本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)公開(kāi)了一種檢測(cè)黃曲霉素試劑盒或試紙條。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供的檢測(cè)黃曲霉素的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1分泌的單克隆抗體；所述抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1的保藏編號(hào)為CGMCC?No.5779。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)的試劑盒和試紙條具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度高、成本低、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短、適合各種單位使用、儲(chǔ)存簡(jiǎn)單、保質(zhì)期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，能同時(shí)快速檢測(cè)大批量樣品，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供的試劑盒和試紙條，適用于測(cè)定奶制品中黃曲霉素的殘留量。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)的抗體、試劑盒、試紙條及檢測(cè)方法在黃曲霉素的檢測(cè)中將發(fā)揮重大作用。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)涉及檢測(cè)黃曲霉素的試劑盒或試紙條。
技術(shù)介紹
隨著人類(lèi)生活水平的改善，食品安全日益成為餐桌上人們最為關(guān)注的問(wèn)題之一嗎，人們每天都會(huì)食用的牛奶可能會(huì)含有對(duì)人體健康有害的黃曲霉素W。哺乳動(dòng)物攝入被黃曲霉素B1污染的飼料或食品后，在體內(nèi)可被羥化而生成黃曲霉素乂。研究表明，黃曲霉素札為強(qiáng)致癌劑。世界衛(wèi)生組織制定食品黃曲霉毒素最高允許濃度為15y g/kg，美國(guó)聯(lián)邦政府有關(guān)法律規(guī)定人類(lèi)消費(fèi)的牛奶中的含量不能超過(guò)0. g/kg，其他動(dòng)物飼料中的含量不能300ii g/kg。我國(guó)今年發(fā)布的《GB 2761-2011食品中真菌毒素限量》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定食品中黃曲霉素M1在乳及乳制品中的限量為0. 5 y g/kg。而歐盟國(guó)豕規(guī)定更加嚴(yán)格，原奶、 熱處理奶及加工奶產(chǎn)品中M1限量為0. 05ii g/kg，墨兒食品(包括嬰幼兒奶)中M1限量為0.025 ii g/kg。因此，建立特異、敏感的黃曲霉素M1的檢測(cè)方法是當(dāng)務(wù)之急。目前國(guó)內(nèi)外研究主要有薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、免疫親和柱法以及酶聯(lián)免疫法等。TLC法的特異性較差，靈敏度也相對(duì)較差，所需標(biāo)準(zhǔn)品濃度較高，潛在的污染性較高。HPLC法所需儀器設(shè)備投資大，操作技術(shù)要求高，凈化柱消耗較多，檢測(cè)成本較高，免疫親和柱特異性較好，但需結(jié)合HPLC儀和熒光光度計(jì)才能定量檢測(cè)，檢測(cè)技術(shù)要求和成本較高。ELISA法相比而言，操作簡(jiǎn)便、快捷、污染較小、靈敏度也較高，適合批量樣品的普檢和篩選，特別是研制成功的試劑盒，給檢測(cè)人員帶來(lái)很大的方便，同時(shí)也節(jié)省了成本，符合目前國(guó)際上檢測(cè)領(lǐng)域的發(fā)展方向。免疫膠體金層析技術(shù)不需任何儀器設(shè)備和試劑， 特別適合于基層單位大批量時(shí)間緊的檢測(cè)和大面積普查，因此酶免疫法在食品安全分析中應(yīng)用廣泛。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的是提供檢測(cè)黃曲霉素試劑盒的或試紙條。本專(zhuān)利技術(shù)提供的檢測(cè)黃曲霉素的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1分泌的單克隆抗體。抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1，簡(jiǎn)稱(chēng)雜交瘤細(xì)胞2A1，已于2012年2月 15日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC，地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào))，保藏號(hào)為CGMCC No. 5779。所述試劑盒可為如下I)至4)中的任意一種I)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物、所述單克隆抗體和酶標(biāo)記抗抗體的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原；2)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物、所述單克隆抗體和抗抗體的試劑盒；其中， 所述抗抗體作為包被原；3)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物和所述單克隆抗體的試劑盒；其中，所述單克隆抗體作為包被原；4)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物和所述單克隆抗體的酶標(biāo)記物的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原。權(quán)利要求1.一種檢測(cè)黃曲霉素的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞 2A1分泌的單克隆抗體；所述抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1的保藏編號(hào)為CGMCC No.5779。2.