本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種檢測亞硫酸氰根(HSO3-)的方法，是基于香豆素衍生物7-diethylaminocoumarin-3-aldehyde(DEACA)定量檢測亞硫酸氫根的方法。具體是在pH為5.0的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中用DEACA，通過熒光光譜定量檢測亞硫酸氰根的方法。該檢測方法，對亞硫酸氰根顯示了高的靈敏性和選擇性，檢測過程簡便、靈敏、快速，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及亞硫酸氰根檢測分析技術(shù)，具體屬于一種基于香豆素衍生物定量檢測亞硫酸氰根的方法。
技術(shù)介紹
亞硫酸鹽由于在產(chǎn)品生產(chǎn)和儲存中能阻止氧化和細(xì)菌的生長以及控制酶的反應(yīng)而成為許多食物、飲料和醫(yī)藥產(chǎn)品最基本的防腐劑。一定濃度的亞硫酸氰根能引起一些個體氣喘和過敏。亞硫Ife鹽在食物和醫(yī)藥中的指標(biāo)被嚴(yán)格控制。例如在中國，亞硫Ife鹽在甸萄酒中和啤酒中的指標(biāo)不能超過O. OSmg^kg'就消費者的安全而言，發(fā)展亞硫酸鹽的新的分析方法是非常重要的。目前官方采用的檢測食物中亞硫酸氰根的方法是莫尼爾威廉姆斯法，此法乏味，耗時；另外還有一些常規(guī)的方法磷光光度法、套色版、電化學(xué)、酶法等，然而這些方法要么需要繁瑣的樣品預(yù)處理、要么需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種體系簡單、操作方便、選擇性高、靈敏度高、水溶性好的定量檢測亞硫酸氰根的方法。本專利技術(shù)采用的檢測亞硫酸氰根的試劑是香豆素衍生物7-diethylaminocoumarin-3-aldehyde (DEACA)，參照文獻(xiàn)(T. -K. Kim, D. -N. Lee, H. -J. Kim, Tetrahedron Lett.，2008, 49,4879.)合成。合成路線為CHO八乂CHO(I)CH2(COOC2H5)2OH (2) HCI/AcOH.CT 、0本專利技術(shù)提供的，包括如下步驟(I)、配制pH = 5. 0,0. 2M Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液，并用乙醇配制2mM的DEACA 乙醇溶液；(2)、按體積比400 I將Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液和DEACA乙醇溶液加到干凈的熒光比色皿中，在熒光光譜儀上檢測，隨著待測樣的加入，483nm出現(xiàn)明顯的熒光增強(qiáng)，且隨著亞硫酸氰根濃度的增大，熒光強(qiáng)度也增大；(3)、用蒸餾水配制2mM的HS03_溶液，把2mL的Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液和5 μ L 的DEACA乙醇溶液加到熒光比色皿中，逐漸加入HSO3-溶液的體積為5、10、20、40、60、80、 100、120、140、160、180、200uL，同時在熒光光譜儀上測定483nm的對應(yīng)的熒光強(qiáng)度F為70、 78、94、138、160、190、221、252、284、302、329、355，以 HS03_ 濃度為橫坐標(biāo)，以相對熒光強(qiáng)度 F-F0(F0 = 40)為縱坐標(biāo)繪制圖，得到亞硫酸氰根濃度的工作曲線；線性回歸方程為=F-Ftl = 24. 19+1. 51c (c = 10_6 mol/L)；3(4)、測定樣品溶液時將測得的熒光強(qiáng)度代入線性回歸方程，即可求得亞硫酸氰根的濃度。經(jīng)實驗證明，其它陰離子包括半胱氨酸(Cys)不干擾體系對亞硫酸氰根的測定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有如下優(yōu)點和效果1、檢測體系成本低廉，試劑由水楊醛衍生物為主要原料兩步制得，原料便宜，反應(yīng)條件簡單，易于生產(chǎn)；2、本專利技術(shù)的檢測方法， 對亞硫酸氰根顯示了高的靈敏性和選擇性；3、檢測過程簡便、快速，檢測結(jié)果準(zhǔn)確；4、檢測手段簡單，只需要借熒光光譜儀。附圖說明圖I實施例IDEACA的單晶衍射結(jié)構(gòu)圖。圖2實施例2DEACA與亞硫酸氰根作用的熒光發(fā)射圖。圖3實施例3DEACA和各種陰離子作用的熒光發(fā)射圖。圖4實施例4DEACA和各種陰離子作用的熒光柱狀圖及顏色對照圖。 圖5實施例5工作曲線圖。