培養細胞、增殖和純化病毒的方法技術

本發明專利技術提供新的無血清細胞培養基和培養ＭＤＣＫ細胞的方法。具體而言，非致瘤性ＭＤＣＫ細胞。本發明專利技術還提供不需細胞培養基交換步驟的產生流感病毒（例如，特別是冷適應和／或溫度敏感性和／或減毒流感病毒）的方法。所述新的培養基和方法可用于在細胞培養物中培養達到高效價的流感病毒。本發明專利技術還提供活病毒總回收率高的純化流感病毒的純化方法，使宿主細胞ＤＮＡ（ＨＣＤ）、宿主細胞蛋白質（ＨＣＰ）和非特異性內切核酸酶（例如Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ）的水平低于管理機構要求的規格。所述免疫原性組合物可用于主動免疫接種對象或產生用于各種應用包括被動免疫接種和診斷免疫鑒定的抗體。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】

【技術保護點】
１．一種在細胞培養物中產生流感病毒達到至少約８．０的ｌｏｇ１０ＴＣＩＤ５０／ｍＬ和／或至少約８．０的ｌｏｇ１０ＦＦＵ／ｍＬ的方法，包括：（ａ）在無血清培養基中于微載體上增殖貼壁ＭＤＣＫ細胞，同時保持選自下組的一種或多種培養條件：在約１００到２００ｒｐｍ之間的攪拌速率、在約６．０到約７．８之間的ｐＨ、在約３３℃到約４２℃之間的溫度和在約３５％到約１００％之間的溶氧（ＤＯ）；（ｂ）用流感病毒感染增殖ＭＤＣＫ細胞而不交換培養基；和（ｃ）在允許流感病毒復制的條件下溫育感染的增殖ＭＤＣＫ細胞。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：J·劉，
申請(專利權)人：米迪繆尼有限公司，
類型：發明
國別省市：US