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其特征在于所述試劑盒為如下I)至4)中的任意一種1)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物、所述單克隆抗體和酶標(biāo)記抗抗體的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原；2)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物、所述單克隆抗體和抗抗體的試劑盒；其中，所述抗抗體作為包被原；3)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物和所述單克隆抗體的試劑盒；其中，所述單克隆抗體作為包被原；4)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物和所述單克隆抗體的酶標(biāo)記物的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原；3.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述載體蛋白為卵清蛋白或牛血清白蛋白。4.如權(quán)利要求I至3中任一所述的試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括洗滌液、樣品濃縮液、底物顯色液和終止液中的至少一種。5.一種檢測(cè)黃曲霉素的膠體金試紙條，由樣品吸收墊、膠體金墊、反應(yīng)膜和吸水墊組成；沿試紙條的軸向，所述樣品吸收墊、所述膠體金墊、所述反應(yīng)膜和所述吸水墊依次按順序連接，樣品吸收墊的末端與膠體金墊的始端相連，膠體金墊的末端與反應(yīng)膜的始端相連， 反應(yīng)膜的末端與吸水墊的始端相連；所述膠體金墊上包被有膠體金標(biāo)記的單克隆抗體；所述單克隆抗體為抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1分泌的單克隆抗體；所述抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞 2A1的保藏編號(hào)為CGMCC No. 5779 ；所述反應(yīng)膜上有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)均為與所述試紙軸向垂直的條帶狀；檢測(cè)區(qū)位于靠近膠體金墊末端的一側(cè)；質(zhì)控區(qū)位于遠(yuǎn)離膠體金墊末端的一側(cè)；檢測(cè)區(qū)包被有式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠二抗。6.權(quán)利要求I至4中任一所述試劑盒，或，權(quán)利要求5所述膠體金試紙條，在檢黃曲霉素中的應(yīng)用。7.權(quán)利要求I至4中任一所述試劑盒，或，權(quán)利要求5所述膠體金試紙條，在檢測(cè)待測(cè)樣本是否含有黃曲霉素中的應(yīng)用。8.如權(quán)利要求I至4中任一所述的試劑盒，或權(quán)利要求5所述的膠體金試紙條，或如權(quán)利要求6或7所述的應(yīng)用，其特征在于所述黃曲霉素為黃曲霉素M1或黃曲霉素M2。全文摘要本專(zhuān)利技術(shù)公開(kāi)了一種檢測(cè)黃曲霉素試劑盒或試紙條。本專(zhuān)利技術(shù)提供的檢測(cè)黃曲霉素的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1分泌的單克隆抗體；所述抗黃曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞2A1的保藏編號(hào)為CGMCC No.5779。本專(zhuān)利技術(shù)的試劑盒和試紙條具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度高、成本低、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短、適合各種單位使用、儲(chǔ)存簡(jiǎn)單、保質(zhì)期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，能同時(shí)快速檢測(cè)大批量樣品，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)。本專(zhuān)利技術(shù)提供的試劑盒和試紙條，適用于測(cè)定奶制品中黃曲霉素的殘留量。本專(zhuān)利技術(shù)的抗體、試劑盒、試紙條及檢測(cè)方法在黃曲霉素的檢測(cè)中將發(fā)揮重大作用。文檔編號(hào)G01N33/577GK102590519SQ201210045398公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月24日專(zhuān)利技術(shù)者何丹婷, 吳小平, 徐飛, 李向梅, 李娜, 楊錚, 王照鵬, 趙寧 申請(qǐng)人:北京維德維康生物技術(shù)有限公司本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
【技術(shù)特征摘要】
【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：徐飛，吳小平，何丹婷，王照鵬，李娜，趙寧，李向梅，楊錚，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：北京維德維康生物技術(shù)有限公司，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：
0來(lái)自[北京市電信互聯(lián)網(wǎng)數(shù)據(jù)中心] 2015年01月16日 23:42黃曲霉，半知菌類(lèi)，一種常見(jiàn)腐生真菌。多見(jiàn)于發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機(jī)物上。菌落生長(zhǎng)較快，結(jié)構(gòu)疏松，表面灰綠色，背面無(wú)色或略呈褐色。菌體有許多復(fù)雜的分枝菌絲構(gòu)成。營(yíng)養(yǎng)菌絲具有分隔；氣生菌絲的一部分形成長(zhǎng)而粗糙的分生孢子梗，頂端產(chǎn)生燒瓶形或近球形頂囊，表面產(chǎn)生許多小梗（一般為雙層），小梗上著生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、頂囊、小梗和分生孢子合成孢子頭，可用于產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是釀造工業(yè)中的常見(jiàn)菌種。