一種雙水相體系純化遠志呫噸酮類化合物的方法技術

本發明專利技術提供一種雙水相體系純化遠志呫噸酮類化合物的方法，該方法包括以下步驟：將遠志用60-90％乙醇超聲或加熱回流提取、過濾、濃縮，濃縮液上大孔吸附樹脂柱，50-65％乙醇洗脫，洗脫液濃縮后按比例加入硫酸銨和乙醇雙水相系統，加熱混合均勻，分為上下兩相；下相降溫、結晶回收硫酸銨晶體，取出富含乙醇的上相，加乙酸乙酯、水和氯化鈉，混合均勻，取含有遠志呫噸酮類化合物的上相，減壓濃縮，真空干燥得到遠志呫噸酮類化合物。本發明專利技術采用大孔樹脂分離和雙水相萃取技術提純遠志呫噸酮類化合物，工藝操作簡單，為遠志呫噸酮類化合物的工業化提供了技術基礎。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于天然植物提取純化
，涉及一種雙水相體系純化遠志咕噸酮類化合物的方法。
技術介紹
遠志為遠志科植物遠志Polygala tenuifolia Willd.和卵葉遠志Polygala sibirica L.的干燥根，主產于山西、陜西、河南、內蒙等地，具有益智安神、祛痰消腫等功效，常用于治療心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸、神志恍惚、咳痰不爽、瘡瘍腫毒、乳房腫痛等。其化學成分主要包括皂苷類、咕噸酮類和糖酯類成分。藥理研究表明，咕噸酮酮類化合物有著非常廣泛的藥理活性，包括利尿、抗微生物、抗病毒、強心、抗抑郁、抗結核、抗癌等活性。多數咕噸酮類化合物能夠抑制單胺氧化酶A和B。一些在自然界分布極少的咕噸酮類化合物表現出抗白血病、中樞神經系統鎮靜作用。此外，咕噸酮類化合物的還有抗炎、 抑制脂質氧化等作用。咕噸酮類化合物現有的提取富集分離方法主要有溶劑提取、有機溶劑萃取、柱層析等方法，未見到用雙水相系統富集分離遠志咕噸酮類化合物的報道。雙水相萃取(Aqueous two-phase extraction, ATPE)是兩種水溶性不同的聚合物或者一種聚合物和無機鹽的混合溶液，在一定的濃度下，體系就會自然分成互不相容的兩相。被分離物質進入雙水相體系后由于表面性質、電荷間作用和各種作用力(如憎水鍵、 氫鍵和離子鍵)等因素的影響，在兩相間的分配系數不同，導致其在上下相的濃度不同，達到分離目的。由于雙水相萃取條件較為溫和，不會導致被分離物質的失活，該技術已應用于生物大分子的分離和純化，并且在生物小分子的分離、抗生素提取、中藥中有效成分提取分離、稀有金屬/貴金屬分離等方面的應用也取得了進展。近幾年有關雙水相提取天然藥物中有效成分的報道也逐年增多。甘草酸采用乙醇/磷酸氫二鉀雙水相體系萃取，分配系數達到12. 8，回收率可達98. 3%。選用PEG/磷酸鹽體系在一定溫度、pH條件下萃取銀杏浸取液，主要藥用成分黃酮類化合物進入上相，達到分離目的，最佳條件在25V，PEG分子量在1500左右。天然產物有效成分含量低、難于富集，體系復雜，大分子與小分子、生命與非生命物質共存，特別是存在結構異構體等都使分離提純的工作難度加大，ATPE技術在天然產物的分離純化等方面的研究和開發是中藥提純
的一個重要方向。
技術實現思路
本專利技術要解決的技術問題是提供一種雙水相體系純化遠志咕噸酮類化合物的方法，該方法利用雙水相萃取技術的特點，生產成本低、操作簡單、可放大工業化，同時提高了遠志咕噸酮類化合物的提取率。本專利技術以如下技術方案解決上述技術問題一種雙水相體系純化遠志咕噸酮類化合物的方法，其特征在于包括以下步驟(1)提取將遠志根粉碎，加入60-90%乙醇溶液超聲或加熱回流提取，過濾，得到提取液；(2)大孔樹脂吸附將上述提取液濃縮，得到乙醇浸膏，用蒸餾水溶解，置大孔樹脂柱上，用蒸餾水洗至流出液無色后，再用3-5倍柱床體積50-65%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收試劑得到濃縮液；(3)雙水相萃取取上述濃縮液，加入乙醇和硫酸銨雙水相系統，混勻，分為上、下兩相；(4)乙酸乙酯反萃取取出富含乙醇的上相，加乙酸乙酯、水和氯化鈉，混勻，室溫靜置，分上、下兩相；(5)濃縮干燥取出含有遠志咕噸酮類化合物的上相，減壓濃縮，真空干燥得到遠志咕噸酮類化合物。步驟(2)所述大孔樹脂為D101、AB_8、HPD100等型號中的一種。步驟C3)所述雙水相萃取中，濃縮液與乙醇體積比為(3 9) 1，硫酸銨加入量為15-20g/100ml (濃縮液與乙醇總體積)；分相溫度為30_50°C，靜置時間為2_4小時。步驟(4)所述乙酸乙酯反萃取中，分相溫度為20-30°C，靜置時間為1-2小時。