一種添加中藥提取液的金耳深層發(fā)酵方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種添加中藥提取液的金耳深層發(fā)酵方法。將木蘭科植物五味子的干燥成熟果實粉碎，水浸泡后用電爐煎熬，取藥汁過濾后濃縮，加入金耳發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基進行深層發(fā)酵，能夠提高金耳菌絲體的產(chǎn)量。可應(yīng)用于具有較高活性的新型發(fā)酵制劑生產(chǎn)。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術(shù)屬生物工程
，具體涉及。將木蘭科植物五味子的干燥成熟果實粉碎，水浸泡后用電爐煎熬，取藥汁過濾后濃縮，加入金耳發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基進行深層發(fā)酵，能夠提高金耳菌絲體的產(chǎn)量。可應(yīng)用于具有較高活性的新型發(fā)酵制劑生產(chǎn)。【專利說明】
本專利技術(shù)涉及。屬生物工程
。
技術(shù)介紹
金耳為擔(dān)子菌綱，銀耳目，銀耳科，銀耳屬的干燥子實體，主要分布于我國西藏云南等地，野生資源稀有，古籍文獻記載用于肺熱、痰多、咳嗽、氣喘等癥的治療，具有較高的藥用價值。研究表明，金耳深層發(fā)酵液中含有人體必需的氨基酸，并且有鉀、鈉、鈣、鎂、鐵、鋅等礦質(zhì)元素。金耳以液體發(fā)酵進行生產(chǎn)時，在培養(yǎng)基中添加適量的中藥提取液，能促進其菌絲體的生長。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供。本專利技術(shù)的技術(shù)方案為:將金耳斜面保藏菌種活化，接種至搖瓶種子液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待菌絲體分散后將培養(yǎng)好的種子液接入添加了五味子水提液的搖瓶發(fā)酵液體培養(yǎng)基培養(yǎng)。發(fā)酵結(jié)束后，離心獲得濕菌絲體，烘干至恒重后稱重。比較中藥材添加前后菌絲體產(chǎn)量的差異(結(jié)果見表1)。本專利技術(shù)提出的添加中藥提取液的金耳深層發(fā)酵的具體操作步驟如下:(I)菌種培養(yǎng)出發(fā)菌種為本實驗室金耳斜面保藏菌種；①搖瓶種子培養(yǎng)搖瓶種子培養(yǎng)基=PDAlL加磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，牛肉膏2g，蛋白胨lg，VB1IOIOmg, pH6.0 ；培養(yǎng)方法:從斜面菌種中取3~4塊黃豆大小相同的菌塊，接種于搖瓶種子培養(yǎng)基中，250mL三角瓶裝培養(yǎng)基IOOmL于28°C，220r/min，振蕩培養(yǎng)10_14d ;搖瓶中預(yù)先裝有經(jīng)過消毒滅菌的玻璃珠，用于打散菌絲體；②搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基:葡萄糖4g/100mL、酵母粉lg/100mL、磷酸二氫鉀0.3g/100mL、硫酸鎂0.15g/100mL, VB1I^mg/1OOmL, ρΗ6.0 ；培養(yǎng)方法:將培養(yǎng)好的種子以15%的接種量接入添加了五味子水提液的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基中28°C，220r/min，振蕩培養(yǎng)10_14d ；(2)中藥水提液的制備稱取木蘭科植物五味子的干燥成熟果實30g，粉碎后加5倍量水浸泡3h，用電爐煎熬至溫和的沸騰狀態(tài)保持30min，離心(3000r/min)15min，上清液(藥汁)待用，殘渣補加適量冷水，再煮沸20min，離心取上清液(藥汁)，合并藥汁，濃縮至對應(yīng)發(fā)酵培養(yǎng)基體積的1/2，用于金耳深層培養(yǎng)。【具體實施方式】下面的實例將具體說明本專利技術(shù)的操作方法，但不能作為對本專利技術(shù)的限定。實例一從斜面菌種中取3~4塊黃豆大小相同的菌塊，接種于搖瓶種子培養(yǎng)基(PDAlLW磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，牛肉膏2g，蛋白胨lg，VB1IO^Omg, pH6.0), 250mL三角瓶裝培養(yǎng)基IOOmL于28°C，220r/min，振蕩培養(yǎng)12d ;將培養(yǎng)好的種子以15%的接種量分別接入未添加和添加了五味子水提液50mL的IOOmL搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基(葡萄糖4g/100mL、酵母粉lg/100mL、磷酸二氫鉀 0.3g/100mL、硫酸鎂 0.15g/100mL、VB1I^mgZlOOmL, ρΗ6.0) ,28°C,220r/min，振蕩培養(yǎng)12d ;培養(yǎng)結(jié)束后離心獲得濕菌絲體，烘干至恒重后稱重得到菌絲體產(chǎn)量。表1五味子水提液對金耳菌絲體產(chǎn)量的影響【權(quán)利要求】1.，其特征在于所述的中藥提取液是五味子水提液，是將一定量木蘭科植物五味子的干燥成熟果實粉碎，加5倍量水浸泡3h，用電爐煎熬至溫和的沸騰狀態(tài)保持30min，離心(3000r/min)15min，上清液(藥汁)待用，殘渣補加適量冷水，再煮沸20min，離心取上清液(藥汁)，合并藥汁，濃縮后得到。2.權(quán)利要求1所述的金耳深層發(fā)酵方法，其特征在于在發(fā)酵培養(yǎng)基中按照體積比1:2(五味子提取液/發(fā)酵培 養(yǎng)基)的比例加入了五味子水提液。【文檔編號】A01G1/04GK103518535SQ201310491993【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月16日 【專利技術(shù)者】鄧超, 付海田, 陳敬華 申請人:江南大學(xué)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種添加中藥提取液的金耳深層發(fā)酵方法，其特征在于所述的中藥提取液是五味子水提液，是將一定量木蘭科植物五味子的干燥成熟果實粉碎，加5倍量水浸泡3h，用電爐煎熬至溫和的沸騰狀態(tài)保持30min，離心(3000r/min)15min，上清液(藥汁)待用，殘渣補加適量冷水，再煮沸20min，離心取上清液(藥汁)，合并藥汁，濃縮后得到。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄧超，付海田，陳敬華，
申請(專利權(quán))人：江南大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：