本發(fā)明專利技術(shù)屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種從紫花苜蓿中提取苜蓿素的方法，其特征在于以下步驟：1)紫花苜蓿粉碎，加5-8倍量60-80％乙醇回流提取2-3次，提取液濃縮至無醇，加入聚酰胺樹脂柱中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮后加乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得粗品；2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥得高純度苜蓿素。本方法具有制備周期短、操作簡單、制備量大、收率高等特點，適合高純度的苜蓿素的制備。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物
，尤其是涉及。
技術(shù)介紹
苜蓿素又叫小麥黃素、麥黃酮，化學名5，7- 二羥基-2- (4-羥基-3，5_ 二甲氧基苯基)苯并吡喃-4-酮，CAS號520-32-1，熔點285_286°C，分子式C17H1407，分子量330，分子結(jié)構(gòu)式 OCH3·苜蓿素是一種黃酮類物質(zhì)，具有輕微抗氧化作用，抗平滑肌松弛及抗腫瘤作用，還具有染色功能。苜蓿素廣泛存在植物中，但是含量較低，不足于分離純化，在紫花苜蓿中含量較多。制備高純度苜蓿素的方法，多是采用固體填充柱法，如硅膠柱、反相硅膠柱和凝膠柱方法。這種分離方法樣品損失嚴重，操作繁瑣，重現(xiàn)性差。如專利(申請?zhí)?01010605530)“從竹葉中制備高純度苜蓿素的方法”，該專利公開的方法干燥竹葉用95%乙醇提取，用石油醚萃取，水相濃縮成浸膏；使浸膏上ΑΒ-8大孔樹脂柱，先用純水洗脫，再用80 %乙醇洗脫，將洗脫液濃縮并干燥；干燥產(chǎn)物中加入鹽酸甲醇溶液，加熱進行酸解處理；所得酸解液上C18柱層析洗脫，收集苜蓿素級分，濃縮；所得濃縮物上凝膠分離柱，用純甲醇作流動相洗脫，收集苜蓿素級分，濃縮到干燥，即得苜蓿素。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是克服現(xiàn)有方法的缺陷，提供。本專利技術(shù)的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的，其特征在于以下步驟I)紫花苜蓿粉碎，加5-8倍量60-80 %乙醇回流提取2_3次，提取液濃縮至無醇，加入聚酰胺樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮后加乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得粗品；2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥得高純度苜蓿素。步驟I)中的乙醇溶液梯度洗脫為4-5BV40-50%乙醇洗脫雜質(zhì)，再用70 %乙醇洗脫。步驟2)中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合比例為4-7 5-8 3-5 4_6。本專利技術(shù)的技術(shù)優(yōu)勢在于工藝采用高速逆流色譜制備，是一種收率高、制備量大、制備周期短的高效方法，解決了硅膠柱效率低而且污染嚴重的技術(shù)缺陷。下面將結(jié)合具體實施方式進一步說明本專利技術(shù)，但本專利技術(shù)要求保護的范圍并不局限于下列實施例。具體實施例方式實施例I :紫花苜蓿草干燥粉碎，取Ikg加8倍量80%乙醇回流提取2次，提取液濃縮至無醇，加入200ml聚酰胺樹脂柱吸附，取5BV40%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用70%乙醇溶液洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮，濃縮液加等體積乙酸乙酯萃取3次，回收乙酸乙酯得粗品 Sg。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5 7 4 6混合，靜置分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)700rpm，泵入下相做流動相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min,同時流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥，得910mg黃色粉末，經(jīng)HPLC檢測，含量98. 7%。實施例2:紫花苜蓿草干燥粉碎，取Ikg加5倍量60%乙醇回流提取3次，提取液濃縮至無醇，加入250ml聚酰胺樹脂柱吸附，取4BV50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用70%乙醇溶液洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮，濃縮液加等體積乙酸乙酯萃取3次，回收乙酸乙酯得粗品IOgo取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按4 5 3 4混合，靜置分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)800rpm，泵入下相做流動相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，同時流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥，得840mg黃色粉末，經(jīng)HPLC檢測，含量98. 2%。實施例3:紫花苜蓿草干燥粉碎，取Ikg加7倍量70 %乙醇回流提取2次，提取液濃縮至無醇，加入200ml聚酰胺樹脂柱吸附，取4BV50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用70%乙醇溶液洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮，濃縮液加等體積乙酸乙酯萃取3次，回收乙酸乙酯得粗品7g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7 8 5 6混合，靜置分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)700rpm，泵入下相做流動相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為lml/min,同時流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥，得780mg黃色粉末，經(jīng)HPLC檢測，含量98. I %。權(quán)利要求1.，其特征在于以下步驟 1)紫花苜蓿粉碎，加5-8倍量60-80%乙醇回流提取2-3次，提取液濃縮至無醇，加入聚酰胺樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮后加乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得粗品； 2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥得高純度苜蓿素。2.如權(quán)利要求I所述從紫花苜蓿中提取苜蓿素的方法，其特征在于所述步驟I)中的乙醇溶液梯度洗脫為4-5BV40-50%乙醇洗脫雜質(zhì)，再用70%乙醇洗脫。3.如權(quán)利要求I所述從紫花苜蓿中提取苜蓿素的方法，其特征在于所述步驟2)中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合比例為4-7 5-8 3-5 4-6。全文摘要本專利技術(shù)屬于生物
，公開了，其特征在于以下步驟1)紫花苜蓿粉碎，加5-8倍量60-80％乙醇回流提取2-3次，提取液濃縮至無醇，加入聚酰胺樹脂柱中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮后加乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得粗品；2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥得高純度苜蓿素。本方法具有制備周期短、操作簡單、制備量大、收率高等特點，適合高純度的苜蓿素的制備。文檔編號C07D311/30GK102911146SQ20111021868公開日2013年2月6日 申請日期2011年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月2日專利技術(shù)者李法慶, 劉東鋒 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種從紫花苜蓿中提取苜蓿素的方法，其特征在于以下步驟：1)紫花苜蓿粉碎，加5？8倍量60？80％乙醇回流提取2？3次，提取液濃縮至無醇，加入聚酰胺樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分濃縮后加乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得粗品；2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗品由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，合并流分減壓干燥得高純度苜蓿素。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李法慶，劉東鋒，
申請(專利權(quán))人：蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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