本發明專利技術涉及一種高產胞外多糖的乳酸菌及其用途及所產生的胞外多糖，WG3-9菌株的分類名稱：乳酸乳球菌乳脂亞種Lactococcus.Lactis?subsp?cremaris，保藏編號為：CGMCC?No.5260。本發明專利技術篩選出的高產胞外多糖乳酸菌WG3-9能夠高產胞外多糖，其含量達434.3mg/L，顯著高于其它乳酸菌。實驗測得本菌株WG3-9發酵所得的酸乳酸度為78°T，酸乳粘度為8600mPa·s，凝乳時間為5.5h，酸乳持水力為29.5％，脫水收縮敏感性為20％。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物領域，涉及一種新篩選的微生物，尤其是一種高產胞外多糖的乳酸菌及其用途及所產生的胞外多糖。
技術介紹
發酵乳是指用脫脂乳或全脂乳經特殊微生物發酵而成的制品，在銷售前必須保持微生物的活性，不得含有任何致病菌。美國、日本、歐洲及我國食品市場的信息顯示，酸乳正朝著保健功能強、風味更飽滿、柔和的方向發展。具有功能性的乳酸菌應用廣泛，但我國具有自主知識產權的菌株較少，因此，我國急需開發風味優良、功能性強的乳酸菌。乳酸菌胞外多糖(Exopolysaccharides，EPS)是乳酸菌在生長代謝過程中分泌到細胞壁外的一類糖類化合物，有的依附于微生物細胞壁形成莢膜，稱為莢膜多糖；有的則進入培養基形成粘液，稱為粘液多糖，是微生物適應環境的產物。乳酸菌EPS具有顯著的生理功能(1)抗癌、抗腫瘤作用；(2)促進益生菌在腸道粘膜上的吸附。(3)對免疫系統的調節有促進作用。(4)對細胞的保護作用。另外，乳酸菌EPS能夠顯著改善乳制品的結構與質地。在酸乳生產過程中，常出現粘度低、凝塊破碎和大量乳清析出等問題，這些問題可以通過使用產EPS的乳酸菌解決。利用高產EPS的乳酸菌可以提高酸乳粘度，減少乳清析出和顆粒感，在大規模生產攪拌型酸乳時，有利于保持產品的均勻性。含有EPS的酸乳在經泵抽、 攪拌和灌裝時，可降低機械破壞程度，對熱和物理應激的抵抗能力增強，使酸乳生產不添加或少添加穩定劑，滿足消費者對純天然食品的需求。此外，乳酸菌胞外多糖還可作為增稠齊U、穩定劑、乳化劑、膠凝劑、填充劑和持水劑，廣泛用于食品、制藥、石油化工以及生化產品等領域。發酵酸乳按發酵溫度可分為兩個主要類型嗜熱型乳酸菌發酵和嗜溫型乳酸菌發酵。目前，在市售酸乳中，主要以嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌作為主要發酵劑，在40°C左右進行發酵的高溫發酵型酸乳，而由嗜溫型乳酸菌發酵的酸乳主要以手工作坊的形式流傳于民間，尤其在少數民族聚居的偏遠牧區，因此，嗜溫型乳酸菌發酵產品亟待開發。嗜溫型乳酸菌最適生長溫度介于20 30°C之間，常用菌種包括乳球菌和明串珠菌等，與高溫發酵酸乳相比，中溫發酵酸乳的發酵時間較長，酸度溫和，揮發性風味物質更多，表觀粘度更大， 脫水收縮作用敏感性小，這就決定了中溫發酵乳具有廣闊的發展前景。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服現有技術的不足之處，提供一種高產胞外多糖的乳酸菌及其用途及所產生的胞外多糖，本菌種在中溫條件下發酵能夠延緩乳酸菌產酸過程，發酵后所得發酵乳的酸度柔和，產生更多典型酸乳揮發性風味物質，產品風味飽滿；此外，中溫發酵工藝可降低生產能耗。本專利技術的目的是通過以下技術方案實現的—種高產胞外多糖的乳酸菌，名稱為WG3-9，菌株的分類名稱乳酸乳球菌乳脂亞種 Lactococcus. Lactis subsp cremaris，保存編號為CGMCC No. 5260，保藏日期為2011 年09年20日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為 北京市朝陽區北辰西路1號院3號。而且，所述乳酸菌高產胞外多糖，其胞外多糖產量為434. 3mg/L0而且，所述乳酸菌發酵酸乳的最適發酵溫度為30°C。一種高產胞外多糖的乳酸菌作為酸乳發酵劑的用途。一種高產胞外多糖的乳酸菌發酵酸乳的方法，方法如下將乳酸菌按5% -10% 的接種量接種于含全脂牛乳的容器中，30°C靜置培養至牛乳凝固，4°C保持16h，得到酸乳。而且，所述乳酸菌為先活化的乳酸菌。而且，所述乳酸菌的活化方法為將保藏于脫脂牛乳培養基中的乳酸菌，按5%接種量接入滅菌脫脂牛乳培養基中，30°C靜置培養4 進行活化。一種胞外多糖，由上述的高產胞外多糖的乳酸菌發酵得到。