用于生產具有低濁度的酵母提取物的方法技術

本發明專利技術描述了生產酵母提取物的方法，其包括a）使微生物自溶；和b）對自溶產物進行固/液分離并回收可溶性組分，其中10步驟b）中的固/液分離在低于5.1的pH但高于1的pH下進行。本發明專利技術方法簡單、具有高的產率并導致酵母提取物具有低的濁度。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】用于生產具有低濁度的酵母提取物的方法
本專利技術涉及生產酵母提取物的方法。
技術介紹
酵母提取物通常用在食品工業中，以改善或增加所有種類的美味食品應用，比如湯、松脆物、土豆片、（加工的）肉類等等的香味。食品化學法典（FoodChemicalCodex）如下定義“酵母提取物”：“酵母提取物包含酵母細胞的水溶性組分，其組成主要是氨基酸、肽、碳水化合物和鹽。酵母提取物通過可食用的酵母中天然存在的酶或者添加食品級別的酶來對肽鍵水解而產生”。相比之下，該食品化學法典將“自溶的酵母”定義為：“從食品級酵母獲得的濃縮的、非提取的、部分可溶的消化物。溶解通過酵母細胞的酶促水解或自溶完成。可添加食品級鹽和酶。自溶酵母含有得自全酵母細胞的可溶和不可溶組分二者。其主要含有氨基酸、肽、碳水化合物、脂肪和鹽”。酵母自溶產物因此不同于“酵母提取物”，因為除了在酵母提取物中存在的所有感興趣的組分外，酵母自溶產物還含有未與可溶性組分分開的感興趣的細胞壁組分。酵母提取物通常如下生產：a）使酵母自溶；和b）對自溶產物進行固/液分離并回收液體組分。通常這種方法用膏狀酵母開始，所述膏狀酵母是通過在發酵結束時收獲酵母細胞后去除廢液，即通過去除酒糟來獲得的。接下來，對膏狀酵母中的酵母細胞進行處理，使得細胞破裂并釋放內含物。這通常通過兩個不同的過程來實現，或者產生自溶的酵母提取物或者產生水解的酵母提取物。自溶的酵母提取物是在細胞破裂以及聚合酵母材料消化（裂解）之后得自酵母可溶性物質的濃縮物。細胞破裂之后在培養基中釋放的活性酵母酶是裂解的主要原因。這些類型的酵母提取物通常不包含5’-核糖核苷酸，因為在自溶過程期間，天然RNA被分解或修飾為不可降解或幾乎不可降解為5’-核糖核苷酸的形式。富含氨基酸的這些類型的酵母提取物在食品工業中用作基本味感提供劑。酵母提取物中存在的氨基酸給食品添加了肉湯樣的肉湯味。另一方面，水解的酵母提取物是下述處理之后獲得自酵母的可溶性物質的濃縮物，所述處理為細胞破裂、消化（裂解）以及在裂解期間將蛋白酶和/或肽酶特別是核酸酶添加至酵母懸浮液。使天然的酵母酶在裂解之前失活，這通常通過熱沖擊來實現。通過本領域已知的方法獲得酵母提取物的問題在于，當所述酵母提取物溶解時，它們是混濁的，這在澄清的應用，比如澄清的湯等等中是不利的。對于這種混濁的可能的解決方案是應用額外的過濾步驟，比如超濾或微濾。然而，這由于需要額外的處理步驟不僅是不經濟的，而且由于引起混濁的材料留下來并被丟棄而導致損失。本專利技術的一個目的是提供生產低濁度的酵母提取物的方法，所述方法簡單且具有基于干物質的高的產率。專利技術詳述本專利技術的第一方面提供了生產酵母提取物的方法，所述方法包括：a）使酵母自溶；并b）對自溶產物進行固/液分離并回收可溶性組分，其中步驟b）中的固/液分離在低于5.1且高于1.0的pH下進行。在本專利技術上下文中，在步驟b）中獲得的“回收的可溶性組分”是酵母提取物。因此，本說明書通篇中，術語“在步驟b）中獲得的回收的可溶性組分”與“在步驟b）中獲得的酵母提取物”具有相同的含義。在本專利技術上下文中，酵母“自溶”被定義為下述過程，其中酵母細胞和聚合酵母材料的降解至少部分地受酵母細胞壁被（部分）破壞和/或破裂之后釋放到培養基中的活性天然酵母酶影響。優選的酵母的例子是Saccharomyces、Kluyveromyces和Candida。屬于Saccharomyces屬，特別是屬于Saccharomycescerevisiae種的菌株是最優選的。在本專利技術方法中使用的酵母可通過本領域中已知的任何合適的發酵方法來制備。酵母生物質在用于本專利技術的方法之前可被濃縮，例如通過離心或過濾來進行。例如，可使用膏狀酵母（已被濃縮至干物質含量為15-27%w/w的面包酵母）。