神經調節蛋白拮抗劑及其在治療癌癥中的用途制造技術

本發明專利技術提供了神經調節蛋白拮抗劑和在延遲腫瘤復發前時間或預防癌細胞對用治療劑治療的抗性中使用神經調節蛋白拮抗劑的方法。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】神經調節蛋白拮抗劑及其在治療癌癥中的用途對相關申請的交叉引用本申請要求2010年2月18日提交的美國臨時申請No.61/305878的權益，通過提及而將其公開內容完整收入本文。專利
本專利技術涉及用神經調節蛋白拮抗劑治療癌癥。專利技術背景癌癥干細胞(CSC)的身份和特性在最近數年中已經是強烈研究的一個領域。腫瘤是具有不同生物學特性的細胞的異質混合物的證據在積累。已經對許多血液學惡性腫瘤和實體瘤報告了具有啟動腫瘤生長的獨特能力的截然不同的細胞群體的分離。然而，已經在使用特定細胞表面標志物預期地鑒定CSC中出現不一致性。例如，已經對白血病、胰腺、結腸直腸、腦和乳腺癌報告了關于干細胞表型的根本不同的發現（綜述見Brennan和Matsui2009）。此外，CSC頻率的估算在腫瘤類型和患者中顯著變化。CSC在維持已建立腫瘤的生長中或在化學療法后在原發性或遠距離部位再啟動腫瘤中的作用仍然有待確定。對于大多數癌癥患者，化學療法后的疾病復發是死亡的一個主要原因。因而，需要更好地了解造成復發的腫瘤再啟動細胞(TRIC)以更好地治療在最初響應化學治療處理后經歷癌癥復發的患者。這對于非小細胞肺癌(NSCLC)是特別相關的，因為大于三分之二的NSCLC患者不是手術切除的候選者。大多數患者以晚期疾病呈現，并且用化學療法、放射或兩種的組合治療(LungCancerPrinciplesandPractice)。然而，盡管對治療的初始響應良好，局部晚期疾病的5年存活率仍然為23.7%，而對于晚期疾病為3.5%(Horner等SEER)。已經顯示了經由過表達或激活突變的EGFR信號傳導的脫調節(deregulation)是NSCLC中的一個頻繁事件（綜述見Dahabreh等,2010）。EGFR是HER酪氨酸激酶家族的原型成員，該家族包括EGFR(Her1)、Her2、Her3和Her4。Her2缺乏功能性配體結合域(Graus-Porta1997)，而Her3缺乏酪氨酸激酶活性(Guy1994)，因此這些受體必須以異二聚體起作用。最近的證據顯示了其它Her家族成員也可以在NSCLC中發揮作用。然而，它們對疾病的貢獻是不太充分表征的，并且研究經常聚焦于其與EGFR激活的相互作用(Kuyama等2008,Hirsch2009,Zhou2006,Johnson2006,Ding2008)。神經調節蛋白是Her3和Her4受體酪氨酸激酶的一種配體。神經調節蛋白家族有4種已知的成員，即NRG1、NRG2、NRG3、和NRG4(Falls2003)。NRG1轉錄物經歷廣泛的可變剪接，生成至少15種不同同等型。所有活性同等型共享對于活性必需且足夠的EGF樣域(Holmes1992,Yarden1991)。已經顯示了NRG1自分泌信號傳導調節肺上皮細胞增殖(Jinbo2002)，并且在人肺發育中發揮作用(Patel2000)，而且牽涉NSCLC對EGFR抑制劑的不敏感性(Zhou2006)。需要提供在治療抗性癌癥和已經經歷癌癥復發的患者中有效的治療劑。專利技術概述本專利技術的一個方面提供了一種延長癌癥患者中的腫瘤復發前時間的方法，包括對所述患者施用有效量的神經調節蛋白拮抗劑。在一個實施方案中，該方法進一步包括對所述患者施用治療劑。在一個實施方案中，治療劑是化學治療劑或抗體。在某些實施方案中，化學治療劑是帕利他塞(paclitaxal)或順鉑或帕利他塞和順鉑的組合。在某些實施方案中，抗體是EGFR、HER2、HER3、或HER4抗體。在某些實施方案中，患者患有的癌癥是非小細胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、頭和頸癌、宮頸癌、膀胱癌、食管癌、前列腺癌、或結腸直腸癌。