本發明專利技術提供一種GLP-1二聚體及其制備方法與應用。GLP-1二聚體是兩個含有半胱氨酸的GLP-1單體通過半胱氨酸形成的二硫鍵連接而成。含有半胱氨酸的GLP-1單體其通式為7HAEX10T?FTSX15V?SSYLE?X22X23AAKEFIX30W?LX33KGR?G37；其中，X10為甘氨酸或半胱氨酸，X15為天冬氨酸或半胱氨酸，X22為甘氨酸或半胱氨酸，X23為亮氨酸或半胱氨酸、X30為丙氨酸或半胱氨酸，X33為纈氨酸或半胱氨酸；且X10、X15、X22、X23、X30和X33中僅有一個為半胱氨酸。本發明專利技術的GLP-1二聚體在體內的半衰期可達到8～96小時以上，極大地便利了其臨床推廣和應用。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及糖尿病相關的藥物領域，具體而言，本專利技術涉及一種具有延長的胰高血糖素樣肽(GLP-I)類的體內半衰期的GLP-I 二聚體。本專利技術還涉及該GLP-I 二聚體的制備方法以及其在制備治療糖尿病藥物、治療和/或預防肥胖癥的藥物中的應用。
技術介紹
胰高血糖素樣肽-I (glucagon-likepeptide-Ι,以下簡稱GLP-1)是主要由小腸L細胞分泌的一種37個氨基酸組成的多肽，其活性形式為GLP-I (7-37) OH和GLP-I (7-36)NH2(Mojsov S，J Clin Invest. 1987 Feb ；79(2) :616-9) ALP-I 明顯減低人用餐后的血糖，能刺激胰島素的產生，同時還能起到一定減肥效應，并且不會引起低血糖癥(Drucker D J， Diabetes. 1998 Feb ；47(2) :159-69)。近期研究還表明 GLP-1 有胰腺再生作用(Drucker DJ,2003Dec ； 144 (12) :5145-8)。此外，因為GLP-I為完全人源化多肽，作為臨床藥物在安全上具有較大優勢。然而，GLP-I (7-37)的血清半衰期僅僅為3-5分鐘，每天多次注射給藥在臨床使用中非常不方便。目前已經有不少研究采用GLP-I類似物融合蛋白技術解決GLP-I類似物在體內的存留時間(CN90101167. 3、CN200710018734. 2、CN200410054397. 9、CN01820232. 2、CN200380110152. 7、CN200510039265. 3、CN200610127237. I、CN200910009642. 7)，然而，現有的技術與臨床理想的目標還有很大距離，普遍都還沒有達到臨床標準，最近Novo Norisk生產的利拉魯肽為GLP-I類似物，其對GLP-I進行了棕櫚酸的修飾，并于2009年于美國上市。但是利拉魯肽也存在半衰期短的問題，其劑型仍需每日注射。因此，目前需要解決GLP-I在體內半衰期短的問題。
技術實現思路
針對臨床上GLP-I類似物在體內存留時間較短，需要每天注射給藥的缺限，本專利技術的一個目的是提供一種半衰期較長的GLP-I的二聚體及其單體。本專利技術的另一個目的是提供一種GLP-I 二聚體及其單體的制備方法。本專利技術的又一個目的是提供一種GLP-I 二聚體在制備治療糖尿病的藥物中的應用，以及該GLP-I 二聚體在制備治療和/或預防肥胖癥的藥物中的應用。本專利技術的再一個目的是提供一種以GLP-I 二聚體作為有效成分的藥用組合物，其包含上述GLP-I 二聚體。其中，所述的藥物組合物還包含一種或多種藥學上可接受的輔料，并且所述藥物組合物優選為注射劑，進一步優選為凍干粉針或溶液注射劑。用于實現上述目的的技術方案如下一方面，本專利技術提供一種胰高血糖素樣肽-I類似物單體，所述單體具有如下通式I 7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22X23AAK EFIX30W LX33KGR G37 ；其中，Xltl為甘氨酸或半胱氨酸，X15為天冬氨酸或半胱氨酸，X22為甘氨酸或半胱氨酸，X23為亮氨酸或半胱氨酸、X3tl為丙氨酸或半胱氨酸，X33為纈氨酸或半胱氨酸；且乂1(|、乂15、X22> X23、X30和X33中僅有一個為半胱氨酸。如上所述的胰高血糖素樣肽-I類似物單體，其選自SEQ ID NO I =7HAECT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 2 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 3 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 4 =7HAEGT FTSDV SSYLE CQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 5 =7HAEGT FTSDV SSYLE GCAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 6 =7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37，和SEQ ID NO 7 =7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LCKGR G37。另一方面，本專利技術提供一種胰高血糖素樣肽-I類似物二聚體，所述二聚體由兩個符合通式I的單體分子連接形成，形成所述二聚體的兩個單體可以相同或不同；優選地，所述二聚體由所述單體通過半胱氨酸形成的二硫鍵連接而成。