任選地，可使用包含Brewer’s酵母或得自啤酒工廠的殘留物酵母（廢Brewer’s酵母）的發酵液。本專利技術提供了下述方法，其特別適于大規模生產酵母提取物。大規模表示發酵在超過10m3的發酵罐中進行。通過使酵母細胞壁破壞和/或部分地破裂來開始自溶過程。以這種方式，細胞被部分地打開，且釋放至少一些細胞內含物。為了使酵母細胞壁破壞和/或部分破裂，使用本領域技術人員已知的方法，對細胞進行化學、機械或酶促處理。機械處理包括均質（homogenisation）技術。為此目的，使用高壓均質機是可行的。其它的均質技術可以包括用顆粒例如沙和/或玻璃珠來混合，或者使用研磨裝置（例如珠粒研磨機）。化學處理包括使用鹽、堿和/或一種或多種表面活性劑或去垢劑。化學處理是較不優選的，因為它們可能導致RNA的部分降解，尤其是用到堿的時候，以及導致隨后2’-核糖核苷酸和3’-核糖核苷酸的形成。本專利技術人已意識到，當步驟b）中回收期間的pH低于5.1且高于1.0時，可生產具有非常低的濁度的酵母提取物（即，非常澄清的酵母提取物）。“濁度”也稱為“混濁度（cloudiness）”或“渾濁度（haziness）”，其通常由液體中懸浮的顆粒引起。技術人員知道如何測量濁度。測量濁度的合適的方法在實施例1中描述。本專利技術通篇中，術語“澄清的酵母提取物”和“具有低濁度的酵母提取物”被理解為具有相同的含義。在一種實施方式中，步驟b）中的固/液分離期間的pH低于5.1，優選地低于4.5或更低，更優選地低于4.2或更低，甚至更優選地低于4.0或更低，最優選地低于3.5或更低且高于1.0。優選的pH范圍是從1.0-5.0或從1.0-4.5或從1.0-4.2或從1.0-3.5和從2.0-5.1或從2.0-4.5或從2.0-4.2。最優選的是2.0-3.5的pH范圍。步驟b）中的固-液分離優選地通過常用的固-液分離方法，優選地通過離心或過濾來進行。當使用離心時，可溶性組分可作為上清液回收。在一種優選的實施方式中，步驟b）中的固-液分離通過離心進行。使用離心在經濟上是有優勢的，特別是當所述方法大規模進行時。在本專利技術方法中，在自溶方法中使用的條件是優選地使得相當大的一部分RNA以可降解為5’-核糖核苷酸的形式保留的條件。在此用術語“5’-核糖核苷酸”來指5’-GMP、5’-CMP、5’-UMP和進一步的5’-AMP和/或5’-IMP的混合物，其中所述5’-AMP可被部分或完全轉化成5’-IMP。術語“5’-核糖核苷酸”包括游離的5’-核糖核苷酸或其鹽。在上下文中，用“相當大的一部分RNA”表示優選地至少50%、更優選地至少60%、70%、75%，甚至更優選地至少80%，最優選地至少83%（都基于在步驟b之前的總RNA量）。高量的可降解為5’-核糖核苷酸的RNA可有利地導致酵母提取物具有非常低的濁度。在自溶過程期間，不需要RNA全部完整地保留，但是至少相當大的一部分RNA應以可降解為5’-核糖核苷酸的形式保留。通常，最多100%的RNA可以以可降解為5’-核糖核苷酸的形式保留。“以可降解為5’-核糖核苷酸的形式”表示，RNA應該是允許通過合適的酶轉化為5’-核糖核苷酸的形式。優選地，合適的酶是5’-磷酸二酯酶（5’-Fdase）。可降解為5’-核糖核苷酸的RNA的形式包括含有至少兩個核糖核苷酸單元的寡核苷酸。因而，可降解為5’-核糖核苷酸的形式的RNA可由包含完整RNA和不同長度的寡本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2011.02.17 EP 11154879.8;2011.02.17 US 61/443,8921.生產酵母提取物的方法，其包括：a)使微生物自溶；和b)對自溶產物進行固/液分離并回收可溶性組分；其中步驟b)中的固/液分離在低于4.0且高于1.0的pH下進行，以及自溶的第一階段的pH在4.5-9之間。2.根據權利要求1所述的方法，其中所述步驟b)中的pH為小于或等于3....

【專利技術屬性】
技術研發人員：伯圖斯·諾丹姆，
申請(專利權)人：帝斯曼知識產權資產管理有限公司，
類型：
國別省市：