固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測方法，涉及一種固體樣品檢測方法。提供一種操作簡便，通用性強，可彌補難溶樣品和復雜樣品難以檢測分子質量的不足，同時是在基質輔助激光解析質譜儀中測定配位化合物的固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測方法。將固體樣品粉末填滿設在微測板樣品靶上的圓孔內，使固體樣品粉末表面與靶面平齊，除去圓孔周邊的散狀顆粒，將微測板樣品靶放入離子源室內，抽真空至(1～5)×10-6mbar，設置電壓Ion?Source1為17～21kV，Ion?Source2為15～19kV，lens?9～10kV，調節激光大小，采集圖譜，完成固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種MALDI-T0F-MS的檢測方法，具體地說是難溶解固體有機物在 MALDI-TOF-MS 中的應用。
技術介紹
20世紀80年代末發展起來的基質輔助激光解析離子化飛行時間質譜儀 (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry, MALDI-T0F-MS,以下簡稱為基質輔助激光解析質譜儀)是激光電離技術和高速數據采集處理系統相結合的產物，它具有高靈敏度、高通量、快速、準確、易于實現自動化等特點， 已成功應用于蛋白質、DNA/RNA、多糖等生物大分子的檢測，并獲得了 2002年的諾貝爾化學獎。該儀器的原理是是將微量樣品與過量小分子基體的混合液體點到樣品靶上， 經加熱或者風吹干形成共結晶，放入離子源室內，達到一定真空后，激光照射到靶上樣品，基質從激光中吸收能量，傳遞給樣品分子，使其瞬間汽化，并將質子轉移到樣品分子使其離子化，然后進入飛行時間質量分析器，根據它們各自的質荷比(m/z)進行檢測， 處理數據后得到質譜圖。采用MALDI-T0F-MS分析生物分子具有以下優勢(1)除檢測問題以外，m/z范圍無限制；(2)無需精選狹縫，不用掃描就能在同時間檢測整個m/ ζ范圍的離子；(3)離子傳送效率高。此外，MALDI是一種軟電離技術，在線性模式下不產生或者產生很少的碎片離子，可直接應用于混合物分析，也可用來檢測樣品中是否含有雜原子及雜質分子質量(1、Yoshisa T.，Tanaka K.，Ido Y.，Akita S.，Yoshida Y.Detection of High Mass Molecular Ions by Laser Desorption Time-of-Flight Mass Spectrometry, . Mass Spectrometry(Japan)，1988，36 :56-59 ;2、Tanaka K., Waki H. , Ido Y. , Akita S. , Yoshida Y. Yoshisa T. Protein and polymer analysis up to m/z 100,000 by laser ionization time—of—flight mass spectrometry. . Rapid Communications in Mass Spectrometry, 1988. 2 :151-153 ；3>Lou X. W. ,Buijtenen J. ， Bastiaansen J.Characterization of some synthetic Ru and Ir complexes by Matrix-assisted laser desorption/ionization time—of—flight mass spectrometry. . J. Mass Spectrom. 2005. 40 :654-660 ；4、Wyatt M. F.，Havard S.，Stein B. K. Analysis of transition-metal acetylacetonate complexes by matrix-assisted laser desorption/ionization time—of—flight massspectrometry. . Rapid Communications in Mass Spectrometry,2008. 22 :11-18)。基質是一種可通過其分子的光激發或光離子化作用而把質子轉移給分析物， 從而加強分析物分子離子形成的物質，例如a-氰基-4羥基肉桂酸(5、Cohen S. L.