本發明專利技術公開了苯并噻二唑結合羅倫隱球酵母防治水果采后病害的方法，屬于水果采后病害生物防治領域。將羅倫隱球酵母(Cryptococcuslaurentii)活化，接種到NYDB培養基中培養24h，離心得到菌體，將菌體用0.1g/l的苯并噻二唑稀釋制備成5×108個/mL的菌懸液；將菌懸液均勻噴灑于水果上，自然風干；放在塑料筐中，用保鮮膜密封后，放在室溫條件下存放。本發明專利技術利用苯并噻二唑和羅倫隱球酵母結合使用提高其對水果采后病害生物防治的效力，使用簡單，操作方便，效果好，成本低。其結合使用可以替代化學殺菌劑防治水果采后病害，避免使用化學殺菌劑對人的危害，具有顯著的經濟效益和社會效益。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種苯并噻二唑和羅倫隱球酵母(jCryptococcus IaurentiI)結合使用對水果采后病害生物防治的方法，屬于水果采后病害生物防治領域。
技術介紹
水果在采摘、運銷、儲藏過程中因腐爛造成的損失是巨大的，也是全球關注的問題。據報道，在發達國家有10% - 30%的新鮮產品由于采后病害導致腐爛，而在缺乏貯運冷藏設備的發展中國家，果實采后腐爛率則高達40% — 50%。國外水果貯藏保鮮量占水果總產量60%以上，目前我國果品貯藏量800多萬噸，不到總量的15%，其中冷藏庫和氣調庫的貯藏量為70萬噸，僅占總產量的7%。我國水果采后損失一般在20% - 30%,高者甚至達到50%。2007年3月國家統計局發布的《中華人民共和國2006年國民經濟和社會發展統計公報》顯示，2006年我國水果總產量達17050萬噸。據此估算，我國水果采后的損失每年將達·到數百億元人民幣的水平。水果腐爛的主要原因在于病原微生物的致病作用，這些病原微生物主要有灰葡11 {Bo try tis cinerea ) >(.Rhizopus s toloniger ) > (.PeniciIlium spp.)、毛霉 iMucor spp.)、鏈格孢(Alterimriei spp.)、曲霉(AspergiIlus spp.)和軟腐細菌(.Erwinia #.)等。病原微生物對采后水果的危害不僅在于其導致水果在數量上造成的嚴重損失，而且由于許多病原真菌能分泌產生許多次生代謝產物從而引起嚴重的食品安全問題，如擴展青霉(A ezpa/75 )產生的棒曲霉素(patulin)、灰葡萄孢(漢ciflerea )產生的葡雙醒霉素(botrydial)等。目前最常用的控制水果采后腐爛的方法是低溫貯藏和化學殺菌劑處理。近年來低溫貯藏技術在我國得到了廣泛的發展和應用，但已有的冷藏設備往往不能滿足大多數水果的需要。同時，在低溫條件下仍有相當數量的致病菌能夠在水果上生長，并造成水果腐爛。例如，能引起多種水果灰霉病的灰葡萄孢{Botryris cinerea),也稱灰霉菌,在-O. 5°C時也能生長繁殖，引起許多水果腐爛變質，造成嚴重經濟損失。而那些對低溫敏感的水果，因只能在不低于使產品受冷害的溫度下貯藏，病原物的生長、繁殖不能得到有效地抑制，腐爛相當嚴重。長期以來，控制水果采后病害的主要措施是使用殺菌劑。化學殺菌劑對防治病害可以起到立竿見影的效果，但是，化學殺菌劑長期和大量的使用，不僅導致病原微生物產生抗藥性，同時嚴重污染環境，有損于人類健康。美國國家科學院(National Academy ofScinces)的一份報告顯示，在用于處理食品的全部農藥中，殺菌劑構成60%的致癌危險。隨著國家經濟發展和消費水平的提高，人們對食品安全和環境保護意識的日益增強，目前多種化學殺菌劑(如CaptaruBenomyl等)已被明令禁止使用或者在部分水果產品上限制使用，其直接的后果是目前許多水果采后病害已經沒有殺菌劑能予以控制。因此，各國科學家都在積極地探索能代替化學殺菌劑的安全、高效的新型水果采后病害防治方法。當前國際上對用拮抗微生物進行水果采后病害的生物防治的研究已經取得了階段性的成果，并認為這是最有希望取代化學殺菌劑的方法之一。隨著酵母分類、生態、生理、生物化學和分子生物學的研究取得進展，人們對果蔬貯藏中利用酵母的興趣日益提高。國內外的研究表明，許多酵母菌應用于水果表面，可以防治水果由致病霉菌引起的病害，這些酵母被稱為拮抗酵母。