抗c-Met人源化抗體及含其的預防或治療癌癥用的藥物組合物制造技術

抗c-Met人源化抗體及包括其的用于預防或治療癌癥的藥物組合物。所述抗c-Met人源化抗體包括具有SEQ?ID?NO：1的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ?ID?NO：2的氨基酸序列的輕鏈可變區，或者包括具有SEQ?ID?NO：3的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ?ID?NO：4的氨基酸序列的輕鏈可變區。根據所述抗c-Met人源化抗體及包括其的用于預防或治療癌癥的藥物組合物，可有效地預防或治療癌癥。

【技術實現步驟摘要】

本公開內容涉及抗C-Met人源化抗體及包括其的用于預防和治療癌癥的藥物組合物。
技術介紹
c-Met是肝細胞生長因子(HGF)的受體，且HGF是與c_Met受體酪氨酸激酶的胞外區結合以誘發在多種正常細胞和腫瘤細胞中的有絲分裂發生、運動(movement)、形態發生和血管發生的一類細胞因子。c-Met是存在于細胞表面上的代表性的受體酪氨酸激酶，本身是原癌基因，且有時涉及與癌癥相關的多種機制如癌癥發生(development)、轉移、遷移、侵入和血管發生，與配體HGF無關。因此，c-Met近來形成為新的用于抗癌治療的靶。特別地，已知c-Met涉及誘發對常用抗癌藥物的耐藥性，且因此被認為對于個人化的治療是重要的。靶向表皮生長因子受體(EGFR) (ERBBl)的代表性的抗癌治療藥物即Erbitux或Tarceva通過阻斷涉及癌癥發生機制的信號的轉導而起作用。另外,公知作為乳腺癌治療藥物的Herceptin靶向ERBB2 (HER2)并通過阻斷細胞增殖所必需的信號的轉導而起作用。但是，近來的報道是，在對上述藥物有耐藥性的患者中，抗癌藥物由于c-Met蛋白質的過表達而不起作用和誘發細胞增殖的其它信號的轉導機制被激活。因此，對于許多藥物公司，c-Met已形成為抗癌藥物的祀分子。相關技術公開了抑制C-Met作用的抗體治療藥物。但是，在該相關技術中，具有原始結構的所述抗體誘發c-Met分子的二聚，由此導致癌癥。在公開了抑制c-Met作用的抗體治療藥物的另一相關技術中，所述抗體能夠抑制c-Met與HGF (其為c-Met配體)的結合,但是所述抗體與c_Met的結合誘發c_Met的二聚，與所述配體無關。結果，所述抗體作為誘發致癌信號的轉導的激動劑。另一相關技術公開了，為了防止c-Met的二聚,c-Met的單臂(one-armed)拮抗抗體(其通過修飾激動劑而制備)、和使用遺傳重組方法的雙臂(two-armed)抗體、及在臨床試驗中的產品開發目前正在進行中。但是，即使在該相關技術中，所述抗體僅在與化學治療一起進行治療時起作用，且當所述抗體獨立地治療時，抗癌治療效果被證明是低的。因此，仍需要開發抑制c-Met作用的用于預防和治療癌癥的新的藥物組合物。
技術實現思路
提供抗C-Met人源化抗體。提供用于預防和治療癌癥的包括抗C-Met人源化抗體的藥物組合物。附圖說明由結合附圖考慮的實施方式的以下 描述，這些和/或其它方面將變得明晰和更容易理解，其中圖1說明根據實施方式證實嵌合抗體chAbF46及3種類型人源化抗體huAbF46-II1、huAbF46-II2 和 huAbF46_II4 是否識別抗原的結果；圖2說明根據實施方式證實人源化抗體的激動副作用程度的結果；圖3說明根據實施方式使用BrdU測定證實具有修飾的鉸鏈區的chAbF46的激動副作用程度的結果；圖4說明根據實施方式通過測量Akt磷酸化程度證實具有修飾的鉸鏈區的chAbF46的激動副作用程度的結果；圖5說明根據實施方式在體外進行的具有修飾的鉸鏈區的chAbF46的細胞增殖分析的結果的圖；圖6說明根據實施方式在體內進行的在胃癌小鼠異種移植物模型中具有修飾的鉸鏈區的chAbF46的抗癌分析的結果的圖；圖7說明根據實施方式使用BrdU測定證實具有修飾的鉸鏈區的人源化抗體huAbF46的激動副作用程度的結果；圖8說明根據實施方式在體外進行的具有修飾的鉸鏈區的人源化抗體huAbF46的細胞增殖分析的結果的圖；和圖9說明根據實施方式在體內進行的在胃癌小鼠異種移植物模型中具有修飾的鉸鏈區的人源化抗體huAbF46的抗癌分析的結果的圖。具體實施例方式現在將詳細介紹實施方式，其實例說明在附圖中，其中相同的附圖標記始終是指相同的元件。在這點上，本實施方式可具有不同的形式，且不應解釋為限于本文中闡述的描述。因此，以下僅通過參考附圖描述實施方式以解釋本描述的各方面。如本文中使用的術語“和/或”包括相關所列項目的一個或多個的任何和全部組合。根據本專利技術的一方面，提供抗c-Met人源化抗體，其包括具有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區。根據本專利技術的另一方面，提供抗c-Met人源化抗體，其包括具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ ID NO :4的氨基酸序列的輕鏈可變區。術語“c-Met”或“c-Met蛋白質”是指與肝細胞生長因子(HGF)結合的受體酪氨酸激酶。c-Met蛋白質包括通過確定為GenBank登錄號匪000245的核苷酸序列編碼的多肽，通過確定為GenBank登錄號匪000236的核苷酸序列編碼的蛋白質，和/或其胞外區。受體酪氨酸激酶c-Met參與多種機制如癌癥發生、轉移、遷移、侵入和血管發生。所述c-Met可衍生自選自人、猴子、小鼠和大鼠的c_Met。通過用所需抗原使非免疫性動物免疫產生的動物衍生的抗體當為了醫療向人注射時通常引起免疫原性，因此已開發嵌合抗體以抑制這樣的免疫原性。嵌合抗體通過如下制備通過遺傳工程用人抗體的恒定區置換導致抗-同種型反應的動物衍生的抗體的恒定區。與動物衍生的抗體相比，嵌合抗體在抗-同種型反應方面顯著改善，但是動物衍生的氨基酸仍存在于可變區中，因此嵌合抗體具有關于潛在的抗獨特型基因型(ant1-1diotypic)反應的副作用。開發人源化抗體以減少這樣的副作用。人源化抗體通過如下產生將在嵌合抗體的可變區中抗原結合方面起重要作用的互補決定區(CDR)移植到人抗體框架。在CDR移植以產生人源化抗體中最重要的事情是選擇最優化的人抗體以接受動物衍生的抗體的CDR，且因此采用抗體數據庫的使用、晶體結構的分析和分子模型化的技術。但是，即使當動物衍生的抗體的CDR移植到最優化的人抗體框架時，也存在影響抗原結合的位于動物衍生的抗體的框架中的氨基酸。因此，在許多情況下，抗原結合力未保持，且因此應用另外的抗體工程技術以恢復所述抗原結合力是必需的。所述c-Met的人源化抗體是使c_Met小鼠抗體的免疫原性最小化的人源化抗體，其包括具有SEQ ID NO :1或SEQ ID NO 3的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ ID NO 2或SEQ ID NO 4的氨基酸序列的輕鏈可變區。根據實施方式，所述抗體可為單克隆抗體。完整抗體包括兩個全長輕鏈和兩個全長重鏈，其中各輕鏈通過二硫鍵與所述重鏈連接。所述抗體具有重鏈恒定區和輕鏈恒定區。所述重鏈恒定區為伽馬(Y)、謬(U)、阿爾法(a )、德爾塔(S )或厄普西隆(￡ )型，其可進一步分類為伽馬I ( Y I)、伽馬2 ( Y 2)、伽馬3 ( Y 3)、伽馬4 ( Y 4)、阿爾法I ( a I)或阿爾法2 ( a 2)。所述輕鏈恒定區為卡帕(k )或拉姆達U)型。 術語“重鏈”是指全長重鏈、及其片段，包括可變區Vh和三個恒定區的域CH1、CH2、CH3、以及鉸鏈，所述可變區Vh包括其存在是抗原結合所必需的CDR的氨基酸序列。術語“輕鏈”是指全長輕鏈、及其片段，包括可變區\和恒定區Q，所述可變區\包括其存在是抗原結合所必需的CDR的氨基酸序列。在本文中使用的術語“互補決定區(CDR) ”是指抗體可變域的氨基酸殘基，其存在是抗原結合所必本文檔來自技高網...

