本發明專利技術公開了一種高效獲得素心建蘭脫毒幼苗的方法，選擇生活狀態較好的素心建蘭朔果，經15%雙氧水、0.1%升汞和75%酒精消毒處理后接種在MF固體培養基中萌發，待種子萌發生長到形成2個嫩葉后，剪取素心建蘭幼苗的嫩芽尖、莖尖或者根尖，消毒處理后放入到誘導原球莖培養基MY中進行脫分化培養形成原球莖，原球莖取出分切成1mm2大小的小塊，接種在原球莖再分化誘導培養基MZ中先后誘導形成新芽、新根，當幼苗株高長到4cm-6cm，具有5-6個根時，將植物組織培養瓶的無菌瓶蓋打開，拿到光照培養架上培養，逐漸進行馴化培養。本發明專利技術能夠提高素心建蘭幼苗培育的成功率，而且還能大大縮短育種周期，得到脫毒的素心建蘭幼苗。
【技術實現步驟摘要】
【技術保護點】
一種高效獲得素心建蘭脫毒幼苗的方法，其特征在于：包括素心建蘭種子萌發誘導、外植體選擇與消毒、原球莖誘導、原球莖的保存與擴大培養、原球莖再分化誘導以及幼苗馴化培養，具體步驟如下：a、素心建蘭種子萌發誘導?選擇生活狀態較好的素心建蘭蒴果，將其取下，放在3?5℃冰箱中處理1周，使種子完成后熟；用剪刀將蒴果剪開取出種子，將種子放置在孔徑極細的聚丙烯篩網中，用10%雙氧水進行消毒處理10min，取出后用無菌水反復沖洗3次，瀝干水分；然后再利用0.1%升汞溶液處理2min，取出后用無菌水反復沖洗3次，瀝干水分；最后將種子放在75%酒精中消毒處理30s，處理后用無菌水反復沖洗3遍，將水分瀝干；處理后的種子播撒在改良MS固體培養基中，后將播種有素心建蘭種子的培養基放在人工氣候培養箱中培養，培養條件為相對濕度為70%，?25℃，2500lux光照12h/d處理，1.5?2月后素心建蘭種子萌發；b、外植體選擇與消毒待素心建蘭種子萌發后，生長到形成2?3個嫩葉后，在無菌操作環境中用解剖刀剪取素心建蘭幼苗的嫩芽尖、莖尖或者根尖，剪下的嫩芽尖、莖尖或者根尖放在0.1%升汞溶液處理20s，后將其放在75%酒精中消毒處理10s，再用無菌水反復沖洗3遍，瀝干水分；c、原球莖誘導沖洗后在無菌環境中用剪刀將嫩芽尖、莖尖或者根尖剪成1mm2大小的片狀，加入到誘導原球莖培養基中，每個組織培養瓶中放入10?15個外植體碎片，接種后放在人工氣候培養箱中培養，培養3個月后，培養基中出現淡黃色的球狀緊密的細胞團，該細胞團即為素心建蘭的原球莖；所述誘導原球莖的培養條件為相對濕度為65%，溫度為23℃，500lux光照12h/d處理；d、原球莖的保存與擴大培養原球莖形成后，將原球莖取出放在干凈無菌的塑料培養皿中，在無菌條件下用解剖刀將原球莖分切成1mm2大小的小塊，接種在原球莖保存培養基中培養，每隔120天轉接一次繼續傳代培養，提高原球莖的繁殖系數；所述原球莖保存培養基的配方同誘導原球莖形成培養基配方相同，培養條件與誘導原球莖形成過程條件一致；e、原球莖的再分化誘導將原球莖取出放在干凈無菌的塑料培養皿中，在無菌條件下用解剖刀將胚性原球莖分切成1mm2大小的小塊，接種在原球莖再分化誘導培養基中誘導培養，大約培養3周左右，原球莖再分化形成新芽，然后再將形成新芽的原球莖轉移到誘導根形成培養基中繼續培養，誘導培養形成新根，大約培養3周開始形成新根，培養條件為為溫度設定為65%，23℃，2500lux光照12h/d處理；?f、幼苗馴化培養當幼苗株高長到4cm?6cm，具有5?6個根時，將植物組織培養瓶的無菌瓶蓋打開，將組織培養瓶從人工氣候培養箱中拿出放在光照培養架上培養，逐漸將室內恒溫空調關閉，連續馴化一周左右，然后將組培幼苗從組培瓶中移出，移栽到素心建蘭馴化基質中，定期澆水施加1/5MS液體培養液，移至室外遮陽網下生長，生長4?5周后，移栽到素心建蘭栽培基質種，在正常光照、溫度條件下常規栽培管理。...
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：葛建，
申請(專利權)人：葛建，
類型：發明
國別省市：
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