異種結膜移植片及其制作方法技術

本發明專利技術公開了一種異種結膜移植片，所述異種結膜移植片的原料為去細胞化的牲畜胎盤羊膜。本發明專利技術還公開了一種結膜移植片的制作方法，該方法包括：將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡；將去污劑浸泡后的牲畜胎盤羊膜在胰蛋白酶抑制劑中浸泡；將所述抑制劑中浸泡后的牲畜胎盤羊膜在非離子型表面活性劑中浸泡。本發明專利技術的結膜移植片能夠替代人胎盤羊膜制成的結膜移植片，其原料不受供體限制，來源廣泛，成本低。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及生物醫學
，特別涉及一種。
技術介紹
在眼科治療眼表表面創傷的結膜重建手術中，會遇到酸堿化學燒傷和熱燒傷、眼球粘連、翼狀胬肉等眼病，需要用使用結膜移植片加以覆蓋治療。現有的結膜移植片大多以人的胎盤羊膜或唇粘膜為材料，通過將人胎盤羊膜或唇粘膜在酒精中浸泡一定時間，將人胎盤羊膜中的細胞組織破壞，即去細胞化，之后將浸泡酒精后的人胎盤羊膜晾干，制成結膜移植片；使用時將結膜移植片放入生理鹽水中進行復水，使之濕潤柔軟后即可使用于患者眼疾處。然而現有的結膜移植片，由于使用人胎盤羊膜或唇粘膜為原料，原料來源受到供 體限制，成本很高。
技術實現思路
本專利技術提供了一種，原料來源廣泛，成本低。為達上述目的，本專利技術的技術方案具體是這樣實現的—種異種結膜移植片，所述異種結膜移植片的原料為去細胞化的牲畜胎盤羊膜。優選地，所述去細胞化的牲畜胎盤羊膜厚度為O. Γ0. 5毫米。一種異種結膜移植片的制作方法，該方法包括將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡；將去污劑浸泡后的牲畜胎盤羊膜在胰蛋白酶抑制劑中浸泡；將所述抑制劑中浸泡后的牲畜胎盤羊膜在非離子型表面活性劑中浸泡。優選地，所述將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡之前，該方法進一步包括將牲畜新鮮的胎盤通過剝離子剝離海綿層組織，得到牲畜胎盤羊膜。優選地，所述在非離子型表面活性劑中浸泡之后，該方法進一步包括將非離子型表面活性劑中浸泡后的牲畜胎盤羊膜在消毒劑中浸泡。優選地，所述消毒殺菌之后，該方法進一步包括將所述消毒殺菌之后的牲畜胎盤羊膜置于乙醇溶液中保存。優選地，所述使用去污劑進行浸泡，包括使用氯己定浸泡30-40分鐘。優選地，所述在胰蛋白酶抑制劑中浸泡，包括在濃度為O. 29Γ5%的胰蛋白酶溶液中浸泡震蕩1-5小時。優選地，所述在非離子型表面活性劑中浸泡，包括在濃度為O. 5°/Γ2%的聚乙二醇辛基苯基醚溶液中浸泡震蕩2Γ36小時。優選地，所述在消毒劑中浸泡包括在戊二醛溶液中，浸泡20-40分鐘。由上述技術方案可見，本專利技術的這種，利用去細胞化的牲畜胎盤羊膜作為原料，去細胞化的牲畜胎盤羊膜失去細胞活力，只起到支架作用的載體，沒有血管、無細胞、無神經和淋巴管，韌性好，薄，與人眼結膜組織結構相似，不僅能抗感染、防治瘢痕形成、抑制新生血管，而且，還能刺激細胞分化、阻止細胞凋亡，由于其同樣具有抗原性低，控制纖維組織增生和新生血管形成等作用，不僅可以覆蓋創面，減少感染，抑制瘢痕形成以及減少新生血管生成，可代替膠原膜來重建結膜和角膜促進眼表上皮化，減輕炎癥反應，所以能夠替代人胎盤羊膜作為結膜移植片使用。相比人胎盤羊膜，牲畜胎盤羊膜不受供體的限制，材料來源廣泛，成本低。另外，人的胎盤羊膜一般在O. 02-0. 05毫米，比較薄，且在使用時需要復水，復水后的人胎盤羊膜太薄而且無色透明，醫生手術時，在透明的生理鹽水中很難找到該人胎盤羊膜，而以牲畜胎盤羊膜制成異種結膜移植片厚度可以控制在O. 1-0. 5毫米，相比人胎盤羊膜制成的結膜移植片，使手術中的取用操作更方便。而且由于本專利技術的牲畜胎盤羊膜制成后在乙醇中保存，而非晾干，因此無需復水， 使用更加方便。再有，由于人的胎盤羊膜在手術后會很快降解，對于所需恢復期長的患者，修復效果較差，而本專利技術的結膜移植片制作過程中，通過控制牲畜胎盤羊膜在胰蛋白酶抑制劑中浸泡的時間，以及牲畜胎盤羊膜在非離子型表面活性劑中浸泡的時間，可以有效控制結膜移植片的降解時間，在需要時，使其降解時間延長，從而得到更好的修復效果。附圖說明圖I為本專利技術實施例一的結膜移植片制作方法流程圖。圖2為本專利技術實施例二的結膜移植片制作方法流程圖。具體實施例方式為使本專利技術的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下參照附圖并舉實施例，對本專利技術進一步詳細說明。本專利技術實施例的結膜移植片，是以去細胞化的牲畜胎盤羊膜為原料制成，例如牛、羊、豬等的胎盤羊膜，因原材料與人在生物學中屬于不同種類，因此本專利技術實施例的結膜移植片也可以稱為異種結膜移植片。采用牲畜胎盤羊膜為原料制，其原料可以從牛、羊、豬等牲畜中得到，來源非常廣泛，成本低廉。另外，去細胞化的方法任意，可以采用現有成熟的去細胞化(或稱脫細胞)的工藝，使用牲畜胎盤羊膜去細胞化后制成的異種結膜移植片，其厚度一般為O. Γ0. 5毫米，比用人的胎盤羊膜制成的結膜移植片厚，因此在手術操作時更加方便。圖I為本專利技術實施例一的結膜移植片制作方法流程圖，如圖I所示，該方法包括如下步驟步驟101、將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡；本步驟主要是為了破壞牲畜胎盤羊膜的細胞膜脂和脂蛋白，從而將將胎盤羊膜上皮細胞層的上皮細胞和纖維母細胞層的纖維母細胞破壞掉。具體的去污劑可以采用氯己定(別名洗必泰，學名雙氯苯雙胍己烷)或者ASAP洗液抗菌劑等，而牲畜胎盤羊膜可以通過牲畜新鮮的胎盤通過剝離子剝離海綿層組織得到。步驟102、將去污劑浸泡后的牲畜胎盤羊膜在胰蛋白酶抑制劑中浸泡；本步驟主要是為了將細胞膜上的蛋白消化掉，細胞膜就失去細胞的特性了，從而有效地去除組織中的細胞成分，實現去細胞化，去細胞化的具體方式可以采用現有任意方式。步驟103、將所述抑制劑中浸泡后的牲畜胎盤羊膜在非離子型表面活性劑中浸泡。本步驟通過非離子型表面活性劑將細胞進行裂解，從而使細胞喪失活性。具體的非離子型表面活性劑可以采用聚乙二醇辛基苯基醚(C14H22O(C2H4O)n,又稱TritonX-100)等通過上述步驟，即可制成異種結膜移植片，從而代替人胎盤羊膜制成的異種結膜移植片。另外，步驟103之后，還可以進一步對牲畜胎盤羊膜進行消毒殺菌，以增加其使用安全性，例如使用消毒劑進行浸泡。消毒后的牲畜胎盤羊膜可以置于乙醇溶液中保存。圖2為本專利技術實施例二的結膜移植片制作方法流程圖，該實施例以牛胎盤羊膜為原料詳細描述了制作過程，如圖2所示，該方法包括如下步驟步驟201，將牛新鮮的胎盤剝離海綿層組織，得到牛胎盤羊膜；原材料取自牛的新鮮正常的胎盤，沖洗干凈后，用剝離子剝離海綿層組織從而得到牛胎盤羊膜。步驟202，用氯己定浸泡牛胎盤羊膜30-40分鐘。利用氯己定對細胞膜脂和脂蛋白的破壞作用，將羊膜上皮細胞層的上皮細胞和纖維母細胞層的纖維母細胞破壞掉。步驟203，采用胰蛋白酶消化法使牛胎盤羊膜去細胞化。胰蛋白酶抑制劑對細胞核具有水解作用，可以有效地去除組織中的細胞成分。因此本步驟中可以選用O. 2-5%的胰蛋白酶溶液，在37°C溫度下浸泡振蕩1-5小時，從而將牛胎盤羊膜去細胞化。步驟204，將去細胞化的牛胎盤羊膜以O. 5-2%的TritonX-IOO溶液振蕩浸泡24-36小時，進行細胞裂解；經過該處理的牛胎盤羊膜可以保持天然膠原的結構，蛋白結構保持穩定狀態，而經過裂解的細胞將失去活性。步驟205，將細胞裂解后的牛胎盤羊膜進行消毒殺菌；可以通過戊二醛溶液(C5H8O2)浸泡20-40分鐘實現消毒殺菌，其中，戊二醛能與蛋白質發生反應，從而將牛胎盤羊膜的各種微生物殺滅。步驟206，置于乙醇溶液中保存。消毒殺菌后的牛胎盤羊膜可以放置在濃度75%的乙醇溶液中保存。另外，步驟203中，胰蛋白酶溶液的濃度和浸泡時間，以及步驟204中TritonX-IOO溶液的濃度和浸泡時間，可以控制制成的結膜移植片的降解時間，經試驗，胰蛋白酶溶液的濃度和浸本文檔來自技高網...

