本發(fā)明專利技術(shù)涉及具有對(duì)(a)CD123；(b)CD16和(c)CD33結(jié)合特異性的分子。本發(fā)明專利技術(shù)進(jìn)一步涉及本發(fā)明專利技術(shù)的分子，其中所述分子包括第一免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與VH結(jié)構(gòu)域連接的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD123特異性結(jié)合；第二免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與VH結(jié)構(gòu)域連接的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD16特異性結(jié)合；和第三免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與VH結(jié)構(gòu)域連接的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD33特異性結(jié)合。本發(fā)明專利技術(shù)更進(jìn)一步涉及編碼本發(fā)明專利技術(shù)分子的核酸分子。另外，本發(fā)明專利技術(shù)涉及診斷和藥物組合物以及本發(fā)明專利技術(shù)的分子或核酸分子在治療急性骨髓性白血病和/或骨髓增生異常綜合征中的應(yīng)用。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】對(duì)急性骨髓性白血病的三特異性療法本專利技術(shù)涉及對(duì)(a)⑶123 ;(b)⑶16和(C)⑶33具有結(jié)合特異性的分子。本專利技術(shù)進(jìn)一步涉及本專利技術(shù)的分子，其中所述分子包括第一免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與Vh結(jié)構(gòu)域連接的'結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD123特異性結(jié)合；第二免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與Vh結(jié)構(gòu)域連接的\結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD16特異性結(jié)合；和第三免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，其包括與Vh結(jié)構(gòu)域連接的\結(jié)構(gòu)域，其中所述免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域與CD33特異性結(jié)合。本專利技術(shù)更進(jìn)一步涉及編碼本專利技術(shù)分子的核酸分子。另外，本專利技術(shù)涉及本專利技術(shù)所述分子或所述核酸分子的診斷和藥物組合物以及其在治療急性骨髓性白血病和/或骨髓增生異常綜合征中的應(yīng)用。、在該說明書中，引用了包括專利申請(qǐng)和制造商手冊(cè)在內(nèi)的許多文件。這些文件的公開內(nèi)容，盡管認(rèn)為不與本專利技術(shù)的專利性相關(guān)，但是通過引用以它們的整體并入這里。更具體而言，所有參考的文件通過引用被并入的程度如同具體且單個(gè)指明每個(gè)單個(gè)文件通過引用并入一樣。急性骨髓性白血病(AML)是第二最常見的急性白血病，在美國每年約13，300新發(fā)病例和8，800的年死亡數(shù)(Jemal等，2008)。白血病的通常應(yīng)用的療法包括放射和/或化學(xué)療法。此外，在某些情況下，骨髓移植的另外可能性被認(rèn)為是合適的。但是，這些療法對(duì)患者是相對(duì)有毒的并且通常不產(chǎn)生疾病的完全治愈。因此，雖然對(duì)于接受化學(xué)療法的所有患者的65-80%可實(shí)現(xiàn)完全緩解(Cros等,2004, Kern和Estey 2006),但是這些患者的大部分復(fù)發(fā)(Cros等，2004)。在常規(guī)化學(xué)療法初始病程之后的緩解階段中，患者骨髓中的胚細(xì)胞計(jì)數(shù)減少到總骨髓白細(xì)胞的約5%或更少，并且從化學(xué)療法幸存的細(xì)胞被稱為“最小殘留病(輕微后遺癥，minimal residual disease)” (MRD)細(xì)胞。這些細(xì)胞富集在AML白血病干細(xì)胞(AML-LSC)中，其尤其抗化學(xué)療法，并且它們構(gòu)成能夠再擴(kuò)張并造成復(fù)發(fā)的特別危險(xiǎn)的細(xì)胞庫(reservoir of cell)。對(duì)于急性骨髓性白血病，白血病干細(xì)胞已經(jīng)尤其良好地得到表征(Lapidot 等，1994, Bonnet 和 Dick 1997, Hope 等，2004)。AML-LSC 表達(dá)細(xì)胞表面抗原的特征集合，包括⑶123、C型凝集素類分子-I (CLL-I)、⑶44、⑶33等等且用于AML 病例 CD96 亞組(Jordan 等，2000, Bakker 等，2004, Jin 等,2006, Hauswirth 等，2007,Hosen等,2007,Misaghian等,2009)。這些特異細(xì)胞展示獨(dú)特的生物性質(zhì),包括很少進(jìn)入細(xì)胞循環(huán)、自我更新潛能和增強(qiáng)的對(duì)化學(xué)治療劑和DNA損傷的抗性。因此，它們可能明顯有助于最小殘留病(MRD)細(xì)胞種群并且是常規(guī)治療的AML-患者復(fù)發(fā)的原因(Ravandi和Estrov2006)。小于60歲并且接受標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)療法的患者4年無病生存率僅達(dá)到約40%。