一種中藥組合物中知母皂苷BⅡ的含量測定方法技術

本發明專利技術公開了一種中藥組合物中知母皂苷BⅡ的含量測定方法。該中藥組合物由黃芪、生地黃、雞血藤、桂枝、當歸、川芎、荔枝核、知母、桑枝、徐長卿、延胡索、麻黃、地龍組成，臨床用于糖尿病周圍神經病變，本發明專利技術通過高效液相色譜法測定其中知母皂苷BⅡ的含量，該方法簡便快捷，準確可靠，用于該中藥組合物的中間體和終產品的質量控制。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種中藥組合物中知母皂苷B II的含量測定方法。
技術介紹
CN1833703A公開了一種治療糖尿病周圍神經病變的藥物及制備方法，該中藥組合物中含有原料藥材知母，知母中富含留體皂苷、雙苯吡酮類、黃酮類、木脂素類、多糖類、有機酸類及微量元素等成分。而其中，留體皂苷類為 主要成分，其在根莖中的量約為6 %，且種類繁多。其中知母皂苷B II為該藥材中的重要成分，常作為中藥組合物中含量檢測指標進行質量控制，常見的測定方法為薄層掃描法，高效液相色譜法等，但是，由于中成藥成分復雜，往往不同的中藥組合物，知母皂苷B II的含量測定方法會有所不同，原因主要是由于中藥組合物中不同原料存在干擾，因此，同一成分的測定方法在不同的中藥組合物中，很難采用同一種方法測定，每種中藥組合物的測定方法都需要嚴格的方法篩選才能確定。本專利技術是在CN1833703A專利的基礎上進行的改進專利技術，在此全文引用該專利文件記載的內容。
技術實現思路
本專利技術目的是提供一種中藥組合物中知母皂苷B II的含量測定方法，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪300-400份、生地黃300-400份、雞血藤300-400份、桂枝80-120份、當歸100-150份、川芎150-200份、荔枝核150-200份、知母80-120份、桑枝80-120份、徐長卿80-120份、延胡索70-120份、麻黃50-100份、地龍30-60份； 該方法采用高效液相色譜法，色譜條件和測定法如下 色譜條件色譜柱C18,規格為4. 6mmX250mm,5u m ;流動相為乙腈7jC -24:76 ;蒸發光散射檢測器漂移管溫度為75°C，加熱級別為66%，載氣流速為25psi，柱溫為30°C，流速為I.Oml/min，理論塔板數以知母皂苷B II計不少于6000 ； 供試品溶液的制備取上述中藥組合物制劑內容物或研細的粉末2. Og，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入25%乙腈50ml，稱重，超聲提取30分鐘，放冷，用25%乙腈補足減失的重量，過濾，取續濾液25ml，回收溶劑至近干，殘渣用約50ml水溶解，通過AB-8大孔吸附樹脂柱，規格為內徑I. 5cm，長10cm，分別用氨試液50ml、20%乙醇50ml洗脫，棄去；再用80%乙醇洗脫100ml，收集洗脫液，蒸干，殘渣用25%乙腈溶解，并轉移至IOml量瓶中，加25%乙腈至刻度，搖勻，作為供試品溶液； 對照品溶液的制備精密稱取知母皂苷B II對照品IOmg置IOml量瓶中，加25%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為母液，精密量取Iml母液置IOml量瓶中，加25%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液； 測定法分別精密吸取對照品溶液15rt、30W，供試品溶液15耵，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法對數方程計算，即得。外標兩點法即對照品進樣質量的自然對數與其相應的峰面積的自然對數這兩點做對數方程，將供試品峰面積取自然對數后代人方程從而求得供試品的含量。優選地，該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪340份、生地黃340份、雞血藤340份、桂枝113份、當歸136份、川芎170份、荔枝核170份、知母113份、桑枝113份、徐長卿102份、延胡索91份、麻黃68份、地龍45份。或 黃芪300份、生地黃300份、雞血藤300份、桂枝80份、當歸100份、川彎150份、荔枝核150份、知母80份、桑枝80份、徐長卿80份、延胡索70份、麻黃50份、地龍30份。或 黃芪400份、生地黃400份、雞血藤400份、桂枝120份、當歸150份、川芎200份、荔枝 核200份、知母120份、桑枝120份、徐長卿120份、延胡索120份、麻黃100份、地龍60份。或 黃芪300份、生地黃300份、雞血藤300份、桂枝120份、當歸150份、川芎150份、荔枝核200份、知母120份、桑枝120份、徐長卿120份、延胡索120份、麻黃100份、地龍60份。更優選地，本專利技術中藥組合物的活性成分由下列成分組成 1)黃芪、麻黃、桑枝、延胡索、雞血藤、川芎，分別加8-12倍量50-80%乙醇，回流提取1-3次，提取時間分別為1-3小時，過濾，合并提取液，殘渣棄去，回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至60°C熱測時相對密度I. 02-1. 