在一個實施方案中，腫瘤復發前時間的延長比在沒有所述神經調節蛋白拮抗劑的情況中的復發前時間大至少1.25倍。在一個實施方案中，腫瘤復發前時間的延長比在沒有所述神經調節蛋白拮抗劑的情況中的復發前時間大至少1.50倍。在某些實施方案中，神經調節蛋白拮抗劑是抗體、小分子、免疫粘附素、或RNA。在一個實施方案中，神經調節蛋白拮抗劑是NRG1拮抗劑。在一個實施方案中，NRG拮抗劑是抗NRG1抗體。附圖簡述圖1：用于研究腫瘤再啟動細胞(TRIC)的體內模型的圖示。圖2A：無胸腺裸鼠中的Calu3人NSCLC異種移植物模型，其中化學療法由帕利他塞和順鉑組成。數據以均值腫瘤體積±SEM呈現，n=12只小鼠/組。圖2B：無胸腺裸鼠中的H441人NSCLC異種移植物模型，其中化學療法由帕利他塞和順鉑組成。數據以均值腫瘤體積±SEM呈現，n=12只小鼠/組。圖2C：具有腫瘤細胞對SCID/beiz小鼠乳房脂肪墊的正位移植的KPL4人乳房模型，其中化學療法由帕利他塞組成。數據以均值腫瘤體積±SEM呈現，n=12只小鼠/組。圖2D：用順鉑處理K-rasLSLG12D，CAG-LSL-GFP遺傳工程小鼠NSCLC模型。數據以每個肺的GFP陽性細胞的平均數±SEM呈現，n=6只小鼠/組。圖3A：通過微陣列分析中的兩種獨立的探針證明NRG1mRNA在Calu3異種移植物模型的TRIC中富集。使用自獨立的腫瘤樣品分離的RNA通過針對NRG1a和NRG1b的定量實時PCR(qPCR)驗證富集。圖3B：通過兩種不同微陣列探針顯示的NRG1mRNA在H441異種移植物模型的TRIC中的富集。這使用來自用于微陣列分析的相同腫瘤樣品的RNA通過針對NRG1a和NRG1b的qPCR驗證。圖3C：通過兩種不同微陣列探針顯示的NRG1mRNA在KPL4乳腺癌異種移植物模型的TRIC中的富集。圖3D：通過一種微陣列探針顯示并通過qPCR驗證的NRG1mRNA在K-rasLSLG12D小鼠NSCLC模型的TRIC中的富集。圖4：NRG1富集對于殘留細胞是特異的，如通過對化學療法后各個大小和時間的腫瘤中的腫瘤細胞NRG1mRNA水平的qPCR分析證明的。圖5A：圖顯示了在其隨意的飲用水中施用媒介物（蔗糖）或dox(2gm/L)的具有已建立的Calu3-shNRG1異種移植物腫瘤的小鼠的腫瘤生長曲線。對腫瘤體積一周測量兩次，持續整個研究。數據以線性混合效應(LinearMixedEffect，LME)模型對腫瘤體積產生的擬合呈現，作為具有自動確定紐結(auto-determinedknot)的三次樣條(cubicsplines)繪圖。圖5B：圖顯示了用化療+蔗糖或化療+dox處理的具有已建立的Calu3-shNRG1異種移植物腫瘤的小鼠的腫瘤生長曲線。數據以LME模型對腫瘤體積產生的擬合呈現，作為具有自動確定紐結的三次樣條繪圖。圖6A：圖顯示了用蔗糖或dox處理的具有已建立的H441-shNRG1異種移植物腫瘤的小鼠的腫瘤生長曲線（n=12只/組）。數據以腫瘤體積的LME擬合分析呈現，作為具有自動確定紐結的三次樣條繪圖。圖6B：圖顯示了用化療+蔗糖或化療+dox處理的具有已建立的H441-shNRG1異種移植物腫瘤的小鼠的腫瘤生長曲線（n=12只/組）。數據以腫瘤體積的LME擬合分析呈現，作為具有自動確定紐結的三次樣條繪圖。圖7A：圖顯示了用蔗糖或dox處理的具有已建立的H1299-shNRG1異種移植物腫瘤的小鼠的腫瘤生長曲線（n=12只小鼠/組）。數據本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2010.02.18 US 61/305,8781.神經調節蛋白1(NRG1)拮抗劑和化學治療劑在制備用于延長癌癥患者中的腫瘤復發前時間的藥物中的用途，所述延長包括對所述患者施用有效量的神經調節蛋白1拮抗劑和化學治療劑，其中所述化學治療劑是帕利他...

【專利技術屬性】
技術研發人員：E杰克森，EA斯維特柯德羅，
申請(專利權)人：基因泰克公司，里蘭斯坦福初級大學理事會，
類型：
國別省市：