本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種監(jiān)測3，2’，6’-三-N-乙酰基慶大霉素Cla及其相關(guān)物質(zhì)的分析方法。本發(fā)明專利技術(shù)采用高效液相色譜法，色譜條件為：YMC–Pack?CN色譜柱，粒徑5μm,柱規(guī)格（150～250mm）×（4.6mm）；流動(dòng)相組分為的氨水和甲醇體積比為40～10:60～90，氨水中氨的含量為0.04～0.06mol/L；流速：0.8～1.0mL/min；進(jìn)樣量：10μL；檢測器：SPD-M20A，檢測波長220nm；本發(fā)明專利技術(shù)采用簡單方便的分析方法就可跟蹤反應(yīng)進(jìn)程。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種監(jiān)測方法，特別是涉及一種利用高效液相色譜法監(jiān)測3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla的分方法。
技術(shù)介紹
硫酸依替米星是擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的國家一類新藥，該藥是以慶大霉素Cla為起始原料，采用過渡金屬絡(luò)合物催化方法保護(hù)慶大霉素Cla中部分氨基，得中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla，經(jīng)硅烷化羥基保護(hù)、縮合、還原、N-乙基化等反應(yīng)，將中間體轉(zhuǎn)化為I-N-乙基慶大霉素Cla，即依替米星，再用大孔樹脂進(jìn)行層析分離純化，然后成鹽得成品硫酸依替米星。目前所有的文獻(xiàn)和專利中在中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla的生產(chǎn)過程中，均未報(bào)到3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla的檢測方法。由于原料慶大霉素Cla中有五個(gè)氨基，在乙酰化反應(yīng)時(shí)，容易產(chǎn)生保護(hù)不足或過保護(hù)等副產(chǎn)物，使得中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla收率不高，最終導(dǎo)致產(chǎn)品的合成轉(zhuǎn)化率偏低。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本專利技術(shù)提供一種高效、快速的監(jiān)測方法，能夠在線跟蹤反應(yīng)進(jìn)程，以便最大收率的合成中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla，提高最終產(chǎn)品硫酸依替米星的合成轉(zhuǎn)化率。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，選用YMC - PackCN色譜柱，以甲醇和氨水為流動(dòng)相，限定流動(dòng)速度在0. 8 I. OmL/min范圍內(nèi)，選用STO檢測器，分析中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla的含量。所述的YMC - Pack CN色譜柱選用球形硅膠微粒為基質(zhì)的氰基型色譜柱。所述的YMC-Pack CN色譜柱選用其規(guī)格為(150 250mm) X (4. 6mm)，粒徑5 y m的YMC - Pack CN色譜柱。所述的甲醇與氨水的體積比為60 90:40 10。所述的流動(dòng)相中氨水中氨的含量為0. 04 0. 06mol/L。所述的流速，其進(jìn)樣量為IOiiL,柱溫為25°C。所述的SH)檢測器選用檢測波長220nm為STO-M20A檢測器。本專利技術(shù)的技術(shù)方案中，采用如下的技術(shù)參數(shù)(I)高聚物色譜柱YMC-Pack CN 色譜柱，(150 250mm) X (4. 6mm)，粒徑 5 y m。(2)流動(dòng)相流動(dòng)相組份為甲醇與氨水的體積比為60 90:40 10，氨水中氨的含量為 0. 04 0. 06mol/L。(3)流速0. 8 I. OMl/min，進(jìn)樣量10ii L，柱溫25°C。(4)檢測器SPD-M20A，檢測波長 220nm。本專利技術(shù)的采用如下的實(shí)驗(yàn)器材及試劑(I)實(shí)驗(yàn)儀器Prominence高效液相色譜儀(島津公司)，由LC-20AB泵、SPD-M20A、CT0_20A ;工作站(島津 LCsolution workstation)(2)實(shí)驗(yàn)試劑含中間體3，2’，6’_三-N-乙酰基慶大霉素Cla的供試品反應(yīng)液(企業(yè)提供)；3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla純品(企業(yè)提供)，甲醇(美國Merck公司);氨水(國產(chǎn)分析純)；高效液相去離子水(自制)。·與現(xiàn)有檢測方法相比，本專利技術(shù)的有益效果在于I、原生產(chǎn)工藝中沒有針對中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla含量的分析方法，是根據(jù)反應(yīng)時(shí)間來判斷反應(yīng)結(jié)束，不能準(zhǔn)確確定乙酰化反應(yīng)的終點(diǎn)，造成中間體收率的波動(dòng)較大。2、本專利技術(shù)通過選擇合適的色譜柱，調(diào)整流動(dòng)相的比例，建立了對中間體3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla的先進(jìn)高效的分析方法，改變了原有生產(chǎn)工藝中跟蹤反應(yīng)的粗放式操作，大大減少了五乙酰化副產(chǎn)物的含量。