神經分化相關基因BRSK2的siRNA的新用途制造技術

本發明專利技術屬于醫藥及基因工程領域，提供了BRSK2的siRNA的新用途，即作為胰腺癌細胞對化療藥物的增敏劑。本發明專利技術還提供了一種抑制胰腺癌細胞增殖的藥物組合物，該藥物組合物主要包括BRSK2的siRNA和絲裂霉素。本發明專利技術還涉及該藥物組合物的應用。本發明專利技術的藥物組合物能夠明顯抑制胰腺癌細胞增殖的存活，促進胰腺癌細胞的凋亡。而且BRSK2在人腦和胰腺組織中高豐量特異性表達，尤其在胰腺癌組織中比癌旁組織中表達量更高，故本發明專利技術的siRNA有高度的特異性。本發明專利技術為尋找有效的治療胰腺癌的藥物提供一種全新的、特異的、高效的、低副作用的方法和途徑。

Novel use of BRSK2 related to nerve differentiation related gene siRNA

The invention belongs to the field of medicine and gene engineering, and provides the new use of BRSK2 siRNA as a sensitizer for pancreatic cancer cells to chemotherapeutic drugs. The invention also provides a pharmaceutical composition for inhibiting the proliferation of pancreatic cancer cells, which mainly comprises BRSK2, siRNA and mitomycin. The invention also relates to the use of the pharmaceutical composition. The medicine composition of the invention can obviously inhibit the survival of the pancreatic cancer cell proliferation and promote the apoptosis of the pancreatic cancer cell. Moreover, BRSK2 is highly expressed in human brain and pancreatic tissues, especially in pancreatic cancer tissues. The siRNA of this invention is highly specific. The invention provides a novel, specific, efficient and low side effect method and approach for searching effective medicine for treating pancreatic cancer.

