本發(fā)明專利技術(shù)提供了用于檢測(cè)油脂中氯丙醇酯的樣品預(yù)處理方法，其特征在于，具體步驟為：取油脂除去甘油三酯后采用高效液相色譜收集油脂中的氯丙醇酯組分，其中，色譜條件為：使用C18色譜柱，分別以乙腈和異丙醇為流動(dòng)相A和流動(dòng)相B，以流速1mL/min等度洗脫，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，流動(dòng)相A和流動(dòng)相B的體積比為5∶5。本發(fā)明專利技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于：能夠通過簡(jiǎn)單的方法對(duì)用于檢測(cè)油脂中氯丙醇酯的樣品進(jìn)行預(yù)處理。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及油脂樣品的預(yù)處理方法，尤其涉及。
技術(shù)介紹
本專利技術(shù)涉及的油脂樣品的預(yù)處理方法是用于檢測(cè)油脂中氯丙醇酯的樣品預(yù)處理。氯丙醇酯是油脂及含油脂食品在熱加工過程中形成的副產(chǎn)物，目前被認(rèn)為是潛在的食品安全危害因子之一。目前文獻(xiàn)報(bào)道的主要采用硅膠柱層析和固相萃取柱萃取兩類。 Zelinkovdi采用娃膠柱層析的方法進(jìn)行乳脂樣品的前處理(Haines, T. D. , et al.,Direct Determination of MCPD Fatty Acid Esters and Glycidyl Fatty Acid Estersin Vegetable Oils by LC-TOFMS. Journal of the American Oil Chemists Society,2011.88(1) :1-14.) :200mg 乳脂中加入 7. 26 μ g 氘代 3-氯丙醇ニ棕櫚酸酷(3-MCPD_d5-l，2-dipalmitate)內(nèi)標(biāo)物，用ImL正己燒溶解后上樣到330X20mm娃膠柱(silica gel60, 70-230mesh ；Merck, Darmstadt, Germany)，用石油醚(沸點(diǎn) 45 65 °C ):こ醚=95 5 (v/v)混合溶劑500mL以4mL/min的速率洗脫，收集含有3-氯丙醇酯的組分，旋蒸后,用200 μ L四氫呋喃溶解,準(zhǔn)備進(jìn)行GC-MS分析。Moravcova從油脂樣品中分離3_氯丙醇ニ酯也采用了娃膠柱層析的方法(Moravcova, E. , et al. , Novel approaches toanalysis of J-chloropropane—l,2—diol esters in vegetable oils.Anal Biana丄Chem, 2012. 402(9) =2871-83.):稱量8±0. Img油樣于2mL小瓶中，用30yL氘代內(nèi)標(biāo)溶液(3-MCPD-d5-l, 2-dipalmitate的こ酸こ酯溶液，濃度300ng/mL)溶解，然后上樣到裝填了I. 8g硅膠(用正己烷こ醚=96 4，v/v混合溶劑溶脹)的180 X 4mm玻璃柱，用30mL正己燒こ醚=96 4, v/v混合溶劑洗脫,流速0. 8mL/min,收集5 25mL的部分(含有3-氯丙醇ニ酯)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溶剤，用200μ L甲醇重新溶解準(zhǔn)備進(jìn)行U-HPLC-MS和DART-MS分析。硅膠柱層析方法的不足之處是整個(gè)預(yù)處理的周期較長，且柱子的裝填效果直接影響樣品預(yù)處理的效果，樣品預(yù)處理結(jié)果的再現(xiàn)性受到很大影響。Moravcova采用了固相萃取柱萃取的方法從油脂樣品中分離3_氯丙醇單酯(Moravcova, E. , et al. , Novel approaches to analysis οι J-cnloropropane-l,2-diol esters in vegetable oils. Anal Bianal Chem,2012. 402 (9) :2871-83.)稱量100 土 Img油樣于2mL小瓶中，用50 μ L正己燒和60 μ L同位素標(biāo)記的標(biāo)準(zhǔn)溶液(3-MCPD-d5-monopalmitate的こ酸こ酯溶液，濃度60ng/mL)溶解，上樣到已用2X2mL正己燒活化好的固相萃取柱(aminopropyl SPE cartridge, 500mg)上，真空條件下，先用8mL正己燒ニ氯甲燒こ醚=89 10 I (v/v/v)混合溶劑洗脫并棄去，接著用2mL正己烷こ酸こ酷=85 15 (v/v)混合溶劑洗脫并棄去，最后用IOmL正己烷こ酸こ酷=85 15 (v/v)混合溶劑洗脫并收集，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，用250 μ L甲醇重新溶解準(zhǔn)備進(jìn)行分析。Hori也利用固相萃取柱對(duì)油脂樣品進(jìn)行了前處理(Hori, K. , et al. , Simultaneousdetermination of J-MしPD iatty acid esters and glycido丄 fatty acid esters inedible oils using liquid chromatography time-of-flight mass spectrometry.LffT-Food Science and Technology, 2012. 