圖6實施例6糖中亞硫酸氰根含量測定圖。具體實施例方式實施例IDEACA的合成將O. Olmol的乙二胺水楊醛，O. 02mol的丙二酸二乙酯，ImL哌啶溶解在30mL的乙醇中，回流攪拌6小時，蒸掉乙醇，把濃鹽酸和冰醋酸各20mL加入此體系再攪拌6小時，加入IOOmL冰水，用40%的NaOH溶液調(diào)pH為5，再攪拌30分鐘，混合物過濾， 水洗，干燥，用苯重結(jié)晶得到7-diethylaminocoumarin。干燥的2mLDMF，2mLP0Cl3，在 30 °C 下攪拌 30 分鐘后，與 O. 007mol 的7-diethylaminocoumarin的IOmLDMF溶液合并,在60°C下攬拌12小時，然后加入IOOmL冰水，用NaOH調(diào)pH直至大量沉淀出現(xiàn)，粗產(chǎn)物過濾，水洗，用乙醇重結(jié)晶得到DEACA。在乙醇中養(yǎng)晶，得到黃色的單晶。DEACA 的表征1H-匪R (CDCl3) δ 10. 13 (s，1Η)，8. 26 (s，1Η)，7. 43 (d, 1H)，6· 67 (d, 1H)，6· 50 (s， 1H), 3. 49 (m, 4H), I. 25 (t, 6H) !Elemental analysis (calcd. % ) for C14H15NO3 :68. 56 ; H, 6. 16 ；N, 5. 71 Found C, 68. 57 ；H, 6. 18 ；N, 5. 74 ；EI-MS m/z 245 +. Crystal data for C14H15NO3 crystal size 0. 20X0. 12X0. 02, monoclinic, space group C2/ c (No. 15). a =25.351(5) k, b = 7.6995(15) A, c = 27.520(8) A, β = 153. 003(9)。，V= 2438.4(10) A3, Z = 4, T = 173K, Θ max = 25. 0 ° ,5129 reflections measured,2145unique (Rint = with I > 2 σ (I)實施例:配制pH 把 2mL 的 Na2HPO4-0. 0525). Final residual for 176 parameters and 2145 reflections =R1 = 0. 0864,wR2 = 0. 1681 and GOF = I. 174。單晶衍射結(jié)構(gòu)圖見圖 I。= 5.0,0. 2M Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液，并用乙醇配制2mM的DEACA溶液； 檸檬酸緩沖溶液及5 μ L的DEACA乙醇溶液加到干凈的熒光比色皿中，取 HS03_的溶液，逐漸用微量進(jìn)樣器加到此比色皿中，邊加樣邊在熒光分光光度儀上檢測，隨著HSO3-的加入，483nm處熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)。熒光發(fā)射圖見圖2。實施例3配制pH = 5. 0、0. 2M Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液，并用乙醇配制2mM的DEACA溶液； 在13個熒光比色皿中，各加入2mL的Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液和5 μ L的DEACA乙醇溶液， 再分別加入40摩爾當(dāng)量的HSO3-,以及400摩爾當(dāng)量的其他各種(F—，CF, Br—，NO3^ CN_，SCN—， S2O廣，AcO' CO廣，S042_，CIO;)及半胱氨酸(Cys)，得到熒光發(fā)射圖見圖3。實施例4在13個熒光比色皿中，各加入2mL的Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液及5 μ L的DEACA乙醇溶液，再分別加入40摩爾當(dāng)量的HSO3-,以及400摩爾當(dāng)量的其他各種(F—，CF, Br—，NO3^ CN_，SCN_，S2O廣，Ac0_，CO廣，S042_，ClO4O及半胱氨酸(Cys)，在熒光分光光度儀上檢測，繪制不同陰離子對應(yīng)的483nm熒光強(qiáng)度的柱狀圖，本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：霍方俊，陰彩霞，楊瑜濤，張晶晶，顏敘秀，
申請(專利權(quán))人：山西大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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