后，先充分清洗，去除表面的灰塵、雜質，然后晾曬至干燥。然后仔細研磨，再用10-100目篩，得到粉末。濾篩可以是本
中常用的濾篩，例如是上海海唐篩網濾布織造有限公司銷售的系列標準篩。精確稱量得到的槐角粉末，以粉末的重量計，加入5-20倍水或30%乙醇溶液，置于90-10(TC水浴中攪拌提取2-5h，獲得浸提液。(2)步驟(1)得到的浸提液冷卻至50-60°C，過濾后得到濾液。采用本
常用的冷卻設備，將步驟(1)得到的浸提液冷卻至50-60°C。先用 100目濾篩去除沉淀，再用200目濾篩進行過濾，得到濾液。(3)往步驟( 得到的濾液中加入酶，然后離心過濾，得到沉淀物。精確稱量步驟(2)得到的濾液，以濾液的體積計，向冷卻的濾液中加入0. 1-1體積％物料比的酶。酶可以是糖苷酶或果膠酶。糖苷酶，也稱為糖苷水解酶，是作用各種糖苷或寡糖使糖苷鍵水解的酶的總稱。糖苷酶例如是高寶綠色科技集團有限公司生產銷售的α-半乳糖苷酶，活力為> 300IU/mg。果膠酶，由黑曲霉經發酵精制而得，主要用于果蔬汁飲料及果酒的榨汁及澄清，對分解果膠具有良好的作用。果膠酶例如是上海素萊寶生物科技有限公司生產銷售的果膠酶，活力為> 50000IU/mg。離心過濾得沉淀，去除多余的酶反應液。接著，上述酶與濾液的混合物在50-60°C溫度條件下保持10-Mh，然后進行離心過濾。離心時使用的是本
常用的離心設備，離心速度可以是例如3000r/min。離心后過濾得到沉淀物。(4)往步驟(3)得到的沉淀物中添加乙醇溶液，得到的混合物充分振蕩20-60min 后再靜置120-240min，得到異黃酮苷元的醇溶液。由于異黃酮苷元可溶于乙醇溶液，以步驟C3)得到沉淀物的重量計，向所述沉淀物中添加5-15倍的90本文檔來自技高網...

【技術保護點】
１．一種槐角異黃酮苷元提取物的制備方法，其特征在于它包括以下步驟：（１）將槐角清潔并干燥后進行粉碎，然后以槐角粉末重量計加入５－２０倍水或３０％乙醇溶液，置于９０－１００℃水浴中攪拌提取２－５ｈ，獲得浸提液；（２）步驟（１）得到的浸提液冷卻至５０－６０℃，過濾后得到濾液；（３）往步驟（２）得到的濾液中加入酶，然后離心過濾，得到沉淀物；（４）往步驟（３）得到的沉淀物中添加乙醇溶液，得到的混合物充分振蕩２０－６０ｍｉｎ后再靜置１２０－２４０ｍｉｎ，得到異黃酮苷元的醇溶液；（５）步驟（４）得到的溶液進行離心，得到的上清液經過濃縮、噴霧干燥，得到槐角異黃酮苷元提取物。

【技術特征摘要】
1.一種槐角異黃酮苷元提取物的制備方法，其特征在于它包括以下步驟(1)將槐角清潔并干燥后進行粉碎，然后以槐角粉末重量計加入5-20倍水或30%乙醇溶液，置于90-10(TC水浴中攪拌提取2- ，獲得浸提液；(2)步驟(1)得到的浸提液冷卻至50-60°C，過濾后得到濾液；(3)往步驟( 得到的濾液中加入酶，然后離心過濾，得到沉淀物；(4)往步驟(3)得到的沉淀物中添加乙醇溶液，得到的混合物充分振蕩20-60min后再靜置120-240min，得到異黃酮苷元的醇溶液；(5)步驟(4)得到的溶液進行離心，得到的上清液經過濃縮、噴霧干燥，得到槐角異黃酮苷元提取物。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中槐角粉碎后過10-100目篩。3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟( 中，步驟(1)得到的浸提液在冷卻后先用100目濾篩去除沉淀，再用200目濾篩進行過濾，得到濾液。4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)中，加入的酶是糖苷酶或果膠酶， 酶的加入量是以濾液體積計0. 1-1%。5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟C3)中，酶與濾液的混合物在50-60°C 溫度條件下保持10_24h，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：袁毅，伍陽，
申請(專利權)人：華寶食用香精香料上海有限公司，
類型：發明
國別省市：31