一種高效表達生產內嗎啡肽2的方法及其應用技術

本發明專利技術屬于生物基因技術領域，目前未見利用人源性的神經生長因子前導肽實現對內嗎啡肽-2的高效分泌的相關文獻報道。本發明專利技術提供了一種高效表達生產內嗎啡肽2的方法，包括：設計一個含有人源神經生長因子信號肽序列和內嗎啡肽2表達序列的融合基因；然后將其插入表達載體，再轉化宿主細胞，篩選并鑒定陽性重組子，誘導培養并外分泌表達蛋白，最后經純化收集產物。本方法制備所得表達產物內嗎啡肽2在制備治療慢性疼痛及癌痛藥物中的應用。由于該產物是內源性阿片肽，不存在成癮、耐受等反應，而且在體內可長期表達，達到長時間治療疼痛的目的。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
一種高效表達生產內嗎啡肽2的方法，其具體步驟為：(a)設計并合成一個含有人源神經生長因子信號肽序列和內嗎啡肽2表達序列的融合基因，該融合基因的序列如SEQ?ID?NO:1所示；(b)將(a)所述的融合基因序列插入一表達載體，使該融合基因序列處于表達載體啟動子的控制之下，通過PCR擴增，篩選出陽性重組子，構建表達載體；(c)將(b)所構建的表達載體轉化宿主細胞，誘導培養內嗎啡肽2的外分泌表達；(d)收集表達產物內嗎啡肽2，并采用硅膠柱層析法純化內嗎啡肽2。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：吳飛翔，俞衛鋒，孫玉明，
申請(專利權)人：中國人民解放軍第二軍醫大學，
類型：發明
國別省市：