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    轉(zhuǎn)基因油菜標(biāo)準(zhǔn)樣品、其建立方法及應(yīng)用技術(shù)

    技術(shù)編號:7860952 閱讀:260 留言:0更新日期:2012-10-14 18:48
    本發(fā)明專利技術(shù)公開一種轉(zhuǎn)基因油菜RT73的標(biāo)準(zhǔn)樣品制備、其建立方法及其在檢測轉(zhuǎn)基因油菜RT73中的應(yīng)用,分別以轉(zhuǎn)基因油菜RT73或非轉(zhuǎn)基因油菜為原料,將原料研磨、過篩、加水,攪拌、靜置、將沉淀物制備成凍干粉;再將二者以科學(xué)的比例混合,并重復(fù)“加水,攪拌、靜置、將沉淀物制備成凍干粉”的過程,分裝,0℃~4℃貯存;通過上述方法獲得轉(zhuǎn)基因油菜RT73的標(biāo)準(zhǔn)樣品,也可以應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因油菜RT73的Real-Time?PCR檢測試劑盒。這對全面深入的研究解決轉(zhuǎn)基因成分檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備技術(shù)和穩(wěn)定性保證技術(shù),積極開展我國轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制,添補(bǔ)該測量領(lǐng)域的空白,具有很重要的現(xiàn)實(shí)意義。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)屬于轉(zhuǎn)基因食品檢測
    ,具體涉及轉(zhuǎn)基因油菜RT73的標(biāo)準(zhǔn)樣品制備、其建立方法及其在檢測轉(zhuǎn)基因油菜RT73中的應(yīng)用。
    技術(shù)介紹
    近年來,轉(zhuǎn)基因作物培育技術(shù)取得突破進(jìn)展,陸續(xù)推出了ー批新品種,在改善農(nóng)作物品質(zhì)、提高產(chǎn)量等方面發(fā)揮了巨大作用。然而,人們對轉(zhuǎn)基因食品的安全性問題存在著很多的爭論。轉(zhuǎn)基因作物的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)、可能帶來的環(huán)境問題、作為食品對人體健康影響的問題、產(chǎn)品加貼標(biāo)簽問題、運(yùn)輸問題、國際貿(mào)易問題、知識產(chǎn)權(quán)問題等已引起世界廣泛性的關(guān)注。轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問題已由學(xué)術(shù)觀點(diǎn)分岐,發(fā)展到知識產(chǎn)權(quán)、環(huán)境問題、經(jīng)濟(jì)問題甚至政治問題。歐盟和ー些國家相繼出臺了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品管理法規(guī),我國于2002年3月開始實(shí)施《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》及其三個(gè)配套管理辦法。2001年,歐盟要求對轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行標(biāo)識管理,并提出對非轉(zhuǎn)基因食品只要不是有意污染,允許含有1%的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品(閾值),而不用標(biāo)識。日本、韓國、澳大利亞等不同國家限量閾值不同,從1%_5%不等。轉(zhuǎn)基因食品的檢測是這些g在保護(hù)生物和生態(tài)安全、維護(hù)消費(fèi)者權(quán)益、促進(jìn)貿(mào)易和經(jīng)濟(jì)健康發(fā)展的法規(guī)和政策的基本依據(jù),其標(biāo)準(zhǔn)化將為制訂、實(shí)施和改進(jìn)這些法規(guī)和政策提供有力保證。國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因食品的檢測研究剛剛起步,許多問題都有待解決,標(biāo)準(zhǔn)樣品則是該領(lǐng)域尚未解決的重要問題。開展轉(zhuǎn)基因成分檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制在保證測試結(jié)果的可比性和溯源性、保障食品安全、解決貿(mào)易爭端,促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展等方面均具有重要的意義。更為嚴(yán)峻的問題是目前國外僅有轉(zhuǎn)基因大豆粉、轉(zhuǎn)基因玉米粉M0N810等少數(shù)幾個(gè)品種的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),價(jià)格非常昂貴,手續(xù)繁多,周轉(zhuǎn)時(shí)間長,不能適時(shí)地滿足檢驗(yàn)檢疫工作的需要;日本正在加緊研制轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的分子DNA參考標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的定量檢測;2005年,我們率先在國內(nèi)研制成功了轉(zhuǎn)基因大豆粉國家ニ級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),填補(bǔ)了我國在轉(zhuǎn)基因成分檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品方面的空白,但轉(zhuǎn)基因油菜籽等標(biāo)準(zhǔn)樣品仍是空白。
    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
    鑒于國內(nèi)轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)樣品緊缺的狀況,本項(xiàng)轉(zhuǎn)基因油菜RT73標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備完成,對全面深入的研究解決轉(zhuǎn)基因成分檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備技術(shù)和穩(wěn)定性保證技術(shù),積極開展我國轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制,添補(bǔ)該測量領(lǐng)域的空白,具有很重要的現(xiàn)實(shí)意 義。轉(zhuǎn)基因油菜籽RT73品系簡介抗草甘膦轉(zhuǎn)基因油菜(Roundup Ready )RT73品系含有的外源基因是1)耐除草劑基因CP4 EPSPS,受FMV35S+CTP2啟動子和E9 3’終止子調(diào)控;2)標(biāo)記篩選基因G0Xv247,啟動子和終止子分別為FMV35S+CTP1和E9 3’。質(zhì)粒圖譜為本文檔來自技高網(wǎng)
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    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

    【技術(shù)特征摘要】
    1.轉(zhuǎn)基因油菜RT73標(biāo)準(zhǔn)樣品,其特征在于,通過下述方法制備 a取油菜籽原料放在研缽中,于通風(fēng)櫥內(nèi)加入乙醚并用研棒攪拌、研磨,待乙醚蒸發(fā)后,將其過100目標(biāo)準(zhǔn)篩,收集粉末備用; b向步驟a所獲得的粉末中加入等質(zhì)量的水,攪拌均勻后,靜置lh,棄上清,將沉淀物制備成凍干粉; c以轉(zhuǎn)基因油菜RT73為原料,按照步驟a和b所述方法制備凍干粉;d以非轉(zhuǎn)基因油菜籽為原料,按照步驟a和b所述方法制備凍干粉;e將步驟c制備的凍干粉與步驟d制備的凍干粉按2. 5 :100的重量比例混合后,向混合粉末中加入等質(zhì)量的水,攪拌均勻后,靜置lh,棄上清,將沉淀物制備成凍干粉并分裝,(T4°C貯存; 上述步驟ITe中任一步驟所述的凍干粉,其制備方法為 ①樣品預(yù)凍先把樣品在_80°C冷凍2h; ②冷凍過程關(guān)好冰凍干燥機(jī)的干燥室門,開始干燥室制冷;干燥室溫度降至_35°C時(shí),開始冷卻阱制冷;冷卻阱制冷溫度降至_40°C時(shí)...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:曹際娟徐君怡曹冬梅于兵
    申請(專利權(quán))人:曹際娟徐君怡曹冬梅于兵
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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