本發明專利技術涉及通過至少一種ＡＢＣ轉運蛋白基因的突變而被減毒的細菌，其中所述突變使得相應的ＡＢＣ轉運蛋白沒有功能，并且其中所述減毒細菌在個體中維持。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及可用在疫苗組合物中的在個體中維持的減毒活細菌的產生，具體而言，本專利技術涉及去除細菌的至少一種ABC-轉運蛋白的功能，從而產生在個體中維持并可用在疫苗組合物中的減毒細菌。
技術介紹
細菌感染由于導致發病和大量死亡而對畜牧業造成巨大的經濟損失，并且對人類健康具有顯著影響。具體而言，呼吸道感染和敗血病是常見的感染性疾病，其可在整個動物群或人(個體)群中蔓延并對那些個體的健康產生不利影響。這可導致生產率顯著下降， 并最終導致個體的死亡。例如病原菌，尤其是支原體屬屬(Mycoplasma)的病原菌是呼吸道疾病的主要誘因。敗血病通常由大腸桿菌(E.coli)引起。據了解，包含經減毒的諸如細菌或病毒的病原微生物的疫苗組合物可在被接種的動物和人體中有效產生保護性的免疫應答。這種減毒活疫苗是有利的，因為免疫后，由疫苗所依賴的病原有機體所產生的后續激發導致最初由接種所誘導的免疫應答的快速再次激發。該作用為抑制病原體增殖并防止臨床相關疾病的發展。通常，通過完全或部分去除一種或多種毒力因子使得有機體不再是病原性的來實現用在疫苗中的病原有機體的減毒。所公知的毒力因子具有直接致病和/或允許有機體在宿主中維持的那些特性。促進有害宿主應答的那些特性也是公知的毒力因子。通常的毒力因子包括例如，毒素、附著胞器(attachment organelle)和免疫逃避機制。這提出的問題在于多種毒力因子參與誘導免疫，并且因此毒力因子的缺失使得以這種方式被減毒的有機體的免疫原性減弱。減毒活疫苗優選仍是抗原性的，并且因此能誘導充足水平的宿主免疫， 同時是非病原性的。通常，減毒活疫苗不在個體中維持，并且這可歸于疫苗所依賴的減毒活有機體的免疫原性的降低。盡管諸如毒素的某些毒力因子是用于減毒的明顯靶標，但是不被認為是毒力因子的因子不是用于減毒的明顯靶標。那些因子對有機體毒力的減毒效應不明顯或不容易預測。ABC(ATP-結合盒)轉運蛋白超家族的成員通常不被認為是毒力因子。ABC轉運蛋白包含功能是穿過細胞內膜和細胞外膜轉送底物的膜蛋白。由ABC轉運蛋白運送的物質包括肽、寡肽、蛋白質、代謝產物、脂質、固醇和藥物。ABC轉運蛋白的序列比較表明，該超家族的基因和蛋白質在遠源相關的門類中是保守的。本專利技術基于這個出人意料的發現如在在宿主-疾病模型系統中所評價的，病原有機體中ABC-轉運蛋白基因的功能突變缺失使該病原有機體減毒，但是該減毒有機體保持免疫原性，且在個體中維持。專利技術概述第一方面，提供了通過至少一種ABC轉運蛋白基因的突變而被減毒的細菌，其中所述突變使得相應的ABC轉運蛋白沒有功能，并且其中所述減毒細菌在個體中維持。第二方面，提供了使細菌減毒的方法，所述方法包括使至少一種ABC轉運蛋白基因突變，并且其中所述減毒細菌在個體中維持。第三方面，提供了包含至少一種第一方面的減毒細菌的免疫原性組合物。第四方面，提供了疫苗組合物，包含免疫原性有效量的至少一種第一方面的減毒細菌和藥理學上可接受的載體。第五方面，提供了用于治療或預防疾病的疫苗組合物的用途，其中所述疫苗組合物包含至少一種第一方面的減毒細菌。第六方面，提供了預防或改善個體疾病的方法，所述方法包括給予所述個體治療有效劑量的疫苗組合物或免疫原性組合物，其中所述疫苗組合物或免疫原性組合物包含至少一種第一方面的減毒細菌。第七方面，提供了預防疾病的方法，所述方法包括給予需要預防的個體治療有效劑量的疫苗組合物或免疫原性組合物，其中所述疫苗組合物或免疫原性組合物包含至少一種第一方面的減毒細菌。在一個實施方案中，可以通過插入、缺失、取代或以上的任意組合來產生突變，所述插入突變例如可以通過同源重組、轉座子誘變和序列標簽誘變來產生。在一個實施方案中，所述ABC轉運蛋白基因可以是編碼ABC-肽轉運蛋白的基因。 