再一方面，本專利技術提供所述胰高血糖素樣肽-I類似物單體的制備方法，所述方法包括Fmoc策略固相合成含有半胱氨酸的胰高血糖素樣肽-I類似物單體。又一方面，本專利技術提供如前所述的胰高血糖素樣肽-I類似物單體或二聚體在制備用于治療糖尿病及糖尿病相關疾病的藥物中的應用。再一方面，本專利技術提供如前所述的胰高血糖素樣肽-I類似物單體或二聚體在制備用于治療和/或預防肥胖癥及肥胖癥相關疾病的藥物中的應用。—方面，本專利技術提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含如前所述的胰高血糖素樣肽-I類似物單體或二聚體。優選地，所述藥物組合物中還包含一種或多種藥學上可接受的輔料。優選地，所述藥物組合物為注射劑。更優選地，所述藥物組合物為凍干粉針劑或溶液注射劑。以下是本專利技術的詳細描述(I)含有半胱氨酸的GLP-I單體本專利技術所述的含有半胱氨酸的GLP-I單體的通式如下7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22X23AAK EFIX30W LX33KGR G37。如人源GLP-I 的序列 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGRG37O上述含有半胱氨酸的GLP-I單體為人工合成序列，分別在GLP-I第10、15、22、23、30或33位氨基酸上進行了修飾，由半胱氨酸取代了原有的氨基酸，形成含有半胱氨酸的GLP-I單體，序列如下SEQ ID NO I =7HAECT FTS DV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 2 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 3 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 4 =7HAEGT FTSDV SSYLE CQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 5 =7HAEGT FTSDV SSYLE GCAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 6 =7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37,SEQ ID NO 7 :7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LCKGR G37。GLP-1 二聚體為含有半胱氨酸的GLP-I單體通過半胱氨酸形成二硫鍵連接而成。可以于上述氨基酸序列中選擇一個作為二聚體的其中一條單體，而與另一條可為同樣的序列或其他序列。(2)本專利技術的藥用組合物本專利技術的藥用組合物為含有GLP-I 二聚體可以與一種或多種藥學上可接受的輔料共同制成藥用組合物，這些輔料包本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.胰高血糖素樣肽-I類似物單體，其特征在于，所述單體具有如下通式7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22X23AAK EFIX30W LX33KGR G37 ； 其中，X10為甘氨酸或半胱氨酸，X15為天冬氨酸或半胱氨酸，X22為甘氨酸或半胱氨酸，X23為亮氨酸或半胱氨酸、X3tl為丙氨酸或半胱氨酸，X33為纈氨酸或半胱氨酸；且X1(I、X15、X22、X23> X30和X33中僅有一個為半胱氨酸。2.權利要求I所述的胰高血糖素樣肽-I類似物單體，其特征在于，所述單體選自SEQ ID NO I =7HAECT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 2 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 3 =7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 4 =7HAEGT FTSDV SSYLE CQAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 5 =7HAEGT FTSDV SSYLE GCAAK EFIAff LVKGR G37,SEQ ID NO 6 =7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37，和SEQ ID NO 7 =7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAff LCKGR G37。3.胰高血糖素樣肽-I類似物二聚體，其特征在于，所述二聚體由兩個權利要求I或2所述的單體連接形成，形成所述二聚體的單體可以相同或不同； 優選地，所述二聚體由所述單體通過半胱氨酸形成的二硫鍵連接而成。4.權利要求I所述胰高血糖素樣肽-I類似物單體的制備方法，其特征在于，所述方法包括Fmoc策略固相合成含有半胱氨酸的胰高血糖素樣肽-I類...
【專利技術屬性】
技術研發人員：龔珉，徐為人，王玉麗，付剛，湯立達，任曉文，
申請(專利權)人：天津藥物研究院，
類型：發明
國別省市：
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