本發(fā)明專利技術(shù)涉及腫瘤早期診斷活體檢測試劑及腫瘤靶向治療前藥，具體涉及一種靶向特性的可示蹤貴金屬熒光探針及抗腫瘤前藥。本發(fā)明專利技術(shù)所合成的探針經(jīng)實驗證明無細(xì)胞毒性，安全有效，既可實現(xiàn)細(xì)胞水平成像，又可實現(xiàn)活體腫瘤成像，作為一種靶向熒光探針或前藥有著很好的前景。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及腫瘤早期診斷活體檢測試劑及腫瘤靶向治療前藥。具體涉及靶向近紅外熒光探針及前藥。
技術(shù)介紹
腫瘤是目前威脅人類健康的重大疾病。惡性腫瘤引起的死亡率僅次于心血管疾病，正在成為人類第一殺手，嚴(yán)重危害著人類的健康和生存。其發(fā)病率一直高居不下，且目前已呈現(xiàn)明顯的年輕化趨勢，單中國內(nèi)地每年新增腫瘤患者竟達(dá)200萬人。因此，提高癌癥的診斷率與治愈率是提高人類健康及生存質(zhì)量的重要手段。目前，用于腫瘤診斷的常規(guī)手段為計算機(jī)斷層成像(CT)，核磁共振影像(MRI)，超 聲(US)等。然而，這類技術(shù)用于腫瘤診斷的前提是實體腫瘤的體積生長到一定尺寸，這就為腫瘤早期診斷帶來了局限。最近發(fā)展起來的用于組織功能型檢測的技術(shù)，包括18F-脫氧葡萄糖正電子發(fā)射計算機(jī)斷層掃描(18FDG-PET),單光子發(fā)射計算機(jī)體層攝影術(shù)(SPECT)，可用于腫瘤的早期診斷。然而，有限的空間分辨率、高費用以及高專業(yè)操作技術(shù)要求阻礙了此類技術(shù)的廣泛應(yīng)用。因此，發(fā)展一種可互補的技術(shù)手段是目前實現(xiàn)早期腫瘤診斷的必經(jīng)之路。當(dāng)前治療腫瘤的方法主要有放療、化療、手術(shù)療法和基因治療。放療和化療是非常重要的非手術(shù)療法，但是放療和化療在殺死腫瘤細(xì)胞的同時也對機(jī)體正常細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p傷。尤其是化療，由于藥物本身缺乏靶向性，因而出現(xiàn)治愈率低、多藥耐藥性、毒副作用巨大等重大治療問題。因此，提高抗腫瘤藥物的特異性是目前化療中亟待解決問題中的重中之重。突光納米簇(NCs)是近年來金納米材料中的研究亮點。NCs由數(shù)十個至數(shù)百個金原子堆砌而成，尺寸小于2納米。由于NCs的尺寸接近于電子的費米波長級別(〈lnm)，因此與納米粒或納米棒的表面等離子體共振引起的對可見與近紅外波段特定波長光的散射和吸收不同，熒光納米簇具有較強的熒光特性(400nm-750nm)。2002年，Link S等報道采用硼氫化鈉及谷胱甘肽還原法制備Au NCs，其熒光量子產(chǎn)率 10_3(Link S，Beeby A, FitzGeraldS,El-Sayed M, Schaaff T, Whetten R. Phys. J. Chem. B. 2002, 106:3410-3415. )。Xie J 等利用BSA作為還原劑及穩(wěn)定劑合成了 Au NCs，其量子產(chǎn)率已提高至6% (Xie J, Zheng Y andYing J Y. J. Am. Chem. Soc. 2009，131:888-889.)。與傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料相比，NCs的熒光具有穩(wěn)定性高、Stoke位移大的優(yōu)勢；與同樣具有優(yōu)異熒光特性的無機(jī)熒光探針一量子點相比，Au NCs的生物毒性要低得多；同時，NCs的表面穩(wěn)定劑為生物活性分子(BSA，DNA，多肽等)，賦予了 Au NCs與其它活性分子進(jìn)一步偶聯(lián)的能力。葉酸即維生素B11，其在生物體轉(zhuǎn)運途徑是通過葉酸受體(FR)介導(dǎo)的內(nèi)吞作用攝取葉酸及其衍生物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。FR是一種糖基化磷脂酰肌醇連接的膜糖蛋白，在多種腫瘤細(xì)胞表面過量表達(dá)，如卵巢癌、子宮頸癌、腎癌等，而在正常組織中低水平表達(dá)。目前，多項研究證實葉酸可以作為一種靶向物質(zhì)，將治療藥物或檢測成像物質(zhì)運載到腫瘤部位，起到靶向性治療和定位的效果。2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖(2-DG)是葡萄糖類似物，為代謝過程中不可缺少的能量來源。惡性腫瘤即使在有氧條件下也表現(xiàn)出高糖酵解率和高葡萄糖需求，通過葡萄糖轉(zhuǎn)運體(GLUT1)完成對葡萄糖的攝取。研究表明，2-DG可被GLUTl識別并運送到細(xì)胞膜上被2-脫氧-6-磷酸己糖激酶的磷酸化。因為2-DG的2位缺少羥基，從而抑制2-脫氧葡萄糖6-磷酸進(jìn)一步代謝并在細(xì)胞內(nèi)保留。