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    來自于稀脈萍的新的脂加氧酶制造技術(shù)

    技術(shù)編號:8048978 閱讀:222 留言:0更新日期:2012-12-07 01:41
    本發(fā)明專利技術(shù)提供來自于稀脈萍SH株及稀脈萍441株的具有9位生成物特異性的高活性型的新的脂加氧酶cDNA,以及由該cDNA編碼的蛋白質(zhì)。

    【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
    【國外來華專利技術(shù)】
    本專利技術(shù)涉及來自于稀脈萍的新的高活性型9位生成物特異性脂加氧酶基因、使用該脂加氧酶基因的高活性型9位生成物特異性脂加氧酶的制造方法、以及該脂加氧酶基因的表達產(chǎn)物。
    技術(shù)介紹
    脂加氧酶是具有在亞油酸、亞麻酸(碳數(shù)18)或花生四烯酸(碳數(shù)20)等的具有1,4-戊二烯結(jié)構(gòu)的不飽和脂肪酸中直接導入分子狀氧,生成氫過氧基(-00H)的活性的酶,已知存在于植物以及動物、霉菌、酵母等真核微生物等中(內(nèi)山充等,過酸化脂質(zhì)i生體(過氧化脂質(zhì)與生物體),23-26,1985,學會出版力> 夕一)。在動物中,該酶參與由花生四烯酸生成前列腺素的過程,因此研究進展最多(山本尚三,蛋白質(zhì)核酸酵素(蛋白質(zhì)核酸酶),44,1132-1138,1999)。對于植物的脂加氧酶,以α -亞麻酸、亞油酸等的碳數(shù)18的不 飽和脂肪酸為底物,已知可分類為在9位與13位的2個部位顯示特異性的酶(例如,內(nèi)山充等,過酸化脂質(zhì)i生體(過氧化脂質(zhì)與生物體),23-26,1985,學會出版七 > 夕一 ;Grechkin等,Eur. J. Biochem. , 199,451-457,1991)。9位及13位特異的脂加氧酶,已知存在于馬鈴薯、大豆、西紅柿、豌豆、大麥、小麥、玉米、黃瓜等中,還分離出了幾種cDNA。但是,主要研究的是與作為植物激素受到關(guān)注的茉莉酸的代謝途徑相關(guān)的13位生成物特異性脂加氧酶,對于9位生成物特異性脂加氧酶的研究比較少。作為試劑,來自于大豆的13位生成物特異性脂加氧酶由 I社市售( I社,制品號L7395),9位生成物特異性脂加氧酶沒有市隹口 ο本專利技術(shù)者們,在本申請前,發(fā)現(xiàn)具有花芽形成促進作用、植物激活作用及包含它們的植物生長調(diào)節(jié)作用的具有以下的結(jié)構(gòu)的α-酮醇不飽和脂肪酸(以下,稱為K0DA),/WWYYVWxc00HOOH已知KODA是通過9位生成物特異性脂加氧酶及丙二烯氧化物合酶由α-亞麻酸衍生的(日本特開平9-295908號公報、日本特開平11-29410號公報、日本特開2001-131006號公報及日本特開2009-17829號公報)。權(quán)利要求1.一種基因,其包含選自以下的(a) (e)的DNA: (a)包含序列號I所不的喊基序列的DNA; (b)編碼包含序列號2所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)的DNA; (c)編碼包含與序列號2所示的氨基酸序列具有至少99%的同一性的序列,且具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì)的DNA ; (d)編碼包含在序列號2所示的氨基酸序列中缺失、取代或添加了I或數(shù)個氨基酸的氨基酸序列,且具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì)的DNA ;及 (e)與含有包含序列號I所不的喊基序列的DNA的互補喊基序列的DNA在聞嚴格的條件下雜交,且編碼具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì)的DNA。2.一種表達載體,其是使權(quán)利要求I所述的DNA與載體片段結(jié)合而成的。3.一種轉(zhuǎn)化體,其是將權(quán)利要求2所述的表達載體導入成為宿主的微生物、動物細胞或植物細胞而成的。4.一種9位生成物特異性脂加氧酶的制造方法,其特征在于,培養(yǎng)權(quán)利要求3所述的轉(zhuǎn)化體。5.一種蛋白質(zhì),其是選自以下的(a) ⑷的蛋白質(zhì) (a)包含序列號2所不的氣基酸序列的蛋白質(zhì); (b)包含在序列號2所示的氨基酸序列中缺失、取代或添加了I或數(shù)個氨基酸的氨基酸序列,且具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì); (c)包含與序列號2所示的氨基酸序列具有至少99%的同一性的序列,且具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì);及 (d)由與含有包含序列號I所示的堿基序列的DNA的互補堿基序列的DNA在高嚴格的條件下雜交的多核苷酸編碼,且具有9位生成物特異性脂加氧酶活性的蛋白質(zhì)。全文摘要本專利技術(shù)提供來自于稀脈萍SH株及稀脈萍441株的具有9位生成物特異性的高活性型的新的脂加氧酶cDNA,以及由該cDNA編碼的蛋白質(zhì)。文檔編號C12N1/15GK102812125SQ20118001336公開日2012年12月5日 申請日期2011年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月11日專利技術(shù)者橫山峰幸, 高木一輝, 上地沙理 申請人:株式會社資生堂本文檔來自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護點】

    【技術(shù)特征摘要】
    【國外來華專利技術(shù)】...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:橫山峰幸高木一輝上地沙理
    申請(專利權(quán))人:株式會社資生堂
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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