馬屬動物沖卵液及其配制方法和應用技術

本發明專利技術公開了一種馬屬動物沖卵液及其配制方法和應用，其中，沖卵液包括乳酸鈉混合液、青霉素、鏈霉素，以及牛血清白蛋白、犢牛血清和滅活馬血清中的一種、兩種或三種；其配制方法包括：將乳酸鈉混合液置于37℃的恒溫箱中0.5-6小時后，備用，按照組分含量向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及牛血清白蛋白、犢牛血清和滅活馬血清中的一種或兩種或三種，即得到沖卵液。適用于馬、牛、驢的非手術法胚胎移植技術。本發明專利技術的有益效果是：具有取材方便、價格低廉、配制簡單、使用方便等優點，非常適用于馬屬動物非手術法胚胎移植的規模化生產，有利于胚胎移植技術的推廣應用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于動物胚胎移植領域，特別是涉及一種馬屬動物沖卵液及其配制方法和應用。
技術介紹
胚胎移植又稱受精卵移植，俗稱人工授胎或借腹懷胎，是指將雌性動物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態相同的其他雌性動物體內，使之繼續發育為新個體的技術。胚胎移植的基本程序包括供體超排與授精、受體同期發情處理、采卵、檢卵和移植。采卵又稱胚胎回收，是指從供體收集胚胎的方法，分為手術法和非手術法兩種。非手術法比手術法簡單易行，而且對生殖器官的傷害程度較小，因此在生產中多采用此法。沖卵液是采卵過程中，用于把胚胎從供體生殖道中沖洗出來的液體。沖卵液多數為組織培養液，目前國內常用的沖卵液主要有杜氏磷酸鹽緩沖液(D-PBS)、布林斯特氏液、合成輸卵管液(S0F)、惠屯氏液、Ham’s F-110以及TCM-199。上述幾種液體均存在藥品來源困難，價格昂貴，配制步驟繁瑣且需現用現配等問題，為胚胎移植的規模化生產帶來極大的不便。
技術實現思路
為了解決傳統的沖卵液藥品來源困難、價格昂貴、配制步驟繁瑣且需現用現配等問題，本專利技術提供了一種適用于規模化生產的馬屬動物非手術法胚胎移植用沖卵液及其配制方法和應用。為了實現上述專利技術目的，本專利技術提供了一種馬屬動物沖卵液，所述沖卵液包括乳酸鈉混合液、青霉素、鏈霉素，以及牛血清白蛋白或犢牛血清或滅活馬血清中的一種、兩種或二種。所述乳酸鈉混合液包括乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂和黃芪多糖中的一種或多種。所述沖卵液中各組分的含量為每IOOOml乳酸鈉混合液中含有青霉素30-180萬單位、鏈霉素20-200萬單位，以及牛血清白蛋白O. 05%-1. 5%、犢牛血清O. 5%-15%和/或滅活馬血清O. 5%-14%。其中，所述血清白蛋白、所述犢牛血清以及所述滅活馬血清的百分比為體積百分比。所述沖卵液中各組分的含量為每IOOOml乳酸鈉混合液中含有青霉素50-150萬單位、鏈霉素50-150萬單位，以及牛血清白蛋白O. 1%-0. 9%、犢牛血清1%_10%和/或滅活馬血清1%-10%。其中，所述血清白蛋白、所述犢牛血清以及所述滅活馬血清的百分比為體積百分比。所述乳酸鈉混合液中各組分的含量為每IOOOml混合液中含有乳酸鈉l_7g、氯化鈉l_5g、氯化鉀2-7g、氯化鈣O. 5-2g、氯化鎂O. 05-0. 5g和黃芪多糖O. 01-0. 3g。所述乳酸鈉混合液中各組分的含量優選為■ 每1000ml混合液中含有乳酸鈉3_7g、氯化鈉2-5g、氯化鉀3-7g、氯化鈣O. 5-1. 5g、氯化鎂O. 1-0. 4g和黃芪多糖O. 01-0. lg。所述乳酸鈉混合液中各組分的含量還可以優選為每IOOOml混合液中含有乳酸鈉5. 4g、氯化鈉3. 2g、氯化鉀4. 6g、氯化鈣I. lg、氯化鎂O. 32g和黃芪多糖O. 08g。為了更好的實現上述專利技術目的，本專利技術還提供了一種馬屬動物沖卵液的配制方法，包括 (1)按照各組分的含量稱取乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和/或氯化鎂，并加入蒸餾水混合，置于37°C的恒溫箱中O. 5-6小時后,備用； (2)稱取黃芪多糖放入無菌燒杯中，向無菌燒杯中加入步驟(I)中得到的混合液，攪拌使黃芪多糖充分溶解，得到乳酸鈉混合液； (3)準備沖卵前，按照組分含量向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及牛血清白蛋白、犢牛血清和滅活馬血清中的一種或兩種或三種，即可得到沖卵液。