用于多能性基質細胞的神經元分化的方法、系統和組合物技術方案

本發明專利技術的一些實施方式包括通過微小RNA的應用而在體外或體內選擇性誘導多能性基質細胞的神經元分化的方法、系統和組合物，該微小RNA包括但不限于miRNA-124、miRNA-137和/或miRNA-9*，這些miRNA的表達產物、以及含有這些miRNA的功能元件的分子和組合物。本發明專利技術的一些實施方式還包括這樣的誘導的細胞用于治療哺乳動物損傷和疾病的治療給藥和用途，包括但不限于，可能在其它方面導致細胞或系統功能降低的神經系統損傷或疾病。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術的一些實施方式涉及用于治療哺乳動物神經系統損傷和疾病的細胞類型的誘導和應用，但不限于此。
技術介紹
某些神經系統損傷、影響中樞或周圍神經系統的自身免疫性疾病、以及神經退行性疾病的特征在于特定細胞的損失、或存在神經細胞的功能異常，這些會引起患者出現不同的神經病學體征和癥狀以及可能不可逆轉的神經功能喪失。僅作為ー個實例，一些患有中風、脊椎損傷或其它神經損傷和變性的患者經受功能細胞類型的損失，或如帕金森氏癥 和阿爾茨海默氏癥這樣的反過來導致系統功能的喪失或異常的神經病癥。目前，用于治療和修復這樣的細胞和系統功能的治療選擇是有限的。因此，仍然需要方法、系統和組合物來促進其它治療，包括致力于替換缺失或受損的神經系統細胞、組織和功能的療法。
技術實現思路
本專利技術的一些實施方式包括通過微小RNA(microRNA)的應用而在體外或體內選擇性地誘導多能性基質細胞的神經元分化的方法、系統和組合物，包括但不限于miRNA-124、miRNA-137和/或miRNA_9*，這些miRNA的表達產物，和含有這些miRNA的功能元件(functional elements)的分子和組合物,但本專利技術并不局限于本文所描述的那些實施方式，且不存在具體放棄。本專利技術的一些實施方式也包含這樣的誘導細胞的治療給予和應用以治療哺乳動物損傷和疾病，包括但不限于，可能在其它方面導致細胞或系統功能降低的神經系統損傷或疾病。附圖說明現在將參照附圖僅通過舉例方式描述本專利技術的一些實施方式，對其它實施方式不存在具體的放棄，在附圖中圖I顯示用生長因子處理或用對照miRNA和miRAN_124或miRNA_137轉染3、5和9天的MSC的亮場圖像(明場像，bright fieldimage)。圖2是顯示miRAN-124、miRNA-137和miRNA_9*在MSC中誘導神經元標記的數據表不。圖3顯示用測試的miRNA轉染細胞或由DMEM處理后的蛋白質印跡結果。圖4顯示用對照miRNA、miRAN-124或miRNA-137轉染(動物)脂肪和臍帶來源的MSC(cord derived MSC)的結果。具體實施例方式本專利技術的一些實施方式包括通過微小RNA(microRNA) ( “miRNA”或“miR”)的應用而在體外或體內選擇性誘導多能性基質細胞(“MSC”)的神經元分化的方法、系統和組合物，包括但不限于，miRNA-124和/或miRNA-137、和/或miRNA_9*，這些miRNA的表達產物，以及含有這些miRNA的功能元件的分子和組合物，但本專利技術并不局限于本文所描述的那些實施方式，且對任何實施方式不存在具體放棄。本專利技術的一些實施方式也包含這樣的經誘導的細胞用于治療治療哺乳動物損傷和疾病的治療給藥和用途，包括但不限于，可能在其它方面導致細胞或系統功能降低的神經系統損傷或疾病。在一些實施方式中，分化的MSC的這種誘導，和/或所產生的細胞，可以通過給予所述患者治療有效量的感興趣的miRNA、或由這樣的miRNA誘導的分化MSC，而用于治療患者體內的細胞、組織或器官損傷。我們已經出乎意料地發現某些miRNA能夠誘導受試者中MSC的長期神經元分化用于基于細胞療法的用途，這些受試者呈現神經系統損傷和 疾病，包括但不限于，神經退行性紊亂和脊髄損傷。這樣的受試者可以包括哺乳動物，包括但不限于人。