此外，超過60歲的患者具有差的預(yù)后，僅具有10%至15%的4年無病生存率(Mayer等，1994，Gardin等，2007)。AML患者的這種高復(fù)發(fā)率和年老患者差的預(yù)后突出了對(duì)優(yōu)先靶向AML-LSC的新療法的急切需要。FDA批準(zhǔn)的用于治療AML的藥物是吉妥單抗(Gemtuzumab Ozogamicin) (G0,Mylotarg ，Wyeth，Madison，NJ，USA)，其是CD33特異性藥物。該藥劑的使用限于第一次復(fù)發(fā)超過60歲的患者并限于對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)療法有抗性的患者(Bross等，2001，Sievers 2001)。GO由與細(xì)胞毒劑加里剎霉素(calicheamicin)化學(xué)偶聯(lián)的人源化抗CD33 IgG抗體組成(Hamann等，2002)。在II期臨床試驗(yàn)中，30%復(fù)發(fā)的AML患者對(duì)GO響應(yīng)(Sievers 2001，Larson等，2002)。但是，發(fā)現(xiàn)副作用包括肝靜脈閉塞性疾病、肺毒性和嚴(yán)重的超敏反應(yīng)。此夕卜，體外研究揭示了對(duì)⑶33陰性細(xì)胞系的抗原非依賴性細(xì)胞毒性(Bross等，2001，Jedema等，2004, Schwemmlein 等，2006)。在過去，已經(jīng)使用不同的方法開發(fā)具有改善的抗腫瘤活性的非結(jié)合單克隆抗體。這些方法之一是通過各種方法產(chǎn)生雙特異性抗體。一般而言，這些分子由針對(duì)腫瘤細(xì)胞上的靶抗原的一種結(jié)合位點(diǎn)和針對(duì)效應(yīng)細(xì)胞上的激活觸發(fā)分子——比如T細(xì)胞上的CD3，天然殺傷(NK)細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上的CD16 (Fcy RIII)，嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞上的⑶89 (Fe a RI)和⑶64 (Fe y RI)，和樹枝狀細(xì)胞上的DEC-205——的第二結(jié)合位點(diǎn)組成(Peipp和Valerius 2002, Wang等,2005)。除了優(yōu)選的效應(yīng)細(xì)胞群的特異性募集之外，當(dāng)所選擇的針對(duì)效應(yīng)細(xì)胞上觸發(fā)分子的結(jié)合位點(diǎn)不與Fe結(jié)合表位重疊時(shí)，雙特異性抗體避免與內(nèi)源性免疫球蛋白G(IgG)競爭。另外，單鏈Fv片段代替全長免疫球蛋白的使用防止分子結(jié)合至非細(xì)胞毒素細(xì)胞上的Fe受體，比如血小板和B細(xì)胞上的Fe YRII ;結(jié)合至不激活細(xì)胞毒素細(xì)胞的Fe受體，其包括多形核白細(xì)胞(PMN)上的Fe Y RIIIb ;和結(jié)合至抑制性的Fe-受體，比如單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞上的Fe y RIIb (Daeron 1997)。許多雙特異性單鏈Fv (bsscFv)融合蛋白是本領(lǐng)域已知的，其具有對(duì)白血病源的細(xì)胞的溶細(xì)胞活性，包括抗⑶19和⑶16的雙特異性雙抗體(Kipriyanov等，2002)、抗⑶19和0)16的串聯(lián)bsscFvs (Bruenke等,2005)和II類人白細(xì)胞抗原和Q)16 (Bruenke等，2004)。這些蛋白質(zhì)募集CD16陽性NK-細(xì)胞和單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，這是兩種重要的體內(nèi)效應(yīng)細(xì)胞群(Uchida等，2004)。包括MCSP (黑素瘤相關(guān)的硫酸軟骨素蛋白聚 糖)XCD28(0tz等，2009)以及CD19XCD3 (Bargou等，2008)構(gòu)建體的另一組分子募集溶細(xì)胞T細(xì)胞作為效應(yīng)器。⑶19 X⑶3分子是第一個(gè)已經(jīng)在I期臨床和正在進(jìn)行的II期研究中產(chǎn)生有希望的結(jié)果(Nagorsen等,2009)的重組雙特異性單鏈Fv。雖然bsscFvs和一些可選形式提供明顯的優(yōu)勢，但是它們?nèi)孕枰M(jìn)一步的改進(jìn)。決定雙特異性蛋白質(zhì)治療效果的關(guān)鍵參數(shù)是親和性、效價(jià)、穩(wěn)定性和尺寸。由于在轉(zhuǎn)化為重組scFV形式期間招致的損失，許多scFv片段展示比相應(yīng)親本單克隆抗體(mAbs)更低的親和性(Huston等，1988)。而且，由于解折疊和聚集的趨勢，scFvs常常顯示特征性降低的熱穩(wěn)定性，其是藥物批準(zhǔn)和臨床應(yīng)用的考慮因素(Willuda等，1999)。另外，最簡單形式的bsscFvs由通過約10至20個(gè)氨基酸的柔性連接體連接的兩個(gè)scFvs組成,其具有僅約50至60kDa的相對(duì)分子量(Mr)，并且Mr < 65kDa的蛋白質(zhì)被迅速地通過腎從血流中清除(Kipriyanov 等，1999,Huhalov 和 Chester 2004)。最后，因?yàn)?bsscFvs 缺乏 Fe 部分，所以本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：G·H·費(fèi)伊，C·斯坦因，C·凱爾納，M·庫勒，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：埃爾朗根紐倫堡弗里德里希·亞歷山大大學(xué)，G·H·費(fèi)伊，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。