本發明專利技術公開了放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，經核磁與質譜綜合解析，確定了該化合物的結構，其化學結構如圖，為放線菌素D的新同系物。其制法是用累西菲鏈霉菌Streptomyces?recifensis?CGMCC?No.5228作生產菌。該鏈霉菌在含有可溶性淀粉的液體培養基中發酵，獲得菌絲體、發酵上清液和各種代謝產物。對發酵后的發酵上清液和菌絲體用氯仿或乙酸乙酯萃取，通過提取分離和純化等方法，得到結構如上的新化合物，通過細胞測定表明該化合物具有抗腫瘤細胞活性。本發明專利技術為研制新的抗腫瘤藥物提供先導化合物，對開發利用我國的藥用放線菌資源具有重要價值。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物學、藥物化學、有機化學領域，具體的說是設計一株鏈霉菌中提取分離得到的抗腫瘤細胞化合物2-甲基-放線菌素D以及該化合物的制備方法和應用，該化合物為放線菌素D的同系物。
技術介紹
平蓋靈芝含有豐富的麥角留醇、靈芝酸、靈芝多糖、氨基酸、多肽、腺苷、三萜類及多種微量元素，其中有機鍺含量高達12380ppm，有機硒含量也很高。雖然，平蓋靈芝化學成分目前已經研究得較為深入，但對平蓋靈芝內生放線菌研究甚少。放線菌在自然界分布廣泛，主要以孢子或菌絲狀態存在于土壤、空氣和水中，放線菌與人類的生產和生活關系極為密切，目前廣泛應用的抗生素約70%是各種放線菌所產生。放線菌起初從土壤中分離獲得，隨著研究的深入，人們開始從植物中分離放線菌，通過研究發現放線菌廣泛分布在各種已研究過的植物體中，并且能產生一些重要的化合物，有些具有新的化學結構。而從真菌中分離放線菌的報道較少，從平蓋靈芝內生放線菌中分離化合物更是鮮有報道。
技術實現思路
為了從真菌中分離放線菌，本專利技術提供了一種放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法。本專利技術的具體技術方案如下該放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D，其特征在于該化合物的化學結構式如下權利要求1.放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，其特征在于所述制備方法的具體步驟如下 (I)菌株發酵發酵菌株為累西菲鏈霉菌Streptomyces recifensis CGMCCNo. 5228,該菌在培養基成分為酵母浸膏4. Oilg,麥芽浸膏5. Oilg,葡萄糖4. 0 ±4，MgSO4O. Iia05g,蒸懼水0. 8 I. 5L的種子培養基中振蕩培養60h 80h ;然后接種于發酵罐中，發酵培養基為溶性淀粉5. Og'葡萄糖10. 0±2g，蛋白胨5. Oilg,酵母浸膏5.(^4，NaC14. 0±2g,K2HPO4O. 5±01g，MgSO4O. 5±01g，CaC032. 0 ±0 5g，蒸餾水 0. 8 I. 5L, pH = 7. 2 ;28±2°C振蕩培養100±5h ； (2)發酵100±5h后，獲得含發酵產物的發酵液，發酵液經濃縮后用氯仿或乙酸乙酯萃取，萃取物通過硅膠柱層析(氯仿甲醇=100 0-0 100梯度洗脫)、凝膠層析(氯仿甲醇=5 4)以及液相色譜純化(甲醇水乙腈=26 : 46 : 28)得到成品。2.根據權利要求I所述的放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D，其特征在于該化合物的化學結構式如下3.權利要求I所述的放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，其特征在于采用微生物發酵技術生產，產生菌為累西菲鏈霉菌Streptomyces recifensis,菌種保藏于 CGMCC，保藏號為 CGMCC No. 5228。4.根據權利要求I所述的放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，其特征在于步驟(2)中用硅膠柱層析，先以氯仿甲醇=100 30 : 0 : 70梯度洗脫，然后以氯仿甲醇=10 0 : 90 100梯度洗脫。5.根據權利要求I所述的放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中用乙酸乙酯或氯仿萃取2 3次，合并3次濃縮液。6.根據權利要求I所述的放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，其特征在于放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D是在抗腫瘤藥物中進行應用。全文摘要本專利技術公開了放線菌素D新同系物2-甲基-放線菌素D及其制備方法，經核磁與質譜綜合解析，確定了該化合物的結構，其化學結構如圖，為放線菌素D的新同系物。其制法是用累西菲鏈霉菌Streptomyces recifensis CGMCC No.5228作生產菌。該鏈霉菌在含有可溶性淀粉的液體培養基中發酵，獲得菌絲體、發酵上清液和各種代謝產物。對發酵后的發酵上清液和菌絲體用氯仿或乙酸乙酯萃取，通過提取分離和純化等方法，得到結構如上的新化合物，通過細胞測定表明該化合物具有抗腫瘤細胞活性。本專利技術為研制新的抗腫瘤藥物提供先導化合物，對開發利用我國的藥用放線菌資源具有重要價值。文檔編號C07K7/06GK102617707SQ20111028953公開日2012年8月1日 申請日期2011年9月19日 優先權日2011年9月19日專利技術者馮友建, 劉金娟, 卞光凱, 曹小迎, 王力, 秦盛, 蔣繼宏, 袁博, 陳鳳美, 陳永強, 鞠秀云 申請人:江蘇師范大學本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：蔣繼宏，袁博，陳永強，馮友建，陳鳳美，鞠秀云，王力，曹小迎，秦盛，劉金娟，卞光凱，
申請(專利權)人：江蘇師范大學，
類型：發明
國別省市：
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