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于醫藥及基因工程領域，提供了。本專利技術還涉及了含有siRNA與化療藥物的藥物組合物及其應用。
技術介紹
胰腺癌是由胰腺癌上皮惡變形成的惡性腫瘤，雖然其發病率僅排名惡性腫瘤的第13位，但是其致死率卻在惡性腫瘤中位列第8位。根據世界衛生組織的統計，全世界每年有216 000多人確診為胰腺癌。在我國該癌癥發病率原很低，但近年也呈現逐年增多的趨勢，近年來已經升至第5位。即使現在有化療、放療、手術等多種治療方法，胰腺癌的生存率仍然不到5%。因為在出現初級癥狀時就已經伴有轉移現象，所以被確認為胰腺癌時往往已經是臨床晚期。因此只有10%的患者能夠接受手術，而輔助療法基本已經無能為力。造成胰腺癌的死亡率基本上與其發生率持平，五年生存率僅有5%。AMP-活性相關激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)是一個高度保守的絲氨酸蘇氨酸激酶，當細胞內能量下降時，AMPK經由其上游的激酶激活其催化區域的172位絲氨酸的磷酸化而被活化，因此又被稱為能量變化感應器。根據AMPK激酶結構域氨基酸的保守性，Manning等人將BRSK1，BRSK2, AMPK等13個激酶歸于AMPK亞家族。BRSK2是由 申請人:最早克隆出來的一個基因，剛開始認為其只在腦中表達，故起名為腦特異表達激酶2 (Brain-specific kinase 2，BRSK2)，后來發現其不僅僅存在于腦里，在胰腺中也有表達。BRSK2是 申請人:利用重要結構域同源篩選策略EST電子克隆技術，首先克隆并提交的新基因。前期對BRSK2的研究主要集中在它們在神經極化、突觸形成以及遞質釋放等過程中起到的應用。小鼠中BRSK2的同源基因被命名為SAD-A以及SAD-B，單突變BRSK2的動物模型表型正常，但是雙突變BRSK2的模型動物在出生后兩個小時就死亡，解剖發現動物的大腦皮層比正常的要薄得多，并且神經元缺乏軸突以及樹突。一個可能的機制是SAD通過磷酸化Tau，引起MAPs與微管蛋白結合不緊密，造成微管蛋白不能正常形成，最終對軸突形成造成影響。另外有研究表明，人的BRSK2是新的突觸小泡和活動機制相關蛋白激酶，通過磷酸化其活動區蛋白和小泡引發因子RM1，達到調節神經遞質釋放的功能。最新研究表明，除了在神經系統的中心起到調節神經極化、軸突樹突形成等起到作用，BRSK2還能特異地定位于肌肉神經節點處，控制神經遞質在周圍神經系統的釋放。DNR是一種重要的蒽環類抗癌藥物，分子式C27H29N010，通常稱為柔紅霉素。中文別名:正定霉素，柔毛霉素，紅比霉素，紅保霉素，佐柔比星，紅比脘。外文名=Daunorubicin, Daunomycin, Daunoblastin, Rubidomycin, Rubomycin, Ondena, Cerubidine.外文縮寫:DNR, DRB, DM, F.1.6339, NSC-82151, 13057R.P,本專利技術中也簡稱為 DAU。化學名:(1S,3S) -3-乙酸基-1,2,3,6,11-/K氧-3,5,12-二羥基-10-甲氧基-6,11- 二氧-1-1 蔡基-3-氨基-2，3，6-三去氧-a-L來蘇六吡喃糖甙。DNR藥物為橙紅色針狀結晶，易溶于水，其水溶液相當穩定，在0°C能保存3周，其活力不變，不溶于氯仿、丙酮、乙醚、苯。是Str.peucetius或Str.coeruleorubidus菌種所產生的抗生素,是從我國河北正定縣土壤中得到的放線菌菌株，故亦名正定霉素。阿霉素(DOX)分子式為C27H29N011，分子量 543.49，化學名稱:(2R, 4S) ~4~ (3-Amino-2,3,6-trideoxy-a -L-lyxo-hexopyranosyloxy)-2-hydroxyacetyl-l, 2, 3, 4-tetrahydro-2, 5, 12-trihydroxy-7-methoxynaphthacene_6，11-dione。通常為桔紅色的凍干粉劑。阿霉素是一種抗腫瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，對RNA的抑制作用最強，抗瘤譜較廣，對多種腫瘤均有作用，屬周期非特異性藥物，對各種生長周期的腫瘤細胞都有殺滅作用。主要適用于急性白血病，對急性淋巴細胞白血病及粒細胞白血病均有效，主要的毒性反應有，白細胞和血小板減少，不同程度的毛發脫落，心臟毒性，惡心、食欲減退，藥物溢出血管外可引起組織潰瘍及壞死。絲裂霉素，英文名=Mitomycin,分子式:C15H18N405,分子量:334.33，CAS號:50-07-7。結構如下:本文檔來自技高網...

【技術保護點】
神經分化相關基因BRSK2的siRNA的一種用途，其特征在于，神經分化相關基因BRSK2的siRNA是胰腺癌細胞對藥物的增敏劑。

【技術特征摘要】
1.神經分化相關基因BRSK2的SiRNA的一種用途，其特征在于，神經分化相關基因BRSK2的siRNA是胰腺癌細胞對藥物的增敏劑。2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的藥物是柔紅霉素、絲列霉素或者阿霉素。3.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的神經分化相關基因BRSK2的siRNA的序列如SEQ ID NO I或者SEQ ID NO 3所示。4.一種增強體外胰腺癌細胞對絲裂霉素敏感性的方法，其特征在于，在胰腺癌細胞的培養基中加入神經分化相關基因BRSK2的siRNA。5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，在對胰腺癌細胞的培養基中加入絲裂霉素之前，加入神經分化相關基因BRSK2的siRNA。6.一種抑制胰腺...

【專利技術屬性】
技術研發人員：余龍，王穎黎，袁健，郭澤坤，李如偉，
申請(專利權)人：復旦大學，
類型：發明
國別省市：