本專利技術又提供了一種馬屬動物沖卵液的配制方法，包括 (1)按照各組分的含量稱取乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和/或氯化鎂，并加入蒸餾水混合，置于37°c的恒溫箱中O. 5-6小時后，得到乳酸鈉混合液； (2)準備沖卵前，按照組分含量向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及牛血清白蛋白、犢牛血清和滅活馬血清中的一種或兩種或三種，即可得到沖卵液。本專利技術的馬屬動物沖卵液適用于馬、牛、驢的非手術法胚胎移植技術。 本專利技術實施例提供的技術方案帶來的有益效果是本專利技術以乳酸鈉混合液作為主液，可提前配制待用，使用前只需向主液中加入適量抗生素及牛血清白蛋白或犢牛血清或滅活馬血清即可。具有取材方便、價格低廉、配制簡單、使用方便等優點，非常適用于馬屬動物非手術法胚胎移植的規模化生產，有利于胚胎移植技術的推廣應用。具體實施例方式下面結合實施例對本專利技術做進一步描述。實施例I 一種馬屬動物沖卵液，包括5000ml乳酸鈉混合液作為主液，每IOOOml乳酸鈉混合液含有50萬單位青霉素、50萬單位鏈霉素和體積百分比為10%的犢牛血清。稱取乳酸鈉27g、氯化鈉16g、氯化鉀23g、氯化鈣5. 5g和氯化鎂I. 6g，加入5000ml蒸餾水混合，置于37°C的恒溫箱中6小時后，備用；稱取黃芪多糖O. 4g放入無菌燒杯中，向無菌燒杯中加入到備用的混合液中，攪拌使黃芪多糖充分溶解，得到乳酸鈉混合液；準備沖卵前，按照組分含量，向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及犢牛血清，即可得到沖卵液。使用本實施例沖卵液對非手術法牛胚胎移植進行沖卵。實施例2 一種馬屬動物沖卵液，包括5000ml乳酸鈉混合液作為主液，每IOOOml乳酸鈉林格注射液含有100萬單位青霉素、120萬單位鏈霉素和體積百分比為3%的滅活馬血清。稱取乳酸鈉10. 5g、氯化鈉6g、氯化鉀13. 5g和氯化鈣9g，加入5000ml蒸餾水混合，置于37°C的恒溫箱中3小時后，備用；稱取黃芪多糖I. 4g放入無菌燒杯中，向無菌燒杯中加入到備用的混合液中，攪拌使黃芪多糖充分溶解，得到乳酸鈉混合液；準備沖卵前，按照組分含量，向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及滅活馬血清，即可得到沖卵液。本實施例沖卵液應用于非手術法馬胚胎移植的沖卵。實施例3 一種馬屬動物沖卵液，包括4000ml乳酸鈉混合液作為主液，其中每IOOOml乳酸鈉混合液中含有80萬單位青霉素、80萬單位鏈霉素和體 積百分比為5%的滅活馬血清；其中，乳酸鈉混合液中各組分的含量為每IOOOml乳酸鈉混合液中含有乳酸鈉26g、氯化鈉10. Sg、氯化鉀21g和氯化鈣16. 8g。稱取乳酸鈉26g、氯化鈉10. 8g、氯化鉀21g和氯化鈣16. 8g，加入4000ml蒸餾水混合，置于37°C的恒溫箱中I小時后，得到乳酸鈉混合液以待備用；準備沖卵前，按照組分含量，向乳酸鈉混合液中加入青霉素、鏈霉素以及滅活馬血清，即可得到沖卵液。本實施例沖卵液應用于非手術法馬胚胎移植的沖卵。實施例4 一種馬屬動物沖卵液，包括5000ml乳酸鈉混合液作為主液，其中每IOOOml乳酸鈉混合液中含有60萬單位青霉素、90萬單位鏈霉素和體積百分比為8%的滅活馬血清；其中，乳酸鈉混合液中各組分的含量為每IOOOml乳酸鈉混合液中含有乳酸鈉25. 0g、氯化鈉20. 0g、氯化鉀25g、氯化鈣7. 5g、氯化鎂2. 25g和黃芪多糖O. 25g。稱取乳酸鈉25. 0g、氯化鈉20. 0g、氯化鉀25g、氯化鈣7. 5g和氯化鎂2. 25g，加入5000ml蒸餾水混合，置于37°C的恒溫箱中I小時后，備用；稱取黃芪多糖O. 25g放入無菌燒杯中，向無菌燒杯中加入到備用的混合液中，攪拌使黃芪多糖充分溶解，得到乳酸鈉混合液；準備沖卵前，按照組分含量，向乳酸鈉混合液中加入青霉素本文檔來自技高網...

【技術保護點】
馬屬動物沖卵液，其特征在于，所述沖卵液包括乳酸鈉混合液、青霉素、鏈霉素，以及牛血清白蛋白、犢牛血清和滅活馬血清中的一種、兩種或三種。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：榮美潔，鄒志鋼，張志鵬，李成修，于國綱，
申請(專利權)人：青島德瑞駿發生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：