本發明專利技術屬于分子生物學領域，涉及一種分子標記，具體的，涉及一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記，該分子標記含有Seq?ID?No.1所示序列。本發明專利技術還涉及擴增該分子標記的引物、該分子標記和引物在谷子育性基因定位或谷子遺傳育種中的用途，以及一種谷子育種方法。本發明專利技術的分子標記將基因組DNA序列與谷子育性基因聯系起來，有利于谷子分子標記輔助育種體系的建立；所述分子標記與谷子育性基因的遺傳緊密連鎖距離為3.5cM。本發明專利技術的分子標記及分子標記擴增引物可以簡便、快速、高通量地應用于谷子育種實踐和資源及品種鑒定。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于分子生物學領域，涉及一種分子標記，特別是涉及一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記。本專利技術還涉及擴增該分子標記的引物、該分子標記和引物在谷子育性基因定位或谷子遺傳育種中的用途。
技術介紹
我國是谷子(Setaria italica L. Beauv.)的原產國，是世界上谷子的集中種植國，谷子在我國的國民經濟和社會生產中占有重要的地位，對旱作生態農業建設有重要意義。因此，加速谷子的育種進程尤為重要。由于谷子只是區域重要性作物，因此當前有關谷子的研究手段和方法相對較落后，如何應用先進科學的研究手段搞好谷子育種是一個嚴峻的問題。隨著分子生物學的發展，分子標記技術的出現，為谷子的遺傳研究及育種開辟了新的思路和手段。開發具有我國特色的重要性狀基因的分子標記并進行輔助選擇育種研究， 將對提高我國谷子育種水平起到促進作用。谷子是最節水的谷類作物，用水量僅為玉米的1/2-2/3，是我國西部干旱地區和貧瘠山區解決糧食問題唯一現實的選擇。在耕地資源不斷減少、水資源日益短缺、平衡膳食熱逐漸升溫、畜牧業不斷發展的形勢下，大力推進谷子產業既能增加糧食產出、促進畜牧業發展，又能推廣節水農業、帶動相關產業發展，一舉多得，社會效益顯著。谷子是典型的自花授粉作物，谷子的育性與否與谷子的育種關系密切，直接影響到谷子的育種工作。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記。本專利技術的另一目的是提供一種可用于PCR擴增與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記的引物對，以及由該引物對擴增獲得的分子標記。本專利技術的再一目的是提供上述分子標記在谷子育性基因定位、檢測以及谷子輔助育種中的用途以及上述分子標記的檢測方法。本專利技術的目的還包括提供一種包括上述分子標記的載體，以及含有該載體的重組細胞；提供一種包括使用上述分子標記的谷子育性基因的定位方法，和使用所述分子標記的谷子輔助育種方法。為了實現上述目的，本專利技術采用了以下技術方案本專利技術公開了一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記，所述分子標記含有SeqID No. I所示序列；優選的所述分子標記具有Seq ID No. I所示序列。需要指出的是,所述育性基因指谷子自交能夠結實的基因，即含有該基因的谷子樣本植株全穗籽粒均可育，可進行自花授粉。本專利技術還公開了一種擴增與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記的引物對，所述引物對的引物I含有Seq ID No. 2所示序列，引物2含有Seq ID No. 3所示序列；優選的所述引物I具有Seq ID No. 2所不序列，引物2具有Seq ID No. 3所不序列；Seq ID No. 2 :5’ -GATCAGCTTTGTACCCAGCT-3’ ；Seq ID No. 3 :5，-GGACCGTGCTGGAGCATGTT-3’本專利技術還公開了一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記，所述分子標記是由上述的引物對以育性的谷子基因組DNA為模板經PCR擴增得到的。優選的由上述引物對擴增得到的分子標記含有Seq ID No. I所示序列。在本專利技術的一個實施方案中，所述分子標記(含有Seq ID No. I所示核苷酸序列的DNA片段)為谷子基因組中Seq ID No. I所示核苷酸序列的DNA片段，即所包含的SeqID No. I的5’端和/或3’端以外的核苷酸序列也是谷子基因組中的序列，優選的，為谷子基因組中Seq ID No. I的5’端和/或3’端的上下游序列。