用于測定單個紅血細胞的體積和血紅蛋白含量的方法技術

本發明專利技術提供的是在包含紅血細胞群體的樣品中測量單個紅血細胞的體積或血紅蛋白含量的方法。所述方法可以在血液分析儀中進行。還提供的是用于實施所述方法的血液分析儀和含有實施所述方法的程序的計算機可讀介質。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
技術介紹
患者血液中紅血細胞的形態和生理特征的差異提供了與多種特定類型的紅細胞疾病或貧血的病理狀態有關的有價值信息。在這些疾病的診斷中，可以測量平均細胞血紅蛋白濃度（MCHC）和平均細胞體積（MCV）以對患者狀態提供有價值的分析。可以將這些信息與經訓練的血液病學家對染色血液涂片中紅細胞大小、形狀和顏色之分布的顯微鏡評估以及其他生物化學測試聯合使用。單個紅細胞的折光率差異與它們的血紅蛋白濃度高度相關，該信息與對大小的測量結合可以具有診斷價值。例如，在小紅細胞性貧血中，紅細胞的大小顯著減小，因而MCV也顯著降低，但光學密度（與折光率相關）和MCHC稍有升高。在巨成紅細胞性貧血中，大小（大紅細胞）和MCHC均稍有升高。本公開內容部分涉及使用血液分析儀測定單個紅血細胞的體積和/或血紅蛋白含量的方法，以及用于實施所述方法的血液分析儀。專利技術概述本文提供使用血液分析儀測定血液樣品中的單個紅血細胞的體積和/或血紅蛋白含量的方法，以及用于實施所述方法的血液分析儀。一般而言，該方法涉及使用血液分析儀獲得包含紅血細胞群體的樣品一組數據點；然后計算所述樣品中單個紅血細胞的體積或血紅蛋白含量，包括使用：（I）在多個光學散射通道（例如軸向光損失、中間角散射和/或偏振側散射通道等）中對單個紅血細胞的測量；（II）使用來自獨立的阻抗轉換器的測量計算的紅血細胞群體的平均細胞體積，（III）在獨立的色度轉換器上測量的樣品的總血紅蛋白濃度；（IV）紅血細胞群體中的細胞數目；（V）在多個所述光學散射通道上對紅血細胞群體進行的測量的平均值；和（VI）在所述血液分析儀中在至少一個所述光學散射通道上分析的在先紅血細胞群體的平均中位值。還提供了與計算機相關的實施方案。附圖說明本專利或申請文件包含至少一幅以彩色繪制的圖片。有彩圖的本專利或專利申請的副本在申請且支付必需費用后由專利局提供。圖1是一個示例性血液分析儀的光學子組件的示意圖。圖2是在Abbot?Diagnostics的CELL-DYN?Sapphire血液分析儀中進行的網織紅細胞測定中收集的血細胞圖。圖3是顯示應用于紅血細胞（RBC）/網織紅細胞（Retic）分布的示例性閾值的圖形。圖4是描繪了體積與細胞濃度模型中的關系的表。圖5是用于計算細胞體積的模型的圖解表示。圖6是顯示研究中的數據點的圖，其表示特定樣品中所有細胞的比例尺平均化且規格化的軸向光損失和中間角散射值。使用數據點生成用于計算細胞體積的模型。內部的線顯示體積模型表面的范圍。圖7是用于計算細胞血紅蛋白濃度的局部模型（CHC局部模型）的圖解表示。圖8是顯示了用于生成CHC局部模型的數據點的圖。內部的線顯示CHC模型表面的范圍。圖9是在研究中落到977例樣品的CHC模型表面外部的RBC/Retic點的百分比的圖。圖10是在研究中落到977例樣品的CHC模型表面外部的RBC/Retic點的百分比作為光學MCHC值的函數的圖。圖11是在具有最多CHC模型表面外部事件（event）（6%）的研究中樣品的經換算、規格化的中間角和偏振側向散射平面中所有RBC/Retic的事件的圖。