48(2) :204-208.):準(zhǔn)確稱量 IOmg油樣于螺旋蓋玻璃管中，加入2mLこ腈的正己烷飽和溶液、2mL正己烷的こ腈飽和溶液及20mL內(nèi)標(biāo)溶液，混合溶液振搖lmin，于3500 Xg條件下離心lOmin，正己烷相上樣到用4mL正己烷平衡好的固相萃取柱(Sep-Pak Plus SI cartridges, 500mg),用4mL氯仿洗脫并收集；こ腈相上樣到用ImL甲醇、2mLこ腈平衡好的固相萃取柱(Sep-Pak Plus C18 cartridges, 500mg),先后用2mLこ腈和2mLこ酸こ酯洗脫并收集，收集的正己烷相和こ腈相混合，并用氮?dú)獯蹈?，用ImLこ腈溶解，準(zhǔn)備進(jìn)行LC/T0F-MS分析。固相萃取柱萃取方法的不足之處是固相萃取柱的價(jià)格較高，使得樣品預(yù)處理的成本増加，同時(shí)其對(duì)活化和洗脫過程中的流速有較高的要求，加上萃取柱本身易被污染，從而提高了對(duì)整個(gè)預(yù)處理過程的操作要求，操作過程中稍有不慎就會(huì)導(dǎo)致樣品預(yù)處理的結(jié)果不理想。本專利技術(shù)方法以有機(jī)溶劑除去油脂中的甘油三酯組分，然后采用高效液相色譜收集油脂中的氯丙醇酯組分，其中，色譜條件為使用C18色譜柱，分別以こ腈和異丙醇為流動(dòng)相A和流動(dòng)相B，以流速lmL/min等度洗脫，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，流動(dòng)相A和流動(dòng)相B的體積比為5 5。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)，提供了ー種操作簡(jiǎn)單、預(yù)處理結(jié)果重現(xiàn)性好、預(yù)處理成本低的，在食品、醫(yī)藥、環(huán)境等許多分析領(lǐng)域有著較高的應(yīng)用價(jià)值。為了解決上述技術(shù)的問題，本專利技術(shù)是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，其特征在于，具體步驟為第一歩將油脂加熱到液體狀態(tài)，用有機(jī)溶劑去除甘油三酯；第二步測(cè)定當(dāng)日用こ腈稀釋配制氯丙醇酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，其濃度為Cs，用O. 2 μ m孔徑過濾膜過濾得到標(biāo)準(zhǔn)溶液，高效液相色譜檢測(cè)得到氯丙醇酯的流出時(shí)間，色譜條件為使用C18色譜柱，分別以こ腈和異丙醇為流動(dòng)相A和流動(dòng)相B，以流速lmL/min等度洗脫，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，流動(dòng)相A和流動(dòng)相B的體積比為5:5;第三步將第一歩所得的有機(jī)溶劑相用O. 2μπι孔徑過濾膜過濾，采用與第二步相同的色譜條件收集與氯丙醇酯標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間一致的組分，從而得到油脂樣品中的氯丙醇酷。所述第一歩中將油脂預(yù)處理除去甘三酯的具體步驟為在油脂樣本中加入2倍體積的こ腈，鏇潤振蕩30s,以轉(zhuǎn)速10000r/min離心IOmin,取上清。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于能夠通過簡(jiǎn)單的方法對(duì)用于檢測(cè)油脂中氯丙醇酯的樣品進(jìn)行預(yù)處理。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例來具體說明本專利技術(shù)。實(shí)施例I第一歩將煎炸30h后的28度棕櫚油樣本加熱，使呈液體狀態(tài)，加入2倍體積的こ腈，鏇潤振蕩30s,以轉(zhuǎn)速10000r/min離心IOmin,取上清；第二歩用こ腈稀釋配制氯丙醇ニ油酸酯和氯丙醇單硬脂酸酯標(biāo)準(zhǔn)本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
用于檢測(cè)油脂中氯丙醇酯的樣品預(yù)處理方法，其特征在于，具體步驟為：第一步：將油脂加熱到液體狀態(tài)，用有機(jī)溶劑去除甘油三酯；第二步：測(cè)定當(dāng)日用乙腈稀釋配制氯丙醇酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，其濃度為CS，用0.2μm孔徑過濾膜過濾得到標(biāo)準(zhǔn)溶液，高效液相色譜檢測(cè)得到氯丙醇酯的流出時(shí)間，色譜條件為：使用C18色譜柱，分別以乙腈和異丙醇為流動(dòng)相A和流動(dòng)相B，以流速1mL/min等度洗脫，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，流動(dòng)相A和流動(dòng)相B的體積比為5∶5；第三步：將第一步所得的有機(jī)溶劑相用0.2μm孔徑過濾膜過濾，采用與第二步相同的色譜條件收集與氯丙醇酯標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間一致的組分，從而得到油脂樣品中的氯丙醇酯。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：金青哲，周紅茹，王興國，楊嬌，周克茹，孫雪梅，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：江南大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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