APARPAR多肽修飾的隱形脂質體及遞藥系統技術方案

本發明專利技術公開了一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體及遞藥系統；所述APARPAR多肽修飾在隱形脂質體的表面上，所述隱形脂質體的膜包含氫化大豆磷脂、膽固醇、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-APARPAR，本發明專利技術還涉及一種脂質體遞藥系統，所述遞藥系統由APARPAR多肽修飾的隱形脂質體包裹抗腫瘤藥物而組成。本發明專利技術提供的脂質體遞藥系統可用于神經膠質瘤的靶向治療，其可以在APARPAR多肽的介導作用下穿透腫瘤血管壁，滲透進入整個腫瘤組織內部，大大提高對腫瘤的殺傷作用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬藥物制劑領域，具體涉及一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體及遞藥系統。
技術介紹
原發性腦瘤已成為癌癥的十大死因之一，每100000人中就有5到10人患惡性腦膠質瘤。根據WHO對膠質瘤的分級系統，4級膠質瘤的診斷最困難，患者的平均存活時間僅為12個月。從總體看，幾乎沒有病人存活能超過3年。侵入性腦膠質瘤細胞能夠快速地浸潤和破壞正常腦組織結構，因而難以通過手術完全切除腫瘤。即使使用手術切除、放療和化療聯合治療，惡性腦膠質瘤病人的平均生存時間也不超過一年?；煼椒ㄊ〉闹饕蚴强拱┧幫ㄟ^靜脈給藥后對腫瘤組織無選擇性，導致嚴重的毒副作用。即使是目前研究廣泛的主動靶向納米遞藥系統，也存在對腫瘤組織滲透能力差的缺點，使其對神經膠質瘤的治療效果不佳。神經氈蛋自-1(NRP-1)是細胞表面的一種I型跨膜糖蛋白，通常表達在一些腫瘤細胞和血管內皮細胞表面，是血管內皮生長因子165(VEGF165)的受體，在腫瘤轉移、血管新生、調節血管通透性等方面發揮重要功能。研究表明，NRP-1在神經膠質瘤細胞表面高表達，但在相應的正常組織上皮細胞中沒有表達。APARPAR多肽是通過噬菌體展示技術篩選得到的一個直鏈七肽，是NRP-1的配體，它對NRP-1高表達的腫瘤細胞和腫瘤血管表現出特異親和性。APARPAR多肽屬于“腫瘤穿透肽”，具有腫瘤血管穿透性和腫瘤組織穿透性，這類多肽可以介導與其共價連接的藥物分子或納米遞藥系統穿透腫瘤血管壁并滲透進入腫瘤內部，分布到整個腫瘤組織 中，與目前常見的主動靶向分子相比具有明顯的優越性。目前尚未見利用APARPAR多肽介導納米遞藥系統用于腫瘤靶向治療的報道。
技術實現思路
本專利技術的目的是針對現有技術中的不足，提供一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體及遞藥系統。本專利技術的遞藥系統可通過靜脈注射給藥，通過腫瘤EPR效應和APARPAR介導作用將其靶向至腫瘤部位，并可穿透腫瘤血管壁，滲透進入整個腫瘤組織內部，提高藥物的抗腫瘤作用；本專利技術的遞藥系統可用作神經膠質瘤治療藥物的靶向遞送。本專利技術是通過以下的技術方案實現的，第一方面，本專利技術涉及一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體，所述APARPAR多肽修飾在隱形脂質體的表面上。優選地，所述隱形脂質體的膜包含氫化大豆磷脂、膽固醇、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-APARPAR ;各組分的質量比依次為(14 16) (6 8) (2 4) (I 3)。第二方面，本專利技術涉及一種脂質體遞藥系統，所述遞藥系統由前述APARPAR多肽修飾的隱形脂質體包裹抗腫瘤藥物而組成。優選地，所述脂質體遞藥系統中，所述隱形脂質體的重量百分比為70 98%，余量為抗腫瘤藥物。優選地，所述抗腫瘤藥物為阿霉素或表阿霉素。第三方面，本專利技術還涉及一種脂質體遞藥系統的制備方法，包括如下步驟步驟一，將各組分用氯仿或甲醇溶解，旋轉蒸發去除溶劑，加(NH4)2SO4溶液放入40 70°C水浴并同時旋轉震蕩的條件下進行超聲分散，得空白脂質體混懸液；之后通過50nm孔徑的碳酸脂膜，得空白脂質體；步驟二，將空白脂質體以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體，將其與抗腫瘤藥物溶液混合后，在40 70°C靜置5 40分鐘，然后以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體部分，即得所述脂質體遞藥系統。優選地，所述(NH4) 2S04溶液的濃度為O.1 O. 5M。優選地，步驟一中，所述各組分為隱形脂質體的膜包含氫化大豆磷脂、膽固醇、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-APARPAR ;各組分的質量比依次為(14 16) (6 8) (2 4) (I 3)。第四方面，本專利技術還涉及前述APARPAR多肽修飾的隱形脂質體在制備治療神經膠質瘤靶向治療藥物中的用途。 本專利技術具有如下的有益效果本專利技術提供的脂質體遞藥系統可用于神經膠質瘤的靶向治療，其可以在APARPAR多肽的介導作用下穿透腫瘤血管壁，滲透進入整個腫瘤組織內部，大大提高對腫瘤的殺傷作用。