圖12是在MCHC為32g/dL的研究中其他樣品的經換算、規格化的中間角和偏振側向散射平面中所有RBC/Retic的事件的圖。圖13圖解描述了用于分類正常樣品中呈網狀血小板（rPLT）的算法規則。rPLT是循環事件。具體實施方式在更詳細地描述本專利技術之前，應理解本專利技術不限于所描述的具體實施方案，因為實施方案當然可以有所變化。在不偏離本專利技術真正的精神和范圍的條件下，可以對所述發明做各種改變且可以用等價物代替。另外，可以做很多修改，使得特殊的條件、材料、物質的組成、方法、方法行動或步驟適應本專利技術的目的、精神或范圍。所有這些修改旨在落入本文所附的權利要求范圍內。本文引用的任何方法的步驟可以以邏輯上可能的所引用事件的任何順序來實施，以及以事件的所引用順序來實施。另外，在提供數值范圍時，應理解該范圍上下限和指定范圍內任何其他指定值或中間值之間的任何中間值均涵蓋在本專利技術中。同時，應預期所述專利技術方案的任何任選特征可以單獨列出和要求權利，或者與本文描述的任何一種或更多種特征組合。參考項目僅提供用于本專利技術申請日之前的公開。本文不應被解釋為承認本專利技術不能通過在先專利技術優先于這些材料。關于單數項目，包括存在相同項目的復數形式的可能性。更特別地，除非另外明確指出，如本文和在所附的權利要求中使用的沒有數量詞指代的名詞包括復數指代。例如，如果一個值與“標準”比較，這個值可以與一個或更多個標準比較，即單一標準或多重標準。還應注意，可以書寫權利要求以排除任何任選的要素。同樣地，該聲明旨在作為使用任何排除性術語如“單獨地”、“僅”等限定要求權利的要素或使用“反”限定的在先基礎。以下縮寫可用于本公開文獻中：CBC(全血細胞計數)、RBC(血紅細胞或紅細胞)、rRBC(抗溶紅血細胞或紅細胞)、Retic(網織紅細胞，幼稚紅血細胞)、HGB(血紅蛋白)、MCHC(平均血球、或細胞血紅蛋白濃度)、MCV(平均血球、或細胞體積)、RDW(紅血細胞分布寬度)、PLT(血小板)、WBC(白血細胞或白細胞)、fWBC(易碎白血細胞或白細胞)、NEU(中性粒細胞)、LYM(淋巴細胞)、MON(單核細胞)、DSS(消偏振側向散射)、CLL(慢性淋巴細胞性白血病)、ALL(軸向光損失)、IAS(中間角散射)、PSS(偏振側向散射)、DSS(消偏振側向散射)、和FCS(流式細胞術標準)。通常，大寫的首字母縮寫詞是用來指示測量方法、測定或檢測通道（例如HGB、IAS），而小寫的斜體字用于指示從這些測量獲得的值（例如mcv、pss）。此外，術語“細胞”可以用于指外周血中常見的或病理上發現的任何形成的體，例如RBC和WBC，還包括PLT。其它縮寫可以在下面定義。在本公開文獻中，術語“FCS文件”是用來描述由分析儀捕獲和由自動內部算法分類的經檢測事件集合的數字表示（例如RBC、淋巴細胞等）。FCS文件中的事件也可以被稱為“列表型”數據，這反映出FCS文件格式的一個方面，其中事件安排在以檢測時間順序排列的列表中。血液分析儀如上所述，提供了一種血液分析儀，其提供了樣品中單個紅血細胞的體積和/或血紅蛋白數量。一般而言，血液分析儀包括：a)流動細胞池；b)用于將光導向所述流動細胞池的光源；c)用于檢測多個光散射通道上細胞的光散射的多個檢測器；d)用于測本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2010.01.15 US 12/657,2181.血液分析儀，其包括：
a)流動細胞池；
b)用于將光導向所述流動細胞池的光源；
c)用于檢測多個光散射通道上細胞的光散射的多個檢測器；
