木聚糖酶、編碼它們的核酸以及其制備和應用方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及具有木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶活性的酶，其例如催化內(nèi)部β-1,4-木糖苷鍵或內(nèi)β-1,4-葡聚糖鍵的水解；和/或?qū)⒕€性多糖β-1,4-木聚糖降解成木糖。因此，本發(fā)明專利技術(shù)提供分解作為植物細胞壁主要成分的半纖維素的方法和過程，包括水解任何植物或木材或木制品、廢木料、紙漿、紙制品或廢紙或紙副產(chǎn)品中的半纖維素的方法和過程。另外，還提供設(shè)計新木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶的方法和其應用方法。所述木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶在增加的pH和溫度下具有增加的活性和穩(wěn)定性。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術(shù)涉及具有木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶活性的酶，其例如催化內(nèi)部β-1,4-木糖苷鍵或內(nèi)β-1,4-葡聚糖鍵的水解；和/或?qū)⒕€性多糖β-1,4-木聚糖降解成木糖。因此，本專利技術(shù)提供分解作為植物細胞壁主要成分的半纖維素的方法和過程，包括水解任何植物或木材或木制品、廢木料、紙漿、紙制品或廢紙或紙副產(chǎn)品中的半纖維素的方法和過程。另外，還提供設(shè)計新木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶的方法和其應用方法。所述木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶在增加的pH和溫度下具有增加的活性和穩(wěn)定性。【專利說明】 本申請為分案申請，原申請的申請日為2008年08月01日，申請?zhí)枮?00880118805.9 (PCT/US2008/072030)，專利技術(shù)名稱為“木聚糖酶、編碼它們的核酸以及其制備和應用方法”。_2] 關(guān)于在聯(lián)邦資助的研究下做出的專利技術(shù)權(quán)的聲明 本專利技術(shù)一部分是依據(jù)能源部提供的第D0E1435-04-03-CA-70224號合同，在政府的支持下進行的。政府可以在本專利技術(shù)中享有一定的權(quán)利。_4] 相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2007年10月3日提交的美國臨時申請序列號60/977，348的權(quán)益。該文件的內(nèi)容通過引用而并入本文。參考通討EFS-WEB提奪的序列表本申請通過USPTO EFS-WEB服務(wù)器電子提交，如在MPEP § 1730I1.B.2.(a) (A)所批準并闡明的，并且該電子提交包括電子提交的序列(SEQ ID)表；該序列表的全部內(nèi)容通過引用并入本文用于所有目的。序列表根據(jù)如下電子提交的.txt文件確定:【權(quán)利要求】1.分離的、合成的或重組的核酸(多核苷酸)，其包含 (a)編碼至少一種多肽的核酸(多核苷酸)，其中所述核酸包含與下列核酸序列具有至少約 50%、51%、52%、53%、54%、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更多或完全(100%)序列同一性的序列: (i )SEQ ID NO:1的核酸(多核苷酸)序列，其具有表1中所述的一個或更多個核苷酸殘基改變(或其等價物)，或具有下列核苷酸殘基改變中的至少I個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、16個、17個或18個或一些或全部:編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)锳AC ;編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)镃GC ;編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)镃AC ;編碼氨基酸殘基9的密碼子由CCC變?yōu)镚AC ;編碼氨基酸殘基17的密碼子由TTC變?yōu)镚TC ;編碼氨基酸殘基21的密碼子由TTC變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基33的密碼子由CTG變?yōu)镚CG ;編碼氨基酸殘基38的密碼子由CGT變?yōu)镃AC ;編碼氨基酸殘基44的密碼子由AGC變?yōu)锳CG ;編碼氨基酸殘基63的密碼子由ATC變?yōu)镚TC ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)镚AG ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)镚TC ;編碼氨基酸殘基108的密碼子由TTC變?yōu)锳AG ;編碼氨基酸殘基125的密碼子由CAG變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基150的密碼子由GTA變?yōu)镚CC ;編碼氨基酸殘基188的密碼子由AGC變?yōu)镚AG和/或編碼氨基酸殘基189的密碼子由TCC變?yōu)镃AG ;或(ii) SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ IDNO: 11、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO:21 或 SEQID NO:23的核酸(多核苷酸)序列； 其中(i)或(ii)的所述核酸編碼具有木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶活性的至少一種多肽，或編碼能夠產(chǎn)生木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶特異性抗體(起表位或免疫原作用的多肽或肽)的 多肽 或肽， (b)(a)的核酸(多核苷酸)，其中所述序列同一性如下測定:(A)通過用序列比對算法分析或通過視覺觀察，或(B)在至少約 20、30、40、50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150 或更多個殘基的區(qū)域上,或在cDNA、轉(zhuǎn)錄物(mRNA)或基因的全長上； (c)(a)或(b)的核酸(多核苷酸)，其中所述序列比對算法是2.2.2版BLAST算法，其中過濾設(shè)置被設(shè)置為blastall-p blastp_d〃nr pataa〃_F F并且所有其它選項被設(shè)置為默認值； (d)編碼至少一種多肽或肽的核酸(多核苷酸)，其中所述核酸包含在嚴格條件下與這樣的核酸雜交的序列:所述核酸包含SEQ ID NO:1的核酸(多核苷酸)序列以及具有表1中所述的一個或更多個核苷酸殘基改變(或其等價物)，或具有下列核苷酸殘基改變中的至少I個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、16個、17個或18個或一些或全部改變:編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)锳AC ;編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)镃GC ;編碼氨基酸殘基4的密碼子由ACC變?yōu)镃AC ;編碼氨基酸殘基9的密碼子由CCC變?yōu)镚AC ;編碼氨基酸殘基17的密碼子由TTC變?yōu)镚TC ;編碼氨基酸殘基21的密碼子由TTC變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基33的密碼子由CTG變?yōu)镚CG ;編碼氨基酸殘基38的密碼子由CGT變?yōu)镃AC ;編碼氨基酸殘基44的密碼子由AGC變?yōu)锳CG ;編碼氨基酸殘基63的密碼子由ATC變?yōu)镚TC ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)镚AG ;編碼氨基酸殘基73的密碼子由GGC變?yōu)镚TC ；編碼氨基酸殘基108的密碼子由TTC變?yōu)锳AG ;編碼氨基酸殘基125的密碼子由CAG變?yōu)門AC ;編碼氨基酸殘基150的密碼子由GTA變?yōu)镚CC ;編碼氨基酸殘基188的密碼子由AGC變?yōu)镚AG ;和/或編碼氨基酸殘基189的密碼子由TCC變?yōu)镃AG， 其中所述多肽或肽具有木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶活性或能夠產(chǎn)生木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶特異性抗體(起表位或免疫原作用的多肽或肽)， 以及所述嚴格條件包括這樣的洗滌步驟，其包含在約65°C溫度下于0.2XSSC中洗滌約15分鐘； (e)編碼至少一種多肽或肽的核酸(多核苷酸)，其中所述核酸包含在嚴格條件下與包含 SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:9、SEQ ID 本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：K·A·加里，R·德爾梅爾，
申請(專利權(quán))人：維萊尼姆公司，
類型：發(fā)明
國別省市：