【技術保護點】
異種結膜移植片，其特征在于，所述異種結膜移植片的原料為去細胞化的牲畜胎盤羊膜。

【技術特征摘要】
1.異種結膜移植片，其特征在于，所述異種結膜移植片的原料為去細胞化的牲畜胎盤羊膜。2.如權利要求I所述的異種結膜移植片，其特征在于，所述去細胞化的牲畜胎盤羊膜厚度為O. Γ0. 5毫米。3.異種結膜移植片的制作方法，其特征在于，該方法包括 將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡； 將去污劑浸泡后的牲畜胎盤羊膜在胰蛋白酶抑制劑中浸泡； 將所述抑制劑中浸泡后的牲畜胎盤羊膜在非離子型表面活性劑中浸泡。4.如權利要求3所述的制作方法，其特征在于，所述將牲畜胎盤羊膜使用去污劑進行浸泡之前，該方法進一步包括 將牲畜新鮮的胎盤剝離海綿層組織，得到牲畜胎盤羊膜。5.如權利要求3所述的制作方法，其特征在于，所述在非離子型表面活性劑中浸泡之后，該方法進一步包括 將非離子型表面活性劑中...

【專利技術屬性】
技術研發人員：于好勇，
申請(專利權)人：于好勇，
類型：發明
國別省市：