附圖說明通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細描述，本專利技術的其它特征、目的和優點將會變得更明顯圖1為APARPAR修飾的阿霉素脂質體和未修飾的阿霉素脂質體粒徑分布圖；圖2為藥效學實驗中裸鼠生存時間對比結果圖。具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本專利技術。應理解，這些實施例僅用于說明本專利技術而不用于限制本專利技術的范圍。下列實施例中未注明具體條件的試驗方法，通常按照常規條件，例如薩姆布魯克等分子克隆實驗手冊第三版(科學出版社，2002)中所述的條件，或者按照各制造商所建議的條件。實施例1、APARPAR-脂質體/DOX的制備和表征脂質體膜材料處方組成為HSPC (氫化大豆磷脂)/Chol (膽固醇)/PEG-DSPE (聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺復合物)(14 6 2，mol/mol) ,APARPAR修飾的PEG脂質體膜材料處方為 HSPC/Chol/mPEG-DSPE/APARPAR-PEG-DSPE(14 :6:2: l，mol/mol)。將各組分用氯仿溶解，旋轉蒸發去除溶劑，加濃度為O.1M的(NH4)2SO4溶液至脂膜中，超聲分散并在水浴40°C時旋轉震蕩，得空白脂質體混懸液；再擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得空白脂質體；將空白脂質體以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體部分，將其與適量的阿霉素溶液混合后，在40°C靜置5分鐘，然后以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體部分，即得，其中隱形脂質體的重量百分比為70%，抗腫瘤藥物的重量百分比為30%。脂質體用動態光散射法測定粒徑，結果顯示，平均粒徑均為90nm左右，APARPAR修飾對其粒徑無明顯影響。圖1為APARPAR修飾的阿霉素脂質體和未修飾的阿霉素脂質體粒徑分布圖；由圖1可知，兩者粒徑大小及分布無顯著差異，說明APARPAR的修飾對脂質體粒徑無顯著影響。實施例2、APARPAR-脂質體/DOX的制備和表征脂質體膜材料處方組成為HSPC (氫化大豆磷脂)/Chol (膽固醇)/PEG-DSPE (聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺復合物)(16 6 4，mol/mol) ,APARPAR修飾的PEG脂質體膜材料處方為 HSPC/Chol/mPEG-DSPE/APARPAR-PEG-DSPE(16 :6:4: l，mol/mol)。將各組分用甲醇溶解，旋轉蒸發去除溶劑，加濃度為O. 5M的(NH4) 2S04溶液至脂膜中，超聲分散并在水浴70°C時旋轉震蕩，得空白脂質體混懸液；再擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得空白脂質體；將空白脂質體以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體部分，將其與適量的阿霉素溶液混合后，在70°C靜置40分鐘，然后以生理鹽水為流動相過葡聚糖凝膠柱，收集脂質體部分，即得，其中隱形脂質體的重量百分比為98%，抗腫瘤藥物的重量百分比為2%。脂質體用動態光散射法測定粒徑，結果顯示，平均粒徑均為90nm左右，APARPAR修飾對其粒徑無明顯影響。實施例3、APARPAR-脂質體/DOX的制備和表征脂質體膜材料處方組成為HSPC (氫化大豆磷脂)/Chol (膽固醇)/本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體，其特征在于，所述APARPAR多肽修飾在隱形脂質體的表面上。

【技術特征摘要】
1.一種APARPAR多肽修飾的隱形脂質體，其特征在于，所述APARPAR多肽修飾在隱形脂質體的表面上。2.如權利要求1所述的APARPAR多肽修飾的隱形脂質體，其特征在于，所述隱形脂質體的膜包含氫化大豆磷脂、膽固醇、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-APARPAR;各組分的質量比依次為(14 16) (6 8) (2 4) (I 3)。3.一種脂質體遞藥系統，其特征在于，所述遞藥系統由如權利要求1所述的APARPAR多肽修飾的隱形脂質體包裹抗腫瘤藥物而組成。4.如權利要求3所述的脂質體遞藥系統，其特征在于，所述脂質體遞藥系統中，所述隱形脂質體的重量百分比為70 98%，余量為抗腫瘤藥物。5.如權利要求3所述的脂質體遞藥系統，其特征在于，所述抗腫瘤藥物為阿霉素或表阿霉素。6.一種如權利要求3所述的脂質體遞藥系統的制備方法，其特征在于，包括如下步驟步驟一，將各組分用氯仿或甲醇溶解，旋轉蒸發去除溶劑，加(N...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊一祎，閆志強，魏岱旭，鐘建，金彩虹，余震，何丹農，
申請(專利權)人：上海交通大學，上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司，
類型：發明
國別省市：