因此，我們已經發現這樣的miRNA以及所產生的經誘導的MSC的新應用，除了其它可能 的用途，它們能夠減少或減輕哺乳動物中某些神經系統損傷或疾病的影響。本專利技術的一些實施方式包括通過miRNA-124、miRNA-137、和/或miRNA_9*的應用和表達而誘導MSC的神經元分化的方法、系統、和/或組合物，但不限于此。MSC是典型地以非常低的濃度(10000個有核細胞中約I個)典型地存在于成年骨髄中的中胚層來源的細胞(mesoderm-derived cells)。MSC能夠分化產生細胞，如骨髓基質、血管、脂肪、骨骼和軟骨。這些細胞可能也具有分化為神經元\或神經膠質-樣細胞的潛能，這取決于環境信號。此外，這些細胞可能被進ー步誘導表達或通過與生長因子和激素的不同組合進行培養而保持特定神經元或神經膠質表型。在實驗動物模型中以及最近在試驗性臨床實驗中，MSC已經顯示出在各種神經疾病和功能異常中發揮治療作用。它們的作用主要歸因于免疫抑制和神經保護功能。在實驗性自身免疫性腦炎(“EAE”)中，多發性硬化癥(“MS”)的動物模型，用骨髓來源的MSC處理小鼠引起了疾病表現的顯著抑制。ー些研究證明，除了自身免疫調節降低之外，這些細胞的神經分化還在諸如缺血性腦的各種實例中增強了它們的治療作用。在我們的研究中，我們檢測了三種神經元-相關性miRNA,即miRNA-124、miRNA-137和miRNA_9*對人MSC分化的影響。這些miRNA沒有在MSC中正常表達。我們發現miRNA-124、miRNA-137或miRNA-9*的表達誘導了 MSC的神經元分化，正如細胞形態學以及β III-微管蛋白和ΜΑΡ2的表達提高所指示的。miRNA-124、miRNA-137和miRNA-9*引起酪氨酸羥化酶的增加，這暗示著MSC向多巴胺能表型的分化。miRNA124前體(前體miRNA124，pre-miRNA124)的靶標之ー是抑制大量神經元基因的轉錄因子REST。我們的結果顯示神經元-相關性miRNA可以誘導MSC的長期神經元分化，用于在神經退行性和神經炎性紊亂以及脊髄損傷中基于細胞療法的用途。與通過生長因子處理而誘導的瞬時分化(transientdifferentiation)相比，miRNA的用途優于現有方法的ー個優點在于能夠在將引起長期神經元分化的MSC中穩定地表達miRNA前體。就這點而論，容易獲得患者自己的骨髓來源的MSC、以及大量富集和擴增MSC的可行性表明這樣的細胞的神經元分化能夠用作自體神經干細胞，其可用于治療大量與神經元缺乏或受損有關的獲得性或先天性神經性紊亂。僅作為ー個實例，MSC能夠由通過吸脂去除的脂肪進行制備，以及由臍帶血(cord blood)或胎盤進行制備，但不限于此。MSC降低的免疫原性可以促進現成的(off the shelf)或者來自匹配或部分錯配家族成員的異體神經元的使用，而用于治療(僅作為非限制性實例)由必需酶(essential enzymes)或其它必需產物(essential products)的先天性缺失而引起的病癥。(本專利技術)不限于僅在本文中明確公開的實施方式，且不存在對任何實施方式的具體放棄，本專利技術的一些實施方式包括1.MSC的神經元分化，其是通過培養或其它暴露于miRNA，包括但不限于，miRNA124 和/或 miRNA137、和 / 或 miRNA-9*。2.用這樣的miRNA對MSC的轉染；3.將在體外誘導神經 元分化的MSC給予患有神經系統損傷或疾病的受試者；和/或4.將用這樣的miRNA轉染的MSC給予患有神經系統損傷或疾病的受試者。在一些實施方式中，隨著MSC向神經元的可再現的轉分化(reproducibletransdifferentiation), MSC的治療用途能夠在體外或體內獲得和擴展,從而包括(僅作為某些實例)本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：查亞·布魯迪，西蒙·斯拉文，
申請(專利權)人：腦干生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：