本專利技術的優點和積極效果如下1.本專利技術篩選出的高產胞外多糖乳酸菌WG3-9能夠高產胞外多糖，其含量達 434.;3mg/L，顯著高于其它乳酸菌。實驗測得菌株WG3-9發酵所得的酸乳酸度為78° T，酸乳粘度為8600mPa · s，凝乳時間為5. 5h，酸乳持水力為29. 5%，脫水收縮敏感性為20%。2.本專利技術篩選出的高產胞外多糖乳酸菌WG3-9，可在30°C發酵酸乳，是一種中溫型發酵菌株，在中溫條件下發酵能夠延緩乳酸菌產酸過程，發酵后所得發酵乳的酸度柔和， 產生更多典型酸乳揮發性風味物質，產品風味飽滿；此外，中溫發酵工藝可降低生產能耗。3.本專利技術篩選出的高產胞外多糖乳酸菌WG3-9發酵所得發酵酸乳粘稠，本菌株產生的胞外多糖能夠顯著改善乳制品的結構與質地，使產品無需添加穩定劑，滿足消費者對純天然食品的需求。附圖說明圖1為本專利技術乳酸菌WG3-9的菌落照片；圖2為本專利技術乳酸菌WG3-9的電子顯微鏡照片。具體實施例方式下面結合實施例，對本專利技術進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的， 不能以下述實施例來限定本專利技術的保護范圍。下述實施實例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法；所使用的材料、 試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。M17固體培養基多聚蛋白胨5g/L，植物蛋白胨5g/L，牛肉膏5g/L，酵母膏2. 5g/ L, β-甘油磷酸二鈉 19g/L，抗壞血酸 0. 5g/L，MgSO4 · 7H20 0. 25g/L，乳糖 5g/L，瓊脂 15g/ L，調節pH至7. 1。MRS固體培養基蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母提取物5g/L，K2HPO4 2g/L，檸檬酸二銨 2g/L，乙酸鈉 5g/L，葡萄糖 20g/L,吐溫 80 ImL, MgSO4 · 7H20 0. 58g/L，MnSO4 · 4H20 0. 25g/L，瓊脂 20g/L,調節 pH 至 6. 4。牛乳營養瓊脂培養基蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，NaCl 5g/L，牛乳200g/L，瓊脂25g/L，調節 pH 至 5. 5。全脂牛乳全脂乳粉溶于蒸餾水中，濃度為100g/L。Sevage試劑氯仿與正丁醇以4 1混合(體積比)。一、菌株的分離與鑒定1.樣品稀釋液制備及菌株分離菌株分離樣品為新疆伊犁地區哈薩克族牧民自制傳統發酵乳制品，酸奶酪。以無菌操作稱取25g樣品，放入裝有225mL生理鹽水的無菌錐形瓶中(瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)，充分振搖，制成1 10的樣品懸浮液。吸取1 10樣品懸浮液lmL，沿管壁緩慢注于裝有9mL生理鹽水的無菌試管中，振搖試管或換用1支無菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1 100的樣品懸浮液。另吸取 ImLl 10樣品懸浮液液，按上述操作順序，做10倍遞增樣品懸浮液。根據待檢樣品活菌總數的估計，選擇2 3個稀釋度樣品，每個稀釋度吸取0. ImL 樣品懸浮液分別置于MRS固體培養基、M17固體培養基、牛乳營養瓊脂培養基進行表面涂布，30°C培養48h。2.菌株初篩用接種針挑取上述平板上的單菌落，再進行劃線或涂布分離純化，對單菌落順序編號，分別接入牛乳營養瓊脂培養基/全脂牛乳培養基中，30°C培養對-4他。形態觀察觀察平板上菌落形態，挑取少量菌泥進行革蘭氏染色，進行顯微鏡觀察。3.菌株復篩3. 1凝乳實驗將保藏于脫脂牛乳培養基中的乳酸菌，按5%接種量接入滅菌脫脂牛乳培養基中， 30°C培養4 進行活化，活化后的菌株接種于含5mL全脂牛乳培養基試管中，30°C靜置培養至牛本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：王昌祿，高鑫，陳勉華，王玉榮，李風娟，李貞景，
申請(專利權)人：天津科技大學，
類型：發明
國別省市：
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