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    大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白制造技術

    技術編號:7893677 閱讀:191 留言:0更新日期:2012-10-23 01:32
    大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白,它涉及一種大豆生育期e1-fs基因。本發明專利技術提供了大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白。本發明專利技術的大豆生育期e1-fs基因的基因序列如序列表Seq?ID?No:1所示。本發明專利技術的大豆生育期e1-fs基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq?ID?No:2所示。本發明專利技術通過品種的相關的遺傳及分子功能驗證,e1-fs基因與E1基因相比,具有顯著的促進開花的功能。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及大豆生育期el-fs基因及其編碼蛋白。
    技術介紹
    El基因位于著絲 點附近,自Bernard (1971)年報道以來,人們一直沒有克隆出其功能基因。由于該基因位于近著絲點(pericentromeric region),遺傳重組率較低,不利于采用圖位克隆法克隆出該基因,在專利技術專利(一種大豆生育期El基因及其編碼蛋白,專利申請號為201210112662. 9)中,公布出El基因序列及其相應的蛋白序列后,證明大豆生育期El基因具有強烈抑制大豆開花的生理功能。其蛋白質序列雖然并不能鑒定出B3結構域,但是與B3結構域基因具有遠緣的關系。B3結構域基因是一類較為保守的植物特有的轉錄因子,一般只有100-120氨基酸,常與其他結構域共同起作用。B3結構域中含有與DNA相結合的特殊位點,一般與DNA分子的大溝起作用。在含有B3結構域的蛋白質對抗逆性反應、植物的生長與發育等諸多方面起重要作用。同時,El基因具有一個核定位信號,其特征為親核蛋白一般都含有的能保證整個蛋白質能夠通過核孔復合體被運到細胞核內的特殊的短肽氨基酸序列。在大豆栽培品種中,其El基因的突變如何影響著大豆生育期(開花期及成熟期)是一個非常重要的科學問題,目前還沒有在分子水平上的相關研究報道。
    技術實現思路
    本專利技術的目的是提供大豆生育期el-fs基因及其編碼蛋白。本專利技術的大ii生育期el-fs基因的基因序列如序列表Seq ID No:l所不。本專利技術的大豆生育期el-fs基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No 2所示。本專利技術的大豆生育期el-fs基因是大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)的突變型基因。本專利技術的有益效果本專利技術是在克隆出大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662.9)的基礎上,進一步對El基因序列進行深入系統的研究。由于在大豆中具有典型的B3基因結構域基因,本基因是代表一類新型的基因家族,我們已證實El基因可以代表著El位點的功能,即具有抑制大豆開花的功能。本專利技術對不同品種及近等基因系中El基因序列進行了研究,并確定了 el-fs基因,其對大豆生育期關系密切。el-fs基因是在大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)核苷酸序列48bp處發生了單堿基缺失,在AA 16至41之間形成移碼(frameshift),在第42位形成了終止子(見序列表Seq ID No 2)0細胞定位研究發現,該基因因移碼而造成了沒有任何信號出現在細胞核或細胞質中。具有el-fs基因的品種表現為開花特早,在長日照條件下具有el-fs基因的品種或品系與短日照條件下的開花天數相當,大約為30天左右,說明具有el-fs品種幾乎喪失了對光周期的敏感性。坂本早生(Sakamotowase)及其衍生品種是具有el-fs基因型的典型品種。附圖說明圖I為el-fs基因電泳圖,其中,I號為鐵莢四粒丑,2號為長農14,3號為Kariyutaka, 4號為鐵莢子,5號為長農18,6號為坂本早生(Sakamotowase), 7號為小金黃,8號為長農4 ;圖2為GFP未融合el-fs基因的瞬時表達載體結構示意圖;圖3為GFP融合el-fs基因的瞬時表達載體結構示意圖;圖4為GFP未融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖;圖5為GFP未融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖;圖6為GFP未融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定影像位圖;圖7為GFP未融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖;圖8為GFP融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖;圖9為GFP融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖;圖10為GFP融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定位影像圖;圖11為GFP融合el-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖;圖12 :大豆品種坂本早生(Sakamotowase)在長日照16小時光照/8小時黑暗條件下,出苗后32天照片,其中,箭頭所指的是已開放的大豆花朵;圖13具大豆生育期El基因的大豆品種Harosoy-El在長日照16小時光照/8小時黑暗條件下,出苗后32天的照片。具體實施例方式具體實施方式一本實施方式的大豆生育期el-fs基因的基因序列如序列表SeqID No 1 所示。本實施方式是在克隆出大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662.9)的基礎上,進一步對El基因序列進行深入系統的研究。由于在大中具有典型的B3基因結構域基因,本基因是代表一類新型的基因家族,我們已證實EI基因可以代表著EI位點的功能,即具有抑制大豆開花的功能。本實施方式對不同品種及近等基因系中El基因序列進行了研究,并確定了 el-fs基因,其對大豆生育期關系密切。el-fs基因是在大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)核苷酸序列48bp處發生了單堿基缺失,在AA 16至41之間形成移碼(frameshift),在第42位形成了終止子(見序列表Seq ID No 2)0細胞定位研究發現,該基因因移碼而造成了沒有任何、信號出現在細胞核或細胞質中。具有el-fs基因的品種表現為開花特早,在長日照條件下具有el-fs基因的品種或品系與短日照條件下的開花天數相當,大約為30天左右,說明具有el-fs品種幾乎喪失了對光周期的敏感性。坂本早生(Sakamotowase)及其衍生品種是具有el-fs基因型的典型品種。具體實施方式二 本實施方式的大豆生育期el-fs基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No :2所示。本實施方式是在克隆出大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662.9)的基礎上,進一步對El基因序列進行深入系統的研究。由于在大中具有典型的B3基因結構域基因,本基因是代表一類新型的基因家族,我們已證實EI基因可以代表著EI位點的功能,即具有抑制大豆開花的功能。本實施方式對不同品種及近等基因系中El基因序列進行了研究,并確定了 el-fs基因,其對大豆生育期關系密切。el-fs基因是在大豆生育期El基因(專利技術專利申請號201210112662. 9)核苷酸序 列48bp處發生了單堿基缺失,在AA 16至41之間形成移碼(frameshift),在第42位形成了終止子(見序列表Seq ID No 2)0細胞定位研究發現,該基因因移碼而造成了沒有任何信號出現在細胞核或細胞質中。具有el-fs基因的品種表現為開花特早,在長日照條件下具有el-fs基因的品種或品系與短日照條件下的開花天數相當,大約為30天左右,說明具有el-fs品種幾乎喪失了對光周期的敏感性。坂本早生(Sakamotowase)及其衍生品種是具有el-fs基因型的典型品種。通過以下試驗驗證本專利技術的效果(I)基因el-fs序列的獲得取長至三葉真葉期的待測品種坂本早生(Sakamotowase)本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    大豆生育期e1?fs基因,其特征在于大豆生育期e1?fs基因的基因序列如序列表Seq?ID?No:1所示。

    【技術特征摘要】
    1.大豆生育期el-fS基因,其特征在于大豆生育期el-fs基因的基因序列如序列表SeqID No 1 所示。2.如權利要求I所...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:夏正俊翟紅呂世翔吳紅艷劉寶輝孔凡江
    申請(專利權)人:中國科學院東北地理與農業生態研究所
    類型:發明
    國別省市:

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