采用雙水相體系富集分離遠志咕噸酮類化合物，具有以下優勢(1)采用大孔樹脂吸附，對遠志咕噸酮類化合物進行初步富集，提高了咕噸酮類化合物的濃度和純度。(2)乙醇-硫酸銨雙水相分相迅速，沒有乳化層，縮短了生產周期。(3)雙水相富集分離既達到了富集的目的，又濃縮了料液，表現為大量的雜質(如親水性物質，細胞碎片等)進入下相，咕噸酮類物質進入上相，上相體較原始處理液減少， 達到濃縮效果。(4)雙水相體系條件溫和，能耗低，乙醇和硫酸銨易回收利用，不會造成環境污染。(5)本專利技術方法回收率高，操作簡單、成本低，可放大工業化。具體實施例方式實施例1 (1)遠志提取液的制備遠志根粉碎成粗粉，取5kg采用60%乙醇作為提取溶劑， 固液比為1 8，超聲提取40分鐘，提取2次，合并提取液。(2)大孔樹脂吸附濃縮提取液得到乙醇浸膏，用等體積量的蒸餾水溶解，置于 DlOl大孔吸附樹脂柱上，先用蒸餾水洗至流出液無色后，再以4倍柱床體積50%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至原體積的1/5得到濃縮液。(3)雙水相萃取取濃縮液加入硫酸銨和乙醇混勻，使濃縮液與乙醇體積比為 3 1，硫酸銨的質量濃度為20%，35°C水浴攪拌30分鐘，然后靜置3小時分相，上相是含有遠志咕噸酮的乙醇水相，將下相降溫、結晶，過濾，所得硫酸銨晶體可供循環利用。(4)乙酸乙酯反萃取取IOOml上相液加入70ml乙酸乙酯、40ml水和2g氯化鈉， 充分混勻，在25 °C條件下靜置2小時分相。(5)濃縮與干燥取富含遠志咕噸酮的乙酸乙酯相，對其進行減壓濃縮、70°C真空干燥，得到遠志咕噸酮類化合物(9. 89g)。實施例2 (1)遠志提取液的制備遠志根粉碎成粗粉，取5kg采用70%乙醇作為提取溶劑， 固液比為1 10，超聲提取30分鐘，提取2次，合并提取液。(2)大孔樹脂吸附濃縮提取液得到乙醇浸膏，用等體積量的蒸餾水溶解，置于 AB-8大孔吸附樹脂柱上，先用蒸餾水洗至流出液無色后，再以5倍柱床體積65%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至原體積的1/6得到濃縮液。(3)雙水相萃取取濃縮液加入硫酸銨和乙醇混勻，使濃縮液與乙醇體積比為 3 1，硫酸銨的質量濃度為20%，45°C水浴攪拌30分鐘，然后靜置4小時分相，上相是含有遠志咕噸酮的乙醇水相，將下相降溫、結晶，過濾，所得硫酸銨晶體可供循環利用。(4)乙酸乙酯反萃取取IOOml止相液加入90ml乙酸乙酯、45ml水和3g氯化鈉， 充分混勻，在30°C條件下靜置1. 5小時分相。(5)濃縮與干燥取富含遠志咕噸酮的乙酸乙酯相，對其進行減壓濃縮、70°C真空干燥，得到遠志咕噸酮類化合物(9.46g)。實施例3 (1)遠志提取液的制備遠志根粉碎成粗粉，取5kg采用90%乙醇作為提取溶劑， 固液比為1 6，超聲提取50分鐘，提取2次，合并提取液。(2)大孔樹脂吸附濃縮提取液得到乙醇浸膏，用等體積量的蒸餾水溶解，置于 HPD100大孔吸附樹脂柱上，先用蒸餾水洗至流出液無色后，再以3倍柱床體積60%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至原體積的1/8得到濃縮液。(3)雙水相萃取取濃縮液加入硫酸銨和乙醇混勻，使濃縮液與乙醇體積比為 3 1，硫酸銨的質量濃度為20%，5(TC水浴攪拌30分鐘，然后靜置2小時分相，上相是含有遠志咕噸酮的乙醇水相，將下相降溫、結晶，過濾，所得硫酸銨晶體可供循環利用。(4)乙酸乙酯反萃取取IOOml上相液加入75ml乙酸乙酯、35ml水和2. 5g氯化鈉，本文檔來自技高網...

【技術保護點】
１．一種雙水相體系純化遠志呫噸酮類化合物的方法，其特征在于包括以下步驟：（１）提取：將遠志根粉碎，加入６０－９０％乙醇溶液超聲或加熱回流提取，過濾，得到提取液；（２）大孔樹脂吸附：將上述提取液濃縮，得到乙醇浸膏，用蒸餾水溶解，置大孔樹脂柱上，用蒸餾水洗至流出液無色后，再用３－５倍柱床體積５０－６５％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收試劑得到濃縮液；（３）雙水相萃取：取上述濃縮液，加入乙醇和硫酸銨雙水相系統，混勻，分為上、下兩相；（４）乙酸乙酯反萃取：取出富含乙醇的上相，加乙酸乙酯、水和氯化鈉，混勻，室溫靜置，分上、下兩相；（５）濃縮干燥：取出含有遠志呫噸酮類化合物的上相，減壓濃縮，真空干燥得到遠志呫噸酮類化合物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：蘇劉花，
申請(專利權)人：南京澤朗農業發展有限公司，
類型：發明
國別省市：84