3、本專利技術(shù)首次米用聞效液相色譜法對中間體3, 2’，6’-二-N-乙酰基慶大霉素Cla進(jìn)行分析。4、本專利技術(shù)操作方便，為企業(yè)在硫酸依替米星生產(chǎn)過程的在線檢測提供技術(shù)支持。具體實(shí)施例方式下面通過具體的實(shí)施例，對本專利技術(shù)做詳細(xì)的描述實(shí)施例I色譜條件檢測儀器島津Prominence高效液相色譜儀；色譜柱YMC - PackCN色譜柱，粒徑5 ii m，柱規(guī)格(150mm X 4. 6mm);檢測器SPD-M20A ;檢測波長220nm ;流動(dòng)相氨水和甲醇體積比為10:90,氨水中氨的含量為0. 04mol/L ;流速0. 8mL/min ;進(jìn)樣量IOuL ;進(jìn)樣物質(zhì)供試品溶液與對照品溶液。結(jié)果3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。實(shí)施例2色譜條件檢測儀器、檢測器、檢測波長、進(jìn)樣量、流動(dòng)相、流速、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)例1，色譜柱YMC-Pack CN色譜柱，粒徑5iim，柱規(guī)格(250mmX 4. 6mm)，結(jié)果3，2’，6’ -三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。實(shí)施例3色譜條件檢測儀器、檢測器、檢測波長、進(jìn)樣量、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)例1，色譜柱YMC - Pack CN色譜柱，粒徑5iim，柱規(guī)格(250mmX 4. 6mm)，流動(dòng)相氨水和甲醇體積比為10:90，氨水中氨的含量為0. 04mol/L ;流速:0. 8mL/min ;結(jié)果:3，2’，6’-三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。實(shí)施例4色譜條件檢測儀器、檢測器、檢測波長、進(jìn)樣量、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)例1，色譜柱YMC - Pack CN色譜柱，粒徑5iim，柱規(guī)格(250mmX 4. 6mm)，流動(dòng)相氨水和甲醇體積比為30:70，氨水中氨的含量為0. 06mol/L ;流速:0. 8mL/min ;結(jié)果3，2’，6’-三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。實(shí)施例5色譜條件檢測儀器、檢測器 、檢測波長、進(jìn)樣量、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)例1，色譜柱YMC - Pack CN色譜柱，粒徑5iim，柱規(guī)格(250mmX 4. 6mm)，流動(dòng)相氨水和甲醇體積比為30:70，氨水中氨的含量為0. 06mol/L ;流速I. OmL/min ;結(jié)果3，2’，6’-三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。實(shí)施例6色譜條件檢測儀器、檢測器、檢測波長、進(jìn)樣量、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)例1，色譜柱YMC - Pack CN色譜柱，粒徑5iim，柱規(guī)格(250mmX4. 6mm)，流動(dòng)相氨水和甲醇體積比為30:70，氨水中氨的含量為0. 06mol/L ;流速1. 2mL/min ;結(jié)果:3，2，，6，-三-N-乙酰基慶大霉素Cla與相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到基線分離。本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種監(jiān)測3，2’，6’？三？N？乙酰基慶大霉素Cla含量的方法，其特征在于：選用YMC–Pack？CN色譜柱，以甲醇和氨水為流動(dòng)相，限定流動(dòng)速度在0.8～1.0mL/min范圍內(nèi)，選用SPD檢測器，分析中間體3，2’，6’？三？N？乙酰基慶大霉素Cla的含量。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種監(jiān)測3，2’，6’ -三-N-こ酰基慶大霉素Cla含量的方法，其特征在于選用YMC - Pack CN色譜柱，以甲醇和氨水為流動(dòng)相，限定流動(dòng)速度在O. 8 I. OmL/min范圍內(nèi)，選用SH)檢測器，分析中間體3，2’，6’ -三-N-こ酰基慶大霉素Cla的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種監(jiān)測3，2’，6’-三-N-こ酰基慶大霉素Cla含量的方法，其特征在干所述的YMC-Pack CN色譜柱選用球形硅膠微粒為基質(zhì)的氰基型色譜柱。3.根據(jù)權(quán)利要求I或2中的任一項(xiàng)所述的一種監(jiān)測3，2’，6’-三-N-こ酰基慶大霉素Cla含量的方法，其特征在于所述的YMC-Pack CN色譜柱選用其規(guī)格為(150 250mm) X (4. 6mm)，粒徑 5 μ ...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：姜艷，封成軍，周長清，李興剛，謝立成，
申請(專利權(quán))人：常州方圓制藥有限公司，常州大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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