， Chait B.T.Influence of matrix solution conditions on the MALDI-MS analysis of peptides and proteins . Analytical Chemistry, 1996，68 :31-37)。由于在不同樣品中基質發揮的效果不同，因此優化基質是非常必要的，這樣可以改善結晶狀況，使樣品分布均勻并有效解析電離，增強質譜信號，進而提高分析靈敏度、分辨率和重復性等。在MALDI中基質起到的作用主要如下(1)吸收激光能量并把能量轉移給分析物。這樣不僅可把能量轉移給分析物使其形成分子離子，還可避免由于過量的能量使分析物裂解；( 包埋分析物，使分析物分子之間彼此隔離，避免分析物分子之間的締合，這種締合會導致質量的復雜化，以至無法進行解析；C3)適當的基質還會通過其分子的光激發或光離子化作用而把質子轉移給分析物，從而加強分析物分子離子的形成。常用的基質有a-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA)、2，5-二羥基苯甲酸(DHB)、芥子酸(SA)、2，4，6-三羥基苯乙酮(THAP)，蒽三酚 (DI)、3-吲哚丙烯酸(IAA)。傳統的分析方法需要將上述基質配制成溶液，再與分析物溶液按照不同濃度的比例混合后進行測試，但是這個比例的大小往往很難把握，使得樣品制備具有難度，對操作者的經驗要求高。并且，有一部分樣品在各種溶劑中十分難溶解，或者溶解的溶劑沒有揮發性，甚至有些樣品在溶劑溶解后失去原有的性質，這些都不適合樣品以液體形式與基質的溶液混合后在靶上吹干共結晶。例如，配位化合物，簡稱配合物，也叫絡合物，由中心原子或離子、配體、外界三者組成。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種操作簡便，通用性強，可彌補難溶樣品和復雜樣品難以檢測分子質量的不足，同時是在基質輔助激光解析質譜儀中測定配位化合物的。所述固體樣品是指固體有機化合物，如液體有機化合物，可經過干燥成固體有機化合物。本專利技術的具體步驟如下將固體樣品粉末填滿設在微測板樣品靶上的圓孔內，使固體樣品粉末表面與靶面平齊，除去圓孔周邊的散狀顆粒，將微測板樣品靶放入離子源室內，抽真空至(1 5) X l(T6mbar，設置電壓 Ion Sourcel 為 17 21kV, Ion Source2 為 15 19kV, lens 9 10kV，調節激光大小，采集圖譜，完成固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測。所述固體樣品粉末可加入基質或碳納米管。所述基質可選自a-氰基-4-羥基肉桂酸(CHCA) ,2,5- 二羥基苯甲酸(DHB)、芥子酸(SA)、2，4，6-三羥基苯乙酮(THAP)、蒽三酚(DI)、3_吲哚丙烯酸(IAA)等中的一種。所述圓孔的直徑可為Φ 1 2mm，圓孔的深度可為0. 5 2mm。所述基質輔助激光解析質譜儀可采用Bruker公司的MicroFlex MALDI-TOF-MS, 該儀器配有MSP (Micro SCOUT Plate微測板)樣品靶，共有96個樣品點。本專利技術相對現有液體混勻點靶的技術有如下優點和技術效果(1)難溶有機物， 尤其帶有稠環的有機物，可不需要基質，直接用固體上樣，方便快捷，并且減少了基質峰的干擾。( 溶解樣品的溶劑難揮發，如甲基亞砜(DMSO)是一種重要的極性非質子溶劑，但揮發性差，需要大量時間才可除去溶劑，采用本專利技術所述的方法，可以節約大本文檔來自技高網...
【技術保護點】
１．固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測方法，其特征在于其具體步驟如下：將固體樣品粉末填滿設在微測板樣品靶上的圓孔內，使固體樣品粉末表面與靶面平齊，除去圓孔周邊的散狀顆粒，將微測板樣品靶放入離子源室內，抽真空至（１～５）×１０－６ｍｂａｒ，設置電壓Ｉｏｎ Ｓｏｕｒｃｅ１為１７～２１ｋＶ，Ｉｏｎ Ｓｏｕｒｃｅ２為１５～１９ｋＶ，ｌｅｎｓ ９～１０ｋＶ，調節激光大小，采集圖譜，完成固體樣品在基質輔助激光解析質譜儀中的檢測。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：林志為，謝兆雄，
申請(專利權)人：廈門大學，
類型：發明
國別省市：92
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