本領域技術人員可以理解，只 要擴增或者檢測育性的谷子基因組DNA中的該分子標記，必然能夠檢測或擴增到含有SeqID No. I所示的序列。Seq ID No. I的5’端和/或3’端的上下游序列的長度為適當長度，并不特別限定，例如，滿足分子標記的長度小于10，OOObp、小于5，OOObp、小于2，OOObp、小于 I, 500bp、小于 I, 200bp、小于 I, OOObp、或者小于 800bp。在本專利技術的一個實施方案中，所述分子標記(含有Seq ID No. I所示核苷酸序列的DNA片段)所包含的Seq ID No. I的5’端和/或3’端可操作地連接有人工序列和/或控制序列，例如啟動子、增強子、終止子、酶切位點、引物序列等等。其中，術語“可操作地”在本專利技術中定義為一種如下構象，在該構象中，控制序列例如啟動子被適當地置于Seq IDNo. I的一個位置上，以致該控制序列指導Seq ID No. I編碼的多肽的產生。本專利技術還公開了一種重組載體，其含有本專利技術的分子標記。所述重組載體可以是插入有本專利技術的分子標記的表達載體或者克隆載體。獲得上述重組載體后，本領域技術人員可以理解，根據不同的需要，將重組載體轉化到合適的細胞中，得到含有該重組載體的重組細胞。因此，本專利技術還公開了一種含有所述重組載體的重組細胞。本專利技術還公開了本專利技術的分子標記的制備方法，包括下述步驟使用育性的谷子的基因組DNA作為模板，以上述引物對進行PCR擴增，得到的661bp擴增產物即含有所述分子標記；優選地，還包括將PCR擴增產物進行純化的步驟。對本領域技術人員而言，可以理解，也可以DNA化學合成的方法得到本專利技術的分子標記。本專利技術還公開了所述分子標記的檢測方法，包括步驟根據上述分子標記的核苷酸序列設計引物，以被檢測谷子基因組DNA為模板進行擴增，并判斷擴增產物中是否存在該分子標記。優選的，所述引物為上述分別含有Seq ID No. 2和Seq ID No. 3的引物對。例如，可以以被檢測谷子的基因組DNA為模板，以上述引物(Seq ID No. 2和SeqID No. 3)進行PCR擴增，得到擴增產物?？梢詫⒌玫降臄U增產物進行測序或者凝膠電泳。本專利技術還公開了所述的分子標記在谷子育性基因定位或檢測中的用途。本專利技術還公開了一種谷子育性基因定位的方法，所述方法包括使用本專利技術的分子標記的步驟。本專利技術還公開了所述的分子標記在谷子輔助育種中的用途。本專利技術還公開了一種谷子輔助育種方法，所述方法包括檢測本專利技術的分子標記或使用本專利技術中擴增分子標記的引物對的步驟。本專利技術的分子標記可用于今后的分子標記輔助育種中，本領域技術人員可以理解，比如通過檢測是否存在本專利技術的分子標記來篩選谷子是否含有控制育性的基因(例如，可以參考，DNA分子標記在小麥抗病育種中的用途，隴東學院學報(自然科學版)，2006年4月第16卷第I期，P65-69)。所述檢測可以是PCR檢測的方法，具體地，可以使用上述的本專利技術的擴增分子標記的引物對。所述檢測還可以通過測序方法進行。該谷子輔助育種方法具有簡便、快速、高通量的優點。在本專利技術中，具體地，所述谷子可以為張谷I號、谷子A2不育系、張雜谷3號、或張雜谷3號自交產生的F2代。其中，張谷I號、張雜谷3號或張雜谷3號自交產生的部分F2代的表現型與父本張谷I號相同；谷子A2不育系、張雜谷3號自交產生的部分F2代與母本谷子A2不育系的表現型相同。由于采用以上技術方案，使本專利技術具備的有益效果在于本專利技術提供了與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記，該分子標記將基因組DNA序列與谷子育性基因聯系起來，有利于谷子分子標記輔助育種體系的建立；所述分子標記與 谷子育性基因的遺傳緊密連鎖距離為3. 5cM。本專利技術的分子標記及分子標記擴增引物可以簡便、快速、本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種與谷子育性基因緊密連鎖的分子標記，其特征在于：所述分子標記含有Seq？ID？No.1所示序列；優選的，所述分子標記為Seq？ID？No.1所示序列。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：張耕耘，全志武，夏秋菊，彭小華，
申請(專利權)人：深圳華大基因科技有限公司，深圳華大基因研究院，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。