本發明專利技術公開了一種砷化合物溶液及其制備的包載砷化合物的白蛋白納米粒和凍干制劑，所述的砷化合物溶液按照如下方法配制：取As2O3粉末加入到無菌去離子水中得到懸浮液，其中每mL無菌去離子水中加入6～25mg?As2O3粉末；所得懸浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并調節溶液pH為7.5～9，并使所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為5～20mg/mL。本發明專利技術所述的砷化合物溶液中砷化合物分子結構明確且具有良好的藥物療效，所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒和凍干制劑是能提高藥物療效和生物相容性以及降低毒副作用的控釋制劑，具有廣闊的應用前景。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬醫藥
，涉及一種砷化合物溶液及其制備的包載砷化合物的白蛋白納米粒和包載砷化合物的白蛋白納米粒凍干制劑。
技術介紹
系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫性疾病，可累及全身各個系統和臟器的自身免疫病，發病機制未明，但在眾多病因中，認為是一種體內B細胞多克隆激活和針對自身抗原產生自身抗體的自身免疫性風濕性疾病。目前對SLE的西醫治療仍以糖皮質激素及細胞毒藥物或免疫抑制劑為主，雖然能夠延長存活期限，但長期或大劑量使用激素，可導致消化道出血、骨質疏松、感染等并發癥，給治療帶來很多困難。因此，研究一種療效可靠、副作用小且經濟的藥物治療方法，滿足不同患者的需要，仍為當務之急。As2O3俗稱砒霜，為一種劇毒藥，又是一種作用廣泛的藥物。在我國有悠久的用藥史，古代中醫曾用于治療牛皮癬、梅毒、風濕病及一些惡性腫瘤。傳統中藥砒霜，最早是中國人在新藥開發與治療白血病領域的重大專利技術和貢獻，并取得舉世公認的成就。近年來由于As2O3在急性早幼粒白血病治療中的顯著療效。許多學者對該藥進行深入研究表明，As2O3具有極為廣泛的抗瘤譜，不僅對白血病細胞具有極好的抑制作用，同時對于眾多的實體腫瘤也有很好的抑瘤作用，其中包括肺癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、胃癌和結腸癌等。國內外許多學者從現代醫學科學的角度，對其作用機制進行深入細致的研究。研究表明，砷在體內以三價砷起作用，三價砷是巰基(-SH)的絡合劑，與酶分子內的巰基作用后可抑制其活性，然后通過多條途徑誘導細胞凋亡，證實了 As2O3是目前非常有效的抗腫瘤藥物。魏亞明等(西北國防醫學雜志，2002，23 (5) =324-326.)報道了三氧化二砷對白血病細胞凋亡和分化的 雙向誘導作用。研究發現As2O3在高濃度時以誘導細胞凋亡為主，低濃度時誘導細胞分化為主，As2O3可以誘導白血病細胞凋亡和部分分化。同時，As2O3對細胞因子和免疫調節方面的作用機制也日益受到關注，一些研究:朱小春等(中華內科雜志，2001，40(11): (764-765);(中華風濕病學雜志，2002，6 (5) =343-346)推測As2O3誘導自身反應性淋巴細胞的凋亡而控制或減輕自身免疫反應，或抑制SLE發病機制中起重要作用。但是，傳統As2O3的臨床應用目前仍存在不少問題，如毒副作用大、生物利用度較低等。目前臨床上所用的制劑是As2O3制成的亞砷酸注射液，靜脈給藥后由于血漿砷濃度很快升高并迅速彌散至周圍組織，可使病人出現消化道癥狀、末梢神經炎、皮膚干燥、色素沉著，甚至出現腎功能損害或胸腹水等毒副作用。鑒于As2O3全身給藥的安全劑量非常有限，安全劑量與中毒劑量相差很小，體內過量積蓄的毒性，更限制了其作為化療藥物的應用。因此，我們在看到As2O3中藥臨床應用價值的同時，若能通過改進傳統制劑工藝，采用現代技術制備新型As2O3納米粒，從而提高生物利用度、減少藥物用量、降低毒副作用并提高療效將具有重要的臨床意義。