d)用于測量細胞裂解物中血紅蛋白濃度的色度轉換器；
e)用于測量阻抗變化的阻抗轉換器；和
f)數據分析工作站，其包括計算包含紅血細胞群體的樣品中單個紅血細胞的體積或
血紅蛋白含量的程序，所述計算使用：
i.在多個所述光散射通道上對所述單個紅血細胞的測量；
ii.使用阻抗值計算的所述紅血細胞群體的平均細胞體積；
iii.所述樣品的總血紅蛋白濃度；
iv.所述紅血細胞群體中細胞的數目；
v.在所述多個所述光散射通道上對所述紅血細胞群體進行的測量的平均值；和
vi.在所述血液分析儀中在至少一個所述光散射通道上分析的在先紅血細胞群體
的平均中位值。
2.如權利要求1所述的血液分析儀，其中所述數據分析工作站包括計算所述樣品中
所述單個紅血細胞的體積的程序，所述計算使用：
i.在ALL和IAS通道上對所述單個紅血細胞進行的測量；
ii.使用阻抗值計算的所述紅血細胞群體的平均細胞體積；
iii.所述群體的平均細胞血紅蛋白濃度，使用所述平均細胞體積、所述總血紅蛋
白濃度和所述群體中細胞的所述數目來計算；
v.在ALL和IAS通道上對所述紅血細胞群體進行的測量的平均值；和
vi.在所述血液分析儀中在所述IAS通道上分析的在先紅血細胞群體的平均中位
IAS值。
3.如權利要求2的血液分析儀，其中所述數據分析工作站包括在計算所述體積之前
換算所述ALL和IAS測量的程序，其中：
a)換算所述IAS測量以提供經換算的IAS值，所述換算使用：
i.所述紅血細胞群體的所述平均細胞血紅蛋白濃度；
ii.在所述IAS通道上對所述紅血細胞群體進行的所述測量的平均值；
iii.從在所述血液分析儀中運行的在先樣品獲得的平均中位IAS值；和
b)換算所述ALL測量以提供經換算的ALL測量，所述換算使用：
i.所述經換算的IAS值；和
ii.使用阻抗值計算的所述紅血細胞群體的所述平均細胞體積；和
iii.在所述ALL通道中對所述紅血細胞群體進行的所述測量的平均ALL值。
4.如權利要求1所述的血液分析儀，其中所述數據分析工作站包括計算所述樣品中
所述單個紅血細胞的血紅蛋白濃度的程序，所述計算使用：
i.在IAS和PSS通道上對所述單個紅血細胞進行的測量；
ii.所述群體的平均細胞血紅蛋白濃度，使用基于阻抗值的所述平均細胞體積、所述
總血紅蛋白濃度和所述群體中的所述細胞數目來計算；
iii.在IAS和PSS通道上對所述紅血細胞群體進行的測量的平均值；和
iv.在所述血液分析儀中在所述IAS和PSS通道上分析的在先紅血細胞群體的平均
中位IAS和PSS值。
5.如權利要求4所述的血液分析儀，其中所述數據分析工作站包括在計算所述血紅
蛋白濃度之前換算所述IAS和PSS測量的程序，其中：
a)換算所述IAS測量以提供經換算的IAS值，所述換算使用：
i.所述紅血細胞群體的所述平均細胞血紅蛋白濃度；
ii.在所述IAS通道上對所述紅血細胞群體的所述測量的平均IAS值；
iii.從在所述血液分析儀中運行的在先樣品獲得的平均中位IAS值；和
b)換算所述PSS測量以提供經換算的PSS值，所述換算使用：
i.所述紅血細胞群體的所述平均細胞血紅蛋白濃度；
ii.在所述PSS通道上對所述紅血細胞群體進行的所述測量的平均PSS值；
iii.從在所述血液分析儀中運行的在先樣品獲得的平均中位PSS值。
6.如權利要求1所述的血液分析儀，其中所述程序包括用于過濾所述測量以除去由...

【專利技術屬性】
技術研發人員：馬丁·克羅肯貝格爾，戴安娜·G·加勒特，賈科莫·瓦卡，
申請(專利權)人：雅培制藥有限公司，
類型：
國別省市：