由于GLUTl在腫瘤部位呈現(xiàn)高表達(dá)和高活性，因此利用2-DG作為腫瘤靶向配體可有效實現(xiàn)對腫瘤的特異性識另ij。2-DG在體內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性，與放射性同位素標(biāo)記成像相比，在長時間成像中更具優(yōu)勢。目前，2-DG熒光類似物可作為新型的準(zhǔn)確檢測在生物體中的藥物對腫瘤療效的無創(chuàng)性探針。O’Neil (O’Neil RG, Wu L, Mul Iani N. Mol. Imag. Biol. 2005; 7 (6) : 388-392.)和 Lloyd (Lloyd PG, Hardin CD, Sturek M. Physiol. Res. 1999;48(6):401-410.)合成了 2_ (N—7—nitrobenz2 OXA-1, 3 diaxol_4_ 基)氣基]_2_ 脫氧甸甸糖(2_NBDG)，并通過MCF-7人乳腺癌細(xì)胞證實該化合物主要通過GLUT己糖激酶途徑吸收。張等人合成了焦脫鎂葉綠酸衍生化2-DG，既是一個腫瘤靶向性近紅外熒光探針，又可作為光動力療法中的治療試劑(Zhang M, Zhang Z, Blessington D, Li H，Busch TM, Madrak V. Bioconjug.Chem. 2003; 14(4) :709-714.)。程等用熒光顯微鏡技術(shù)證實Cy5. 5染料共價偶聯(lián)的2-DG可 與不同的細(xì)胞株具有一定的親和性(Cheng Z, Levi J, Xiong Z, Gheysens 0, Keren S，ChenX, Gambhir SS. Biocon jug. Chem. 2006; 17 (3) : 662-669.)。最近，Kovar 等通過腫瘤裸鼠模型證實近紅外熒光染料(IRDyeSOO)偶聯(lián)2-DG是一個廣泛適用的體內(nèi)光學(xué)成像劑并做了在小鼠體內(nèi)的腫瘤成像(Kovar JL, Volcheck ff, Sevick-Muraca E, Simpson MA, Olive DM. Anal.Biochem. 2009;384(2):254 - 262.)。七甲川菁類染料、近紅外苊醌類熒光染料均是是吲哚青綠(ICG)的衍生物。其發(fā)射波長為700 1200nm，在該范圍內(nèi)生物分子自身熒光較弱，可避免背景干擾而獲得較高的分析靈敏度.并且近紅外熒光具有較強的穿透性，通過近紅外熒光成像能夠觀測到機(jī)體組織深部的信息。在不同納米材料、藥物、生物活性分子上鏈接近紅外熒光染料，有利于實現(xiàn)活體內(nèi)生物信號的實時、在位、無損檢測。目前，在大多數(shù)體外細(xì)胞水平和體內(nèi)活體水平進(jìn)行探針或藥物腫瘤靶向特性考察是需要匹配不同的熒光探針，這給實際應(yīng)用帶來很多不便。如Guo等將2-DG偶聯(lián)近紅外熒光染料，可以在活體進(jìn)行實時成像，而在細(xì)胞水平考察中又進(jìn)一步進(jìn)行了可見波段熒光探針的標(biāo)記以利于突光觀察(Guo J, Du C，Shan L, Zhu H，Xue B，Qian Z, Achilefu S，GuY. Contrast. Media. Mol. Imaging. 2012，7(3) :289-301.)。由于細(xì)胞水平及動物水平考察了不同的探針，在一定程度上不具有一致性且增加了方法的復(fù)雜性。Xu等合成牛血清白蛋白表面修飾的熒光金納米簇(Au-BSA)，由于缺少靶向分子，Au-BSA靶向到腫瘤部位的時間較長，同時腫瘤部位與其他組織部位的對比度不高(Wu X, He X, Wang K，Xie C，Zhou BQingZ. Nanoscale. 2010, 2, 2244-2249)。在本專利技術(shù)中，選用貴金本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
【技術(shù)特征摘要】
1.一種近紅外納米熒光探針，其特征是由貴金屬納米簇、靶向性分子和近紅外有機(jī)熒光染料通過共價偶聯(lián)構(gòu)成。2.權(quán)利要求I的近紅外納米熒光探針，其中貴金屬納米簇為金納米簇、銀納米簇、鉬納米 簇或銅納米簇。3.權(quán)利要求I的近紅外納米熒光探針，其中靶向性分子為抗體、葉酸、多肽、甲硫酰胺或2-脫氧葡萄糖。4.權(quán)利要求I的近紅外納米熒光探針，其中靶向性分子為2-脫氧葡萄糖。5.權(quán)利要求I的近紅外納米熒光探針...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳海燕，顧月清，楊林，張鑫，崔思思，
申請(專利權(quán))人：中國藥科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。