【技術保護點】
抗c?Met人源化抗體，包括具有SEQ?ID?NO：1的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQ?ID?NO：2的氨基酸序列的輕鏈可變區。

【技術特征摘要】
2011.10.05 KR 10-2011-01012911.抗C-Met人源化抗體，包括具有SEQID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區。2.抗c-Met人源化抗體，包括具有SEQID NO :3的氨基酸序列的重鏈可變區和具有SEQID NO 4的氨基酸序列的輕鏈可變區。3.權利要求1或2的抗c-Met人源化抗體，其中所述c-Met衍生自選自人、猴子、小鼠和大鼠的c-Met。4.權利要求1或2的抗c-Met人源化抗體，其中所述抗體為單克隆抗體。5.權利要求1或2的抗c-Met人源化抗體,其中所述抗體為選自scFv、(scFv)2、Fab、Fab，和F(ab’ )2的抗原結合片段。6.權利要求1或2的抗c-Met人源化抗體，其中所述抗體包括具有通過缺失、插入或取代一個或多個氨基酸而修飾的氨基酸序列的鉸鏈區。7.權利要求1或2的抗c-Met人源化抗體，其中所述抗體包括具有SEQID NO :5或SEQID NO 6的氨基酸序列的鉸鏈區。8.抗c-Met人源化抗體的重鏈可變區，具有SEQID NO 1的氨基酸序列。9.抗c-Met人源化抗體的輕鏈可變區，具有SEQID NO :2的氨基酸序列。10.抗c-Met人源化抗體的重鏈可變區，具有SEQID NO...

【專利技術屬性】
技術研發人員：鄭光鎬，李承炫，金健雄，金敬兒，吳永美，Sb，李，鄭收硯，鄭閏宙，趙恩徹，韓榮奎，
申請(專利權)人：三星電子株式會社，
類型：發明
國別省市：