例如 CvaB、CylB, SpaB、NisT、EpiT、ComA, PedD, LcnC、McbEF, OppD 和 DppD 以及它們的同源物，并且特別是ABC轉運蛋白基因可以編碼OppD。在一個實施方案中，所述細菌可以選自禽桿菌屬(Avikicterium)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、布魯氏菌屬(Brucella)、巴爾通氏體菌屬(Bartonella)、博德特氏菌屬(Bordetella)、伯克氏菌屬(Burkholderia)、弧菌屬(Vibrio)、埃希氏菌屬(Escherichia)、沙門氏菌屬(Salmonella)、梭菌屬(Clostridium)、彎曲桿菌屬 (Campylobacter)、衣原體屬(Chalmydia)、考克斯氏體屬(Coxiella)、丹毒絲菌屬 (Erysipelothrix)、弗朗西絲氏菌屬(Francisella)、李斯特氏菌屬(Listeria)、放線(Actinobacillus) > Bf ifil ^ M (Haemophilus) > ff ^ M (Helicobacter)、H 胞菌屬(Aeromonas)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、鏈球菌屬(Streptococcus)、志賀氏菌屬(Shigella)、耶爾森氏菌屬(Yersinia)、支原體屬(Mycoplasma)、分支桿菌屬 (Mycobacterium)、曼海姆氏菌屬(Mannheimia)、鳥桿菌屬(Ornithobacterium)、立克次氏體屬(Rickettsia)、尿支原體屬(Ureaplasma)和巴斯德氏菌屬(Pasteurella)。減毒細 ^X^nT^^SOXl^ff ‘ (Avibacterium paragallinarum) >-^ff ^ ‘ (Bordetella avium) > - If lif (Ornithobacterium rhinotracheale)Π 1 lif (Salmonellaenteritidis)、出血敗血性巴斯德氏菌(Pasteurella multocida)、溶血曼海姆氏菌 (Mannheimia haemolytica)、大腸桿菌、產氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)、無乳支原體(Mycoplasma agalactiae)、甲鳥支原體(Mycoplasma anatis)、鵝支原體(Mycoplasma anseris)、模仿支原體(Mycoplasma imitans)、產喊支原體(Mycoplasma alkalescens)、 精氨酸支原體(Mycoplasma arginini)、微小脲原體(Ureaplasma parvum)、關節炎支原體(Mycoplasma arthritidis)、牛生殖道支原體(Mycoplasma bovigenitalium)、牛鼻支原體(Mycoplasma bovirhinis)、牛支原體(Mycoplasma bovis)、牛目艮支原體(Mycoplasma bovoculi)、力口禾Ij福尼亞支原體(Mycoplasma californicum)、山羊支原體(Mycoplasma capricolum)、殊異支原體(Mycoplasma dispar)、涯貓支原體(Mycoplasma felis)本文檔來自技高網...
【技術保護點】
１．通過至少一種ＡＢＣ轉運蛋白基因的突變而被減毒的細菌，其中所述突變使得相應的ＡＢＣ轉運蛋白沒有功能，并且其中所述減毒細菌能在個體中維持。
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...
【專利技術屬性】
技術研發人員：格倫·弗朗西斯·布朗寧，
申請(專利權)人：澳大利亞家禽CRC有限公司，
類型：發明
國別省市：AU
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