現有的包載As2O3納米粒制劑的制備方法:1、周潔等(中國新藥雜志2005 14(1)54)公開了乳化-戊二醛固化法制備三氧化二砷白蛋白微球的方法；該方法不僅使用大量有機溶劑與油，而且使用較多的化學交聯劑——戊二醛，其殘留將給制劑的使用帶來安全隱患。2、陳華江(第二軍醫大學學報2007.28(6)644)公開了乳化-熱固化法制備三氧化二砷白蛋白微球的方法；3、楊志文等(中華中醫藥學刊2007 25(8) 115)公開了乳化-加熱固化法制備三氧化二砷白蛋白微球方法，需使用蓖麻油，棉籽油，且需使用大量有機溶劑洗除油性殘余物。以上兩種方法，無論是乳化-戊二醛固化法還是乳化-加熱固化法都存在工藝流程繁瑣，不能擴大操作等缺陷。我們在制備包載砷化合物的納米粒的初期經過諸多試驗研究發現，用蓖麻油進行乳化-熱固化法所制得的納米粒粒徑大小相差懸殊，且工藝流程繁瑣；后改用去溶劑-戊二醛化學固化法，但由于納米粒的比表面積大，尚未固化的納米粒在攪拌中易合并呈大粒，又容易發生納米粒之間的交聯，所制得粒徑偏大、釋放時間也比較短，且有戊二醛化學試劑殘留，工藝流程繁瑣、不利于工業化生產。綜上，現有技術存在工藝流程繁瑣；毒性試劑戊二醛殘留的隱患；緩釋時間短，穩定性差不利于穩定貯存等缺陷，亟需開發一種新的制備包載As2O3納米粒制劑的新方法。
技術實現思路
本專利技術要解決的第一個技術問題是提供一種砷化合物溶液，該砷化合物溶液中砷化合物分子結構明確，并且具有良好的藥物療效。為解決上述技術問題，本專利技術采用下列技術方案:一種砷化合物溶液，按照如下方法配制:取As2O3粉末加入到無菌去離子水中得到懸浮液，其中每HiL無菌去離子水中加入6 `25mg As2O3粉末；所得懸浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并調節溶液PH為7.5 9，并使所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為5 20mg/mL。本專利技術使用的As2O3粉末的純度為95% 99.9%。本專利技術用氫氧化鈉溶液溶解As2O3,并且通過控制氫氧化鈉的濃度和加入量調節溶液的pH值，而非如目前的常規做法般通過加入鹽酸調節溶液的pH值。本專利技術推薦溶解As2O3的NaOH溶液的濃度為I 6mol/L，優選為I 2mol/L。在As2O3完全溶解后，再用0.1 0.5mol/L(優選0.1 0.2mol/L)的氫氧化鈉溶液調節溶液pH到7.5 9。本專利技術上述配制過程中，可在室溫或在加熱條件下滴加NaOH溶液，本領域技術人員可以根據實際需要自行選擇滴加條件。進一步,優選所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為6 10mg/mL,更優選為 8mg/mL。本專利技術配制得到的砷化合物溶液，溶質組成主要包括偏亞砷酸鈉(NaAsO2)和As2O3，可用于制備粒徑小、分散無粘結、穩定性好的包載砷化合物的白蛋白納米粒。本專利技術要解決的第二個技術問題是提供一種由所述的砷化合物溶液制得的包載砷化合物的白蛋白納米粒，所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒以緩釋性良好的HAS和BSA為骨架材料包載砷化合物，其中砷化合物分子結構明確、具有良好的藥物療效，故是一種能提高藥物療效和生物相容性以及降低毒副作用的控釋制劑。為解決上述技術問題，本專利技術采用去溶劑化-物理固化法制備所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒，該方法具有快速簡便、可操作性強、粒徑均勻并分布較窄等特點。