06的流浸膏； 2)桂枝、當歸、徐長卿，加5-8倍量水，浸泡20-40分鐘，水蒸汽蒸餾法提油時間5-8小時，提取的揮發油； 3)桂枝、當歸、徐長卿提取完揮發油后經過濾的水煎液； 4)生地黃、荔枝核、知母、地龍與桂枝、當歸、徐長卿提取揮發油后的殘渣合并，加8-12倍量水，加熱煎煮1-3次，時間分別為1-3小時，過濾，合并提取液，殘渣棄去，減壓濃縮至60°C熱測時相對密度為I. 20-1. 24的清膏，加95%乙醇至醇濃度50_70%，5_10°C靜置18-36小時，過濾，濾液減壓回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至60°C熱測時相對密度I. 02-1. 06的流浸膏。本專利技術中藥組合物中，原料藥材的拉丁名及其加工方法來自《中藥大辭典》(1977年7月，第一版，上海科學技術出版社)和《中國藥典》(2005年版，化學工業出版社)。本專利技術中藥組合物制劑還可以按常規的制劑工藝，例如，范碧亭《中藥藥劑學》(上海科學出版社1997年12月第I版)記載的制備工藝，制成藥劑學可接受的任意常規劑型，例如膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、散劑、口服液等。本專利技術的應用中，所述中藥組合物為膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、散劑、口服液制劑中的一種，為使上述劑型能夠實現，需在制備這些劑型時加入藥學可接受的輔料，例如填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉等；潤滑劑包括硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括甜味劑及各種香精；防腐劑包括尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質包括PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。為使上述劑型能夠實現中藥藥劑學，需在制備這些劑型時加入藥學可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑學》，上海科學出版社1997年12月第I版中各劑型記載的輔料)。或者，本專利技術制劑優選通過以下制備方法制成 原料藥重量比例 黃芪300-400份、生地黃300-400份、雞血藤300-400份、桂枝80-120份、當歸100-150份、川芎150-200份、荔枝核150-200份、知母80-120份、桑枝80-120份、徐長卿80-120份、延胡索70-120份、麻黃50-100份、地龍30-60份； 制備方法 1)取方中藥材，分別凈選，粗碎為約5-10mm顆粒，按比例稱量； 2)按比例稱取黃芪、麻黃、桑枝、延胡索、雞血藤、川芎，分別加8-12倍量50-80%乙醇本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種中藥組合物中知母皂苷BⅡ的含量測定方法，該中藥組合物是由如下重量份的原料藥制成的：黃芪300？400份、生地黃300？400份、雞血藤300？400份、桂枝80？120份、當歸100？150份、川芎150？200份、荔枝核150？200份、知母80？120份、桑枝80？120份、徐長卿80？120份、延胡索70？120份、麻黃50？100份、地龍30？60？份，其特征在于該方法采用高效液相色譜法，色譜條件和測定法如下：色譜條件：色譜柱C18，規格為4.6mm×250mm，5μm；流動相為乙腈：水？24:76；蒸發光散射檢測器漂移管溫度為75℃，加熱級別為66%，載氣流速為25psi，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min，理論塔板數以知母皂苷BⅡ計不少于6000；供試品溶液的制備：取上述中藥組合物制劑內容物或研細的粉末2.0？g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入25%乙腈50ml，稱重，超聲提取30分鐘，放冷，用25%乙腈補足減失的重量，過濾，取續濾液25ml，回收溶劑至近干，殘渣用約50ml水溶解，通過AB？8大孔吸附樹脂柱，規格為內徑1.5cm，長10cm，分別用氨試液50ml、20%乙醇50ml洗脫，棄去；再用80%乙醇洗脫100ml，收集洗脫液，蒸干，殘渣用25%乙腈溶解，并轉移至10？ml量瓶中，加25%乙腈至刻度，搖勻，作為供試品溶液；對照品溶液的制備：精密稱取知母皂苷BⅡ對照品10mg置10ml量瓶中，加25%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為母液，精密量取1ml？母液置10ml量瓶中，加25%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；測定法：分別精密吸取對照品溶液15μl、30μl，供試品溶液15μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法對數方程計算，即得。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：王貴金，裴彩云，賈繼明，鄭亞杰，宋劍，
申請(專利權)人：河北以嶺醫藥研究院有限公司，
類型：發明
國別省市：