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    大豆生育期e1-as基因及其編碼蛋白制造技術

    技術編號:7781326 閱讀:176 留言:0更新日期:2012-09-20 18:27
    大豆生育期e1-as基因及其編碼蛋白,它涉及大豆生育期e1-as基因及其編碼蛋白。本發明專利技術提供了大豆生育期e1-as基因及其編碼蛋白。本發明專利技術的大豆生育期e1-as基因的基因序列如序列表Seq?ID?No:1所示。本發明專利技術的大豆生育期e1-as基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表SeqID?No:2所示。本發明專利技術通過品種的相關的遺傳及分子功能驗證,e1-as基因與E1基因相比,具有促進開花的功能。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及大豆生育期el-as基因及其編碼蛋白。
    技術介紹
    El基因位于著絲點附近,自Bernard (1971)年報道以來,人們一直沒有克隆出其功能基因。由于該基因位于近著絲點(pericentromeric region),遺傳重組率較低,不利于采用圖位克隆法克隆出該基因,在專利技術專利名稱一種大豆生育期El基因及其編碼蛋白,專利申請號為201210112662.9中,公布出El基因序列及其相應的蛋白序列后,證明大豆生育期El基因具有強烈抑制大豆開花的生理功能。其蛋白質序列雖然并不能鑒定出B3結構域,但是與B3結構域基因具有遠緣的關系。B3結構域基因是一類較為保守的植物特有的轉錄因子,一般只有100-120氨基酸,常與其他結構域共同起作用。B3結構域中含有與DNA相結合的特殊位點,一般與DNA分子的大溝起作用。在含有B3結構域的蛋白質對抗逆性反應、植物的生長與發育等諸多方面起重要作用。同時,El基因具有一個核定位信號,其特征為親核蛋白一般都含有的能保證整個蛋白質能夠通過核孔復合體被運到細胞核內的特殊的短肽氨基酸序列。在大豆栽培品種中,其El基因的突變如何影響著大豆生育期(開花期及成熟期)是一個非常重要的科學問題,目前還沒有在分子水平上的相關研究報道。
    技術實現思路
    本專利技術的目的是提供大豆生育期el-as基因及其編碼蛋白。本專利技術的大ii生育期el-as基因的基因序列如序列表Seq ID No:l所不。本專利技術的大豆生育期el-as基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No 2所示。本專利技術的大豆生育期el-as基因是大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)的突變型基因。本專利技術的有益效果本專利技術是在克隆出大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662.9)的基礎上,進一步對El基因序列進行深入系統的研究。由于在大豆中具有典型的B3基因結構域基因,本基因是代表一類新型的基因家族,我們已證實El基因可以代表著El位點的功能,即具有抑制大豆開花的功能。本專利技術對不同品種及近等基因系中El基因序列進行了研究,并確定了 el-as基因,其對大豆生育期關系密切。el-as基因與大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)相比,兩者的序列在DNA水平的僅有一個核苷酸(44號)差異,該核苷酸對核定位信號有很大的影響,el-as基因在氨基酸序列15從精氨酸到蘇氨酸的錯義突變,該區域為核定位信號的第一個結構域(氨基酸序列13 16上的KKRK)上(見序列表Seq ID No :1)。 el-as基因與大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)相比,本專利技術的el-as基因在關鍵的核定位信號上有一個堿基差異,并改變了原來El基因的功能,使其抑制大豆開花的功能明顯減弱(見專利技術專利申請號201210112662. 9公開內容),因此本專利技術的el-as基因較大豆生育期El基因具有促進大豆開花的功能,即抑制開花不徹底,具有該功能的基因被稱為滲漏(leaky)基因型,即該基因型尚有部分抑制開花功能,并非功能全失。本專利技術的el-as基因具有對大豆光周期的不敏感性,使具有該基因的品種能在長日照條件下,開花期較為適中的特點,是我國大豆甚至世界大豆品種栽培中最為重要的一類基因,比如在Harosoy、William82及我國的合豐55等都為el_as基因型。附圖說明圖lel-as基因酶切后電泳結果圖片,其中I號為中黃13,2號為合豐55,3號為淮ii4 號,4 號為徐 14,5 號為 Harosoy-El, 6 號為 Sakamotowase, 7 號為中黃 39 ;M 為 DNA 分子量標準樣品(0X174 -HaeIII);圖2為GFP未融合el-as基因的瞬時表達載體結構不意圖;圖3為GFP融合el-as基因的瞬時表達載體結構示意圖;圖4為GFP未融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖;圖5為GFP未融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖;圖6為GFP未融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定影像位圖; 圖7為GFP未融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖;圖8為GFP融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖;圖9為GFP融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖;圖10為GFP融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定位影像圖;圖11為GFP融合el-as基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖;圖12 :大豆品種Harosoy在長日照16小時光照/8小時黑暗條件下,出苗后55天照片,其中,箭頭所指的是已開放的大豆花朵;圖13具大豆生育期El基因的大豆品種Harosoy-El在長日照16小時光照/8小時黑暗條件下,出苗后55天的照片。具體實施例方式具體實施方式一本實施方式的大豆生育期el-as基因的突變基因序列如序列表Seq ID No 1 所示。本實施方式是在克隆出大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662.9)的基礎上,進一步對El基因序列進行深入系統的研究。由于在大中具有典型的B3基因結構域基因,本基因是代表一類新型的基因家族,我們已證實EI基因可以代表著EI位點的功能,即具有抑制大豆開花的功能。本實施方式對不同品種及近等基因系中El基因序列進行了研究,并確定了 el-as基因,其對大豆生育期關系密切。el-as基因與大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)相比,兩者的序列在DNA水平的僅有一個核苷酸(44號)差異,該核苷酸對核定位信號有很大的影響,在氨基酸序列15從精氨酸到蘇氨酸的錯義突變,該區域為核定位信號的第一個結構域(氨基酸序列13 16上的KKRK)上(見序列表Seq ID No :1)。el-as基因與大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)相比,本實施方式的el-as基因在關鍵的核定位信號上有一個堿基差異,并影響改變了原來El基因的 功能,使其抑制大豆開花的功能明顯減弱(見專利技術專利申請號201210112662. 9公開內容),因此本實施方式的el-as基因較大豆生育期El基因具有促進大豆開花的功能,即抑制開花不徹底,具有該功能的基因被稱為滲漏(leaky)基因型,即該基因型尚有部分抑制開花功能,并非功能全失。本實施方式的el-as基因具有對大豆光周期的不敏感性,使具有該基因的品種能在長日照條件下,開花期較為適中的特點,是我國大豆甚至世界大豆品種栽培中最為重要的一類基因,比如在Harosoy、William82及我國的合豐55等都為el_as基因型。具體實施方式二 本實施方式的大豆生育期el-as基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No :2所示。本實施方式是在克隆出大豆生育期基因El (專利技術專利申請號201210112662. 9)的基礎上,進一步對El基因序列進行本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    【技術特征摘要】
    1.大豆生育期el-as基因,其特征在于大豆生育期el-as基因的基因序列如序列表SeqID No 1 所示。2.如權利要求I所...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:夏正俊,翟紅,吳紅艷,呂世翔,陳受宜,
    申請(專利權)人:中國科學院東北地理與農業生態研究所
    類型:發明
    國別省市:

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