一種由所述的砷化合物溶液制備的包載砷化合物的白蛋白納米粒，其制備方法包括下列步驟:(1)配制白蛋白溶液:將白蛋白用去離子水配制成濃度為0.01 0.02g/mL的白蛋白溶液；所述的白蛋白為人白蛋白(HSA)或牛白蛋白(BSA)；(2)將砷化合物溶液與白蛋白溶液按照砷化合物溶液的投料As2O3與白蛋白的質量比為1: 5 20的比例混合，然后用NaOH溶液調節pH至7.5 9，攪拌下滴入脫水劑，得到乳濁液；所述脫水劑選自下列一種或兩種任意比例的混合:乙醇、丙酮，所述脫水劑與白蛋白溶液的投料體積比為2.0 3.5: I ；(3)將所得乳濁液置于水浴中通過物理交聯法固化，固化溫度為40 90°C，固化時間為10 240min，得到納米粒乳濁液；(4)所得納米粒乳濁液經蒸發去除脫水劑、離心分離得到包載砷化合物的白蛋白納米粒。進一步，所述步驟(2)中，優選在用氫氧化本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種砷化合物溶液，其特征在于：所述的砷化合物溶液按照如下方法配制：取As2O3粉末加入到無菌去離子水中得到懸浮液，其中每mL無菌去離子水中加入6～25mg?As2O3粉末；所得懸浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并調節溶液pH為7.5～9，并使所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為5～20mg/mL。
【技術特征摘要】
1.一種砷化合物溶液，其特征在于:所述的砷化合物溶液按照如下方法配制:取As2O3粉末加入到無菌去離子水中得到懸浮液，其中每HiL無菌去離子水中加入6 25mg As2O3粉末；所得懸浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并調節溶液pH為7.5 9，并使所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為5 20mg/mL。2.如權利要求1所述的砷化合物溶液，其特征在于:用于溶解As2O3粉末的NaOH溶液的濃度為I 6mol/L，用于調節溶液pH值的NaOH溶液的濃度為0.1 0.5mol/L。3.如權利要求1所述的砷化合物溶液，其特征在于:用于溶解As2O3粉末的NaOH溶液的濃度為I 2mol/L，用于調節溶液pH值的NaOH溶液的濃度為0.1 0.2mol/L，使所得砷化合物溶液的濃度以投料的As2O3計為6 10mg/mL。4.一種由權利要求1 3之一所述的砷化合物溶液制備的包載砷化合物的白蛋白納米粒，其特征在于所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒的制備方法包括下列步驟: (1)配制白蛋白溶液:將白蛋白用去離子水配制成濃度為0.01 0.02g/mL的白蛋白溶液；所述的白蛋白為人白蛋白或牛白蛋白； (2)將砷化合物溶液與白蛋白溶液按照砷化合物溶液的投料As2O3與白蛋白的質量比為1: 5 20的比例混合，然后用NaOH溶液調節pH至7.5 9，攪拌下滴入脫水劑，得到乳濁液；所述脫水劑選自下列一種或兩種任意比例的混合:乙醇、丙酮，所述脫水劑與白蛋白溶液的體積比為2.0 3.5: I ； (3)將所得乳濁液置于水浴中通過物理交聯法固化，固化溫度為40 90°C，固化時間為10 240min,得到納米粒乳池液； (4)所得納米粒乳濁液經蒸發去除脫水劑、離心分離得到包載砷化合物的白蛋白納米粒。5.如權利要求4所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒，其特征在于:所述步驟(2)中，在用氫氧化鈉溶液調節pH值至7.5 9后，加入NaCl溶液使NaCl終濃度為5 10mM，然后再滴入脫水劑。6.如權利要求4所述的包載砷化合物的白蛋白納米粒，其特征在于:所述的步驟(2)中，所述的砷化合物溶液與白...
【專利技術屬性】
技術研發人員：樓蘭花，范永升，溫成平，
申請(專利權)人：浙江中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：
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