酵母菌遺傳穩定，抑菌譜廣、效價高，一般不產生對人和寄主植物有害的代謝產物，安全性高，且對營養要求低，生長快，并對多種脅迫、逆境具有較強的耐受力，對大多數殺菌劑不敏感，對其它化學和物理處理能夠相容。因此近年來拮抗酵母作為水果采后病害生防菌，受到國際上的廣泛關注。國外方面，Sansone等從蘋果表面分離得到的粘紅酵母對由沒otryiis cinerea引起的灰霉病有顯著的防治效果，在實驗室條件下，其腐爛率與對照相比降低了 54%。Calvente等的研究也發現粘紅酵母對水果采后青霉病害有顯著的抑制效果。我國水果采后病害生物防治研究起步較晚，鄭曉冬等在體外和體內抑菌試驗中研究了粘紅酵母對由指狀青霉引起的柑桔青霉腐爛的抑制效果，發現粘紅酵母在控制由指狀青霉引起的柑桔腐爛中顯示出了很高的抑菌活性，在25°C條件下，對照的發病率為100%，而使用I X IO8個/ml的菌懸液的發病率僅為45 %，而且隨著酵母濃度的提高，發病率也有逐漸下降的趨勢。張紅印等研究了粘紅酵母對草莓采后灰霉病的抑制效果，對草莓進行了前期的預處理后，接種I X IO9個/ml的菌懸液和I X IO5個/ml的病·原菌孢子菌懸液，分別在4°C下貯藏7天和20°C下貯藏2天后，發現接種粘紅酵母的草莓，其腐爛率與對照相比分別降低了 95%和94.7 %。范青(2001)等對果實病害生物防治拮抗菌進行了篩選和分離，結果表明季也蒙假絲酵母{Candida guiIiermondii) > τ樣形克勒克酵母iKloeckeim、漢遜德巴利酵母{Debaryomyces hansenii)對甜櫻桃褐腐病都表現出顯著的抑制效果，季也蒙假絲酵母和檸檬形克勒克酵母能有效地防治核果類果實軟腐??；Tian等(2004)的研究表明，在甜櫻桃采前噴灑I X IO8個/mL的絲抱酵母{Trichosporon ,羅倫隱球酵母{Cryptococcus laurentif)和紅酵母{Rhodotorula glut inis),分別在25°C, 0°C以及氣調忙藏下，絲孢酵母對甜樓桃采后病害具有顯著的抑制效果；張紅印等(2005)研究了不同溫度下，羅倫隱球酵母對灰霉病的防治效果，結果表明，25°C下，經羅倫隱球酵母處理的梨果，其灰霉病的發病率為16. 7%，顯著地低于對照；羅倫隱球酵母結合CaCl2使用效果更顯著。從國內外文獻中可知當前以有效微生物取代化學殺菌劑用于采后水果病害的防治已顯示出巨大的應用前景，水果采后病害的生物防治成為一個新的研究熱點。但到目前為止，已實際應用于生產的拮抗菌種類不多，只有Biosave和Aspire等少數幾種產品上市，而我國目前尚沒有拮抗菌應用于實際生產。主要原因在于商業生產條件下，目前已報道的拮抗微生物的防治效果往往不如化學殺菌劑的效果，從而達不到保鮮要求。這些因素影響了拮抗菌作為果蔬保鮮劑在生產中的使用。為了盡快地將拮抗微生物應用于水果貯藏保鮮實際生產，還需進一步篩選拮抗效果好、抗病譜廣的微生物，并進一步提高拮抗酵母的拮抗效力，從而將其應用于水果貯藏保鮮。苯并噻二唑(2，1，3-Benzothiadiazole，BTH)，化學名稱為2，1，3-苯并噻二唑，是水楊酸的結構類似物，水楊酸是植物抗病反應的信號分子和誘導植物對非生物逆境反應的抗逆信號分子。BTH是一種典型的植物抗病誘導劑，離體條件下無殺菌活性，但能夠誘導植物的免疫活性，活化物體內的防御機制，激發抗病蛋白的產生，誘導抗病性。近年來的研究發現，苯并噻二唑(BTH)具有廣譜的誘抗活性，可誘導多種植物對細菌、真菌和病毒等產生抗性。近年來，BTH功能的研究已經成為生物學最重要、本文檔來自技高網...
【技術保護點】
苯并噻二唑(BTH)結合羅倫隱球酵母使用防治水果采后病害的方法，其特征在于按照下述步驟進行：將羅倫隱球酵母活化，用NYDB培養基培養羅倫隱球酵母，離心得到菌體,配制含苯并噻二唑0.1g/l的酵母濃度為5×108菌懸液；將菌懸液均勻噴灑在水果上，自然風干；放在塑料筐中，用保鮮膜密封后，放在室溫條件下存放。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：張紅印，孫瑜，任曉鋒，
申請(專